蒋欢
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省农业科技自主创新基金江苏省农业科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 与黄花马蹄莲互作过程中胡萝卜软腐果胶杆菌的差异表达蛋白分析被引量：3
- 2011年
- 通过病原菌胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种与黄花马蹄莲组织的离体互作,运用双向电泳技术、质谱技术及Im-ageMaster 2D platinum 5.0(GE)软件对互作过程中蛋白质差异表达进行分析。结果表明:70个蛋白点在互作中存在表达差异,占蛋白点总数的18.13%。通过质谱分析发现:2个特异表达蛋白分子伴侣DnaK和1-脱氧木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)均为代谢类蛋白;3个显著上调表达蛋白中ATP合酶α亚基和半胱氨酸合酶为代谢类蛋白,而β-内酰胺酶为抗生素类蛋白。
- 杨钟灵钱国良蒋欢胡白石刘凤权范加勤
- 关键词：蛋白质组分析
- 胡萝卜软腐果胶杆菌clpP基因的功能研究被引量：1
- 2013年
- 为探索clpP基因对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum,P.c.c)生物学特性及致病性等方面的影响,采用同源重组法构建clpP基因缺失突变体ΔclpP和互补菌株ΔclpP(clpP),测定突变体及互补菌株的运动性、生物膜、抗氧化压力,以及在不同培养基和不同温度下的生长能力、部分致病因子活性及致病性等表型,并采用RT-PCR分析了果胶酸裂解酶(Pel)、纤维素酶(Cel)、蛋白酶(Prt)和坏死诱导蛋白(necrosis-inducing protein,Nip)等相关致病因子的编码基因转录水平变化。结果表明:ΔclpP的运动性无变化,生物膜形成、高温和营养饥渴耐受力及抗氧化压力等均下降;果胶酶、纤维素酶与蛋白酶活性有不同程度降低,酶活性检测平板上水解圈的直径分别比野生株下降19.35%、34.38%和35.00%;ΔclpP的致病性显著下降,离体接种‘黄花马蹄莲’叶片和大白菜叶柄,病斑面积分别比野生株的减小99.00%和99.60%;在4个毒力因子中,qRT-PCR显示:ΔclpP果胶酸裂解酶与纤维素酶mRNA相对表达量为野生菌株的40.00%左右。由此可见,clpP基因对胡萝卜软腐果胶杆菌的生长和致病性具有多方面的决定作用。
- 李婷蒋欢杨钟灵邓亚岷杜硕刘凤权范加勤
- 关键词：CLPP生物学特性
- 胡萝卜软腐果胶杆菌中受马蹄莲组织提取液诱导表达基因的克隆及功能分析
- 胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterterium carotovorum subsp. carotovorum, Pcc)寄主广泛,可引起多种作物及观赏性植物的软腐,Pcc引起的软腐病一直是植物病理学研究...
- 蒋欢
- 文献传递
- 胡萝卜软腐果胶杆菌鞭毛钩基因flgK的功能被引量：2
- 2012年
- 【目的】为了研究鞭毛钩基因flgK在胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum,P.c.c)的功能。【方法】本研究采用两亲同源交换法构建了基因缺失突变体ΔflgKpcc并构建了互补菌株ΔflgKpcc-KH,测定突变体及其互补菌株的菌体形态、运动性、致病因子、致病性等表型。【结果】与野生菌株PccS1相比,ΔflgKpcc鞭毛缺失,菌体易沉降,在0.3%半固体培养基上运动能力明显降低,生长速率无明显变化,但是纤维素酶和蛋白酶的活性、生物膜形成能力明显下降,对感病寄主的致病力显著减弱。基因互补可以使上述突变表型恢复。【结论】实验表明,鞭毛基因flgK突变导致了菌体的运动性降低、病原菌毒性相关的酶活力下降,从而导致致病力下降。
- 杨钟灵邓亚岷杜硕李婷蒋欢刘凤权范加勤
- 关键词：鞭毛致病因子
- 白花马蹄莲诱导胡萝卜软腐果胶杆菌ubiG基因的克隆与功能分析被引量：2
- 2013年
- 利用含有无启动子的Km抗性基因的转座子mariner对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterterium carotovorum subsp.carotovorum,Pcc)菌株PccS1进行转座诱变,建立突变体文库,以白花马蹄莲组织提取液为诱导物,诱导突变菌株,鉴定突变、并验证。筛选获得1株受白花马蹄莲组织提取液诱导的突变株PM5,经亚克隆鉴定,转座子插入位点为辅酶Q氧甲基转移合成酶ubiG基因(Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase)。利用同源重组获得该基因的缺失突变体△ubiG。与野生型相比,△ubiG对不同寄主的致病性均减弱(黄花马蹄莲和白花马蹄莲上的病斑面积减半,大白菜的病斑面积仅为1/5);突变菌株菌体沉降速率明显加快,生物膜产量降低约50%,无胞外蛋白酶产生。此外,△ubiG对链霉素和新霉素抗性分别比野生型增强了2.0倍和26.5倍,突变菌株的相关功能经互补可以部分恢复。以上结果说明,ubiG基因可被白花马蹄莲诱导并参与胡萝卜软腐杆菌的致病作用。
- 刘怀阿苏建坤刘琴李婷杨钟灵蒋欢
- 关键词：基因敲除功能分析
