王开卓
- 作品数：11 被引量：52H指数：4
- 供职机构：湖南农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生经济管理更多>>
- 翘嘴鳜miR-222的表达特征（英文）被引量：4
- 2015年
- 为了解翘嘴鳜mi R-222的时空表达规律,研究利用实时荧光定量PCR的方法检测mi R-222在翘嘴鳜不同组织、胚胎发育及胚后发育中的相对表达丰度。研究结果显示,mi R-222在肌肉相关的组织中表达较高,特别是在成年翘嘴鳜的白肌中表达最高;胚胎发育阶段结果显示,mi R-222在胚胎发育的2细胞期就有表达,而表达量在心动期达到最高。不同组织及不同发育阶段的差异性表达结果表明,mi R-222很可能参与调控鳜鱼肌肉的生长发育。为研究合成代谢过程中mi R-222在肌肉生长调控中的表达规律,通过对翘嘴鳜幼鱼在饥饿一周后饱食一餐的实验处理下,利用实时荧光定量的方法测定mi R-222在骨骼肌中的相对表达变化。结果显示,mi R-222的表达量在恢复喂食后的1h显著上升(P<0.05),表明mi R-222很可能是调节鱼类骨骼肌生长过程中,参与快速应答信号系统的一类mi RNA。研究为mi R-222在鱼类发育中的调控作用提供一些理论依据。
- 朱鑫胡毅王开卓吴萍易潭陈敦学张俊智陈韬
- 关键词：MICRORNA翘嘴鳜骨骼肌
- 鳜鱼Siniperca chuatsi红肌sMyHC1基因cDNA的克隆及其表达分析被引量：2
- 2014年
- 本研究采用同源克隆技术克隆鳜鱼红肌肌球蛋白重链1(sMyHC1)基因cDNA序列,其总长为5 940 bp。经生物信息学分析表明,鳜鱼sMyHC1基因cDNA编码区全长5 823 bp,总共编码1940个氨基酸。序列分析表明,鳜鱼MyHC1基因cDNA存在3个ATP结合位点、3个actin结合位点、1个ELC结合位点、1个RLC结合位点和2个Loop环。对鳜鱼sMyHC1基因进行成鱼红、白肌表达分析表明,其在红肌和心肌中的表达量显著高于白肌。研究结果为深入研究鳜鱼肌纤维分型及鳜鱼肉质研究提供可靠的实验数据和理论基础。
- 易潭刘希良宾石玉王开卓吴萍褚武英陈韬
- 关键词：鳜鱼基因克隆
- 斑鳜myostatin基因及其启动子的克隆与序列分析被引量：7
- 2012年
- 采用Tail-PCR和常规PCR技术首次克隆出斑鳜myostatin基因及其启动子序列。经生物信息学分析发现,斑鳜myostatin基因由3个外显子和2个内含子组成,编码区1131bp,共编码376个氨基酸。斑鳜myostatin启动子区域大小为840bp,存在1个TATAA-box、4个E-box和1个CAAT-box作用元件。利用软件CLUSTALW和MEGA3.1构建14种硬骨鱼的myostatin启动子的系统进化树结果表明:斑鳜同大口黑鲈亲缘关系最近,与鲤鱼和缨野鲮亲缘关系较远,其结果与传统形态学分类中的亲缘关系一致。斑鳜myostatin基因及其启动子克隆与特征分析,将为进一步研究鱼类myostatin基因的表达调控及其功能分析提供参考。
- 孙科军刘希良王开卓陈敦学褚武英陈韬张建社成嘉
- 关键词：斑鳜肌肉生长抑制素启动子
- 5斑鳜myostatin基因及其启动子的克隆与序列分析
- 采用TaiI-PCR和常规PCR技术首次克隆出斑鳜myostatin基因及其启动子序列.经生物信息学分析发现,斑鳜myostatin基因由三个外显子和两个内含子组成,编码区ll31bp,共编码376个氨基酸.斑鳜myos...
- 孙科军刘希良王开卓陈敦学褚武英陈韬张建社成嘉
- 关键词：斑鳜肌肉生长抑制素启动子
- 文献传递
- 饵料中低聚糖添加对草鱼肝脏组织基因转录组的影响
- 草鱼是我国重要的淡水经济鱼类,但草鱼在养殖过程中极易受到传染疾病的影响而导致巨大的经济损失.为了降低感染风险,抗生素被添加到饲料中,进而危害人类健康.本研究表明,选择低聚糖作为抗生素的替代品,添加到投喂给草鱼幼鱼的饲料中...
