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沙焱: 作品数：16 被引量：18H指数：3; 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金佛山市重点科技攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>

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聚ADP-核糖聚合酶在DNA修复、保持基因组完整性及细胞死亡过程中的作用被引量：1: 2005年; 聚ADP核糖化是细胞在对内外环境的遗传毒物刺激的应答过程中对蛋白质进行翻译后修饰的一种机制,催化此过程的酶即聚ADP 核糖聚合酶。聚ADP核糖化涉及细胞的许多重要功能,如DNA修复、细胞增殖、细胞死亡。; 沙焱庄志雄何云; 关键词：DNA修复基因组稳定性细胞死亡

氢醌对L-02肝细胞损伤的研究: 2007年; [目的]探讨氢醌(HQ)对L-02肝细胞损伤及其可能的作用机制。[方法]应用噻唑蓝(MTT)比色法检测浓度分别为0、5、10、20、40、80、160和320gmol/L的HQ作用24h后对L-02肝细胞存活率的影响;利用万能倒置显微镜观察不同浓度HQ染毒之后L-02肝细胞的形态学改变并摄影成像;利用全自动生化分析仪检测不同浓度HQ染毒24h后L-02肝细胞的乳酸脱氢酶(LDH)漏出率和丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,以观察HQ对L-02肝细胞膜完整性的影响。[结果]在0～80μmol/L浓度的范围内染毒24h后,HQ对L-02肝细胞的存活率没有明显的影响(P>0.05);浓度≥160μmol/L时,染毒24h后,存活率则明显下降(P<0.01),LDH漏出率、ALT和AST活性均有随着HQ浓度的增加而升高的趋势;160和320μmol/L组LDH漏出率与对照组比较有明显升高(P<0.01)。但ALT和AST活性只在320μmol/L组与对照组比较才有明显增加(P<0.01)。此外,160和320μmol/L组L-02肝细胞的形态与对照组相比发生了明显的改变。[结论]HQ可能是通过损伤细胞膜而对L-02肝细胞产生毒性影响。; 胡恭华庄志雄杨淋清沙焱杨建平; 关键词：氢醌 L-02肝细胞细胞毒性

几种重要DNA修复基因对化学毒性的保护机制及多态性研究: 庄志雄唐焕文胡大林江高峰杨淋清黄海燕刘建军袁建辉胡恭华庾蕾刘起展何云朱志良陈雯任泽舫沙焱杜柳涛刘汝青王军彩杨晓华蒋友胜杨建平涂晓志叶小明; 本研究是申请者在自己多年来主持多项国家级、省级、市级课题的基础上，总结提炼的自选项目，属于预防医学领域。　　研究系列结合分子生物学实验研究与流行病学调查的方法，建立了研究DNA 修复基因功能的技术平台，构建了人类错配修复...; 关键词：; 关键词：DNA 修复基因基因多态性

人DNA聚合酶β基因靶向RNA干扰重组子克隆及序列分析被引量：2: 2006年; 目的克隆用于人DNA聚合酶β(DNApolymerasebeta,Polβ)基因靶向RNA干扰的双链RNA(doublestrandRNA,dsRNA)寡核苷酸绿色荧光蛋白C1载体重组子“pEGFPC1pU6dsRNA”,为进一步研究人Polβ基因在环境化学污染物所致的DNA损伤修复中的作用机制作准备。方法依据Genbank中人polβ基因的cDNA序列,运用dsRNAoligonucleotidedesigner设计出用于RNA干扰用的dsRNA寡核苷酸序列,并以化学方法合成之。通过重组DNA技术将合成好的dsRNA克隆到含人pU6启动子的pSIRENRetroQ逆转录病毒载体上,以此重组子转化感受态E.coliDH5α,经氨卞青霉素筛选后进行扩增,并抽提质粒。运用EcoRⅠ和BglⅡ消化并回收“pU6dsRNA”目的片段,再将“pU6dsRNA”亚克隆到pEGFPC1上,获“pEGFPC1pU6dsRNA”重组子,并进行酶切鉴定和序列分析。结果经酶切鉴定发现,“pEGFPC1pU6dsRNA”载体重组子处于预期条带位置,序列分析显示与所设计的目的片段序列完全相符。结论作者克隆了用于人Polβ基因靶向RNA干扰的dsRNA绿色荧光蛋白C1载体重组子“pEGFPC1pU6dsRNA”,为进一步研究Polβ基因功能作好了准备。; 胡大林庄志雄何云纪卫东唐冬生袁建辉方道奎沙焱杨建平涂晓志胡恭华; 关键词：DNA聚合酶Β RNA干扰 DSRNA 重组子

抑制聚ADP核糖聚合酶1活性的短发夹RNA载体构建: 2006年; 目的构建抑制人聚ADP核糖聚合酶1(hPARP1)活性的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达载体。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的、靶向hPARP1基因的寡核苷酸,各69对碱基,退火,然后利用BamHⅡ及EcoRⅠ与pSIRENRetroQ载体连接。用EcoRⅠ及BglⅡ切取其中U6启动子及下游的shRNA部分,与pEGFPC1载体重组构建pEGFPC1shRNA载体。结果重组构建的pEGFPC1P1、pEGFPC1P2、pEGFPC1N载体经双酶切电泳分析及插入基因片段序列分析,结果表明330个碱基成功插入到预计位点。结论载体的成功构建,为进一步研究聚ADP核糖聚合酶在DNA修复过程中的功能打下基础。; 沙焱庄志雄何云胡大林胡恭华杨建平涂晓志; 关键词：RNAI SHRNA PEGFP-C1

石英粉尘接尘人员红细胞膜丙二醛负荷分类Logistic回归分析被引量：2: 2005年; 目的探讨石英粉尘接尘人员外周静脉血红细胞膜丙二醛(MDA)负荷分类情况的主要影响因素。方法运用整群抽样研究方法,抽取陶瓷企业石英粉尘健康接尘人员179名,采集外周静脉血2 m l,肝素钠抗凝,以硫代巴比妥法检测红细胞膜MDA负荷,计算MDA的平均负荷作为标准参考值;利用调查表对接尘人员的10个可能影响因素进行调查;同时,对厂内各工序点的生产环境噪声及粉尘浓度进行监测;以接尘人员MDA负荷分类(设大于或小于标准参考值的二分变量)为应变量,以被调查的10个可能影响因素为自变量,运用成组资料的非条件Logistic回归分析模型拟合回归曲线,探寻主要影响因素。结果工龄、粉尘浓度、是否经常佩戴防护口罩、饮茶情况及吸烟等5个因素,最终进入回归方程(α=0.05)。结论进入回归方程的5个因素为影响接尘工人红细胞膜MDA负荷的最主要因素。; 胡大林刘移民唐冬生杨建平彭晓春胡恭华方道奎沙焱涂晓志庄志雄; 关键词：石英粉尘红细胞膜 LOGISTIC回归

RNA干扰技术建立人PARP-1缺陷细胞株被引量：3: 2005年; 目的建立并鉴定聚ADP核糖聚合酶1(hPARP1)缺陷细胞株,用于研究hPARP1基因的作用机制及其缺陷与DNA损伤发生的关系。方法将用已经构建的pEGFPC1shRNA(包含两个PARP1基因及一个阴性对照)转染支气管上皮细胞(16HBE),使之在16HBE中表达,转染后命名为16HBEP1、16HBEP2及16HBEN。用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中hPARP1基因的表达水平。结果pEGFPC1shRNA在真核细胞成功表达;16HBEP1和16HBEP2的蛋白表达水平分别下降了84.3%及63.7%。结论hPARP1缺陷细胞株的成功建立和鉴定为hPARP1基因功能研究提供了一种有效手段。; 沙焱曾玉云庄志雄何云胡大林胡恭华杨建平涂晓志; 关键词：RNA干扰