- 刘希良王开卓李玉珑陈敦学褚武英张建社
- 关键词：草鱼低聚糖肝脏基因芯片
- 翘嘴鳜生长抑制素基因的克隆及其表达分析被引量：1
- 2013年
- 本研究采用RT-PCR技术克隆得到翘嘴鳜Myostatin基因ORF区序列。经过生物信息学分析表明,翘嘴鳜Myostatin基因的编码区全长1131bp,编码376个氨基酸。序列分析结果表明,翘嘴鳜的Myostatin存在一个典型的TGF-β功能区域,而且C-末端区有生物活性保守性很高的9个半胱氨酸残基,这些氨基酸残基由二硫键的形式链接形成"CysKnot"结构。对翘嘴鳜Myostatin进行成鱼红白肌表达分析表明其在红肌中的表达量显著高于白肌。研究结果为科学、系统地阐明经济鱼类骨骼肌纤维分型和分化调控机制奠定了基础。
- 王开卓宾石玉李虹辉李玉珑刘知行张建社褚武英
- 关键词：翘嘴鳜骨骼肌肌肉生长抑制素基因克隆
- 鳜小肽转运载体PepT1基因分子特征及其表达研究被引量：7
- 2014年
- 小肽转运载体(PepT1)是低亲和力、高容量的肽转运载体,在小肽的吸收过程中发挥着重要的作用。研究采用同源克隆和RACE技术克隆了鳜鱼(Siniperca chuatsi)PepT1基因全长cDNA序列,其cDNA序列全长为2480 bp,包含43 bp的5′UTR序列,232 bp的3′UTR序列,以及2205 bp开放阅读框,编码735个氨基酸。氨基酸序列同源性分析结果显示,鳜鱼与石斑鱼(Epinephelus aeneus)、鲈鱼(Dicentrarchus labrax)PepT1间同源性均为89%,与其他非鱼类物种的同源性则在46%—56%。经预测,鳜鱼PepT1编码蛋白的分子量为64.8 kD,等电点为8.97,该蛋白具有与哺乳动物同源蛋白相似的12个螺旋跨膜结构,并且在跨膜区9和10之间有一个大的外环;跨膜区氨基酸高度保守,并存在有5个膜外N-糖基化位点和3个膜内含蛋白激酶C基序的相同区域。实时荧光定量表达分析表明,鳜鱼PepT1基因在前肠和中肠中表达量显著高于后肠(P<0.05),这说明前、中肠是鳜鱼肠道吸收小肽的主要部位;在胚后不同发育阶段鳜鱼前肠均能检测到PepT1基因的表达,并且在10 g个体中表达量最高,之后随着体重的增加其表达量维持在一个稳定水平。本研究结果首次报道了鳜鱼PepT1基因全序列及其分子表达特征,为鱼类营养及生理学的研究提供有价值的参考资料。
- 刘知行张健东刘小燕李虹辉王开卓陈琳褚武英张建社
- 关键词：鳜鱼克隆
- 鳜鱼肌球蛋白重链基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：3
- 2012年
- 肌球蛋白重链(MyHC)是肌肉中的主要结构和功能蛋白,在肌肉收缩过程中起关键作用.根据鳜鱼肌球蛋白重链基因中高亲水性区域DNA设计一对特异性引物,将该基因片段亚克隆到pET-32a质粒,构建重组表达载体并转化入大肠杆菌BL21中.诱导条件优化实验结果显示,该菌株经0.8 mmol/L IPTG诱导3 h可大量表达融合蛋白.将经亲和层析纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.ELISA和免疫组化测试结果表明:此抗体有较好的特异性和抗原性.鳜鱼MyHC基因表达的研究为深入研究肌球蛋白重链的功能特性及其对肉质性状的影响奠定基础,为提高鱼类肉质提供理论基础和技术支持.
- 刘希良王开卓成嘉蒙涛陈敦学李玉珑张红芳张建社褚武英
- 关键词：鳜鱼肌球蛋白重链原核表达多克隆抗体
- 翘嘴鳜Smyd1和Myostatin基因的克隆及其表达分析
- Smyd1是一种对于肌原纤维形成和肌肉收缩所必需的组蛋白甲基转移酶，在组蛋白甲基化修饰中起催化作用。Smyd1主要是催化组蛋白H3中赖氨酸的甲基化，多发生于K4，K9，K27，K36和K79位(H3K4，组蛋白H3的第4...
- 王开卓
- 关键词：翘嘴鳜肌肉生长抑制素基因基因克隆营养胁迫
- 鳜鱼生肌调节因子基因(mrf4)的克隆及其在成鱼和胚胎中的表达被引量：1
- 2013年
- 为分析鳜鱼(Siniperca chuatsi)生肌调节因子基因(mrf4)的特征,阐明其在鳜鱼不同组织以及胚胎发育不同时期的表达规律,用反转录PCR法扩增鳜鱼mrf4的cDNA序列,并将其连入克隆载体,进行测序、分析;用荧光定量PCR检测mrf4基因在不同组织及胚胎发育不同阶段的表达情况。结果:克隆的鳜鱼mrf4 cDNA全长为726 bp,编码的蛋白质含241个氨基酸,具有生肌调节因子的典型的碱性螺旋–环–螺旋结构;mrf4在成体鳜鱼白肌、红肌、心脏、脑以及不同发育阶段的胚胎中均有表达,在红肌中的表达量显著高于在其他组织中的表达量(P<0.05);在胚胎发育阶段的原肠期、尾芽期、肌肉效应期,mrf4的表达量呈递增趋势,而在胚胎发育的心搏期、血液循环期、仔鱼期,mrf4的表达量呈递减趋势,肌肉效应期mrf4的表达量明显高于胚胎发育的其他阶段的mrf4表达量(P<0.05)。
- 李虹辉许友卿刘小燕刘知行王开卓褚武英张建社丁兆坤
- 关键词：鳜鱼克隆