石英接尘者红细胞膜GSH-px活性影响因素的多元回归分析: 2005年; 目的探索石英粉尘接尘者外周静脉血谷胱甘肽过氧化物酶活性影响因素。方法以整群抽样研究方法,抽取健康的职业性石英粉尘接尘者179名,分别采集外周静脉血2ml,以肝素钠抗凝,运用二硫代二硝基苯甲酸法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力,并计算GSH-px活性水平的平均值作为参考标准;以考马斯亮蓝法测定红细胞膜蛋白含量;利用自制的调查表对8个可能的影响因素进行调查,同时,对厂内各工序点的生产环境噪声及粉尘浓度2个因素进行现场监测,共计考察10个可能因素;按样本红细胞膜GSH-px活性大于或小于参考值标准进行二分变量分类,并以此二分变量为应变量,以被考察的10个可能影响因素为自变量,运用成组资料的非条件Logistic回归分析模型进行筛选,寻找主要影响因素。结果接尘工龄、工序点粉尘浓度、防护口罩使用情况、饮茶习惯及吸烟指数等5个因素,最终进入了回归方程(α=0.05)。结论石英粉尘接尘人员红细胞膜GSH-px活性主要受接尘工龄、工序点粉尘浓度、防护口罩使用情况、饮茶及吸烟等5个因素的影响。; 胡大林刘移民唐冬生彭晓春何云沙焱涂晓志胡恭华杨建平庄志雄; 关键词：石英粉尘谷胱甘肽过氧化物酶红细胞膜非条件LOGISTIC回归

氢醌对L-02肝细胞DNA损伤及细胞周期的影响被引量：6: 2007年; 目的探讨氢醌(HQ)对体外培养L-02肝细胞DNA损伤及细胞周期的影响。方法将L-02肝细胞用不同浓度(0、5、10、20、40、80、160和320μmol/L)的HQ作用24h,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定L-02肝细胞的相对存活率,采用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞DNA的损伤状况,并采用流式细胞术检测细胞周期分布状况。结果在0～80μmol/L的范围内,HQ对L-02肝细胞的存活率没有明显的影响(P>0.05);当染毒剂量超过160μmol/L时,其存活率则明显地下降(P<0.01)。随着HQ作用浓度的升高,L-02肝细胞DNA链的断裂程度也随着逐渐增加。0～80μmol/L范围内的HQ作用24h后,L-02肝细胞的细胞周期也发生了明显的改变,表现为S期细胞比例明显增加,G1期细胞的比例下降。结论HQ对L-02肝细胞DNA具有损伤作用,并且在体外能够引起明显的S期细胞阻滞。; 胡恭华庄志雄夏芳莲涂晓志纪卫东杨建平沙焱; 关键词：苯氢醌肝细胞 DNA损伤细胞周期

氢醌诱导L-02肝细胞凋亡的研究: 2007年; 目的探讨氢醌（HQ）对体外培养L-02肝细胞凋亡（apoptosis）的影响和HQ毒性作用的分子机制。方法采用噻唑蓝（MTT）比色法测定不同浓度HQ（0,5,10,20,40,80,160和320μmol/L）作用24 h后L-02肝细胞的相对存活率;采用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测HQ染毒后的细胞凋亡状况。结果HQ在0~80μmol/L的染毒剂量范围内,对L-02肝细胞的存活率没有明显的影响（P〉0.05）,当HQ染毒剂量超过160μmol/L时,L-02肝细胞的存活率则明显地下降（P〈0.01）。10,20,40,80,160和320μmol/L组L-02肝细胞DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡特征性梯状条带,并且随着HQ染毒剂量增加而渐趋明显。流式细胞术检测显示,HQ各染毒剂量组（5,10,20,40,80,160和320μmol/L）作用24 h后均可引起L-02肝细胞的调亡,并呈现出一定的剂量—反应关系;此外,还可出现明显的亚二倍体峰。结论HQ在体外能够诱导L-02肝细胞发生凋亡。; 胡恭华庄志雄庾蕾纪卫东沙焱杨建平; 关键词：氢醌 L-02肝细胞噻唑蓝比色法凋亡

沙焱

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