张艳芳
- 作品数：17 被引量：40H指数：4
- 供职机构：中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项吉林省教育厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 乙型脑炎病毒样颗粒疫苗的制备及其免疫保护效率的初步评价被引量：5
- 2016年
- 将乙型脑炎病毒prME及其信号肽基因片段克隆到穿梭载体AcBacmid中,构建重组穿梭载体AcBac-prME。Lipofectine介导其转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒Ac-prME。Western-blotting、间接免疫荧光试验及电镜观察,证实Ac-prME介导prME在Sf9细胞中高效表达,且形成了病毒样颗粒。小鼠免疫和攻毒试验表明,该病毒样颗粒免疫可以使小鼠获得有效抵抗乙型脑炎病毒强毒株攻击的能力,保护率高达100%,从而为研制基于乙型脑炎病毒样颗粒的亚单位疫苗奠定了基础。
- 张艳芳杜瑞坤黄少梅张涛刘金良朱碧波王华林邓菲曹胜波
- 关键词：乙型脑炎病毒杆状病毒病毒样颗粒亚单位疫苗
- 用于杆状病毒滴度测定的重组细胞系及其测定方法
- 本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种用于杆状病毒滴度测定的重组细胞系及其测定方法。其中，用于杆状病毒滴度测定的重组细胞系的构建方法为：构建报告质粒；利用报告质粒转染Sf9昆虫细胞；将转染后的Sf9昆虫细胞用含有博来...
- 邓菲邓马平张艳芳王华林胡志红
- 中药灵芝多糖调控细胞毒性T细胞抗肿瘤机制研究被引量：14
- 2013年
- 目的通过研究中药灵芝多糖对S180荷瘤小鼠细胞毒性T细胞活性的影响,探讨中药灵芝多糖抗肿瘤机制。方法小鼠胃饲灵芝多糖,流式细胞术检测荷瘤小鼠T细胞亚群变化,3H-TdR掺入法检测荷瘤小鼠CTL细胞毒活性。结果胃饲灵芝多糖使荷瘤小鼠的CD8+T淋巴细胞数量、CTL细胞毒活性均明显提高(P<0.01)。结论中药灵芝多糖可增强荷瘤小鼠细胞毒性T细胞免疫活性,从而达到抗肿瘤效果。
- 郭焱崔健丽李超英李春莉吴泽民张艳芳李文杰
- 关键词：细胞毒性T细胞抗肿瘤
- 利用杆状病毒表达载体系统表达重组乙型肝炎病毒核心蛋白被引量：3
- 2007年
- 目的利用杆状病毒表达载体系统制备重组乙型肝炎病毒核心蛋白。方法构建含有HBV C基因的杆状病毒转移载体pFastBac Dual-HBV core,转化大肠埃希菌DH10Bac进行转座,提取重组Bacmid DNA转染昆虫细胞Sf9,获得含有HBV C基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染Sf9细胞进行乙型肝炎病毒核心蛋白表达,然后通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析表达情况。结果成功构建了含HBV C基因的重组杆状病毒,而且在昆虫细胞Sf9中表达了乙型肝炎病毒核心蛋白。结论利用Bac to Bac杆状病毒表达系统,成功地表达了乙型肝炎病毒核心蛋白,为进一步研究奠定了基础。
- 高琳琳王晓燕张颖慧李岩邓菲张艳芳林菊生
- 关键词：昆虫细胞
- 基于干预TGF-β1免疫抑制的猪苓多糖抗肿瘤机制研究
- 郭焱苏颖李春莉崔健丽顾红缨吴泽民刘斌张艳芳
- 三种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法的建立被引量：1
- 2016年
- 为建立可同时检测新疆出血热病毒(CCHFV)、裂谷热病毒(RVFV)、拉沙病毒(LSV)的荧光基因芯片,分别针对CCHFV和RVFV的S基因、LSV的NP基因,应用生物学软件设计了3对引物与6条探针。运用多重PCR扩增和标记目的片段,将其与基因芯片杂交,最后扫描分析结果。分别对杂交温度与杂交时间进行条件优化,最后对基因芯片的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果显示,设计的所有探针都可以与目的片段特异性杂交,探针1a与1b可检测到CCHFV,探针2a与2b可检测到RVFV,探针3a与3b可检测到LSV。相比多重PCR,荧光基因芯片检测CCHFV的灵敏度提高了10倍,检测RVFV的灵敏度提高了100倍,检测LSV的灵敏度提高了100倍。结果表明,本试验建立的同时检测3种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法特异性高、敏感性强,可用于这3种病毒的快速检测与甄别。
- 曹佳媛田明尧崔卓栋柴丹范园园赵飞张艳芳金宁一
- 关键词：新疆出血热病毒拉沙病毒多重PCR
- 裂谷热病毒Gn1蛋白在杆状病毒系统中的表达与纯化被引量：1
- 2022年
- 采用杆状病毒表达系统表达并纯化裂谷热病毒(RVFV)Gn蛋白,并对其反应原性进行鉴定。根据GenBank公布的Gn蛋白的序列,选取其主要抗原区Gn1设计引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆至pFastBac HTB载体,构建重组转移载体,并将其转化DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选。将鉴定正确的重组杆粒转染Sf9细胞获得重组杆状病毒,经SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白正确表达后,将重组杆状病毒感染High5细胞,大量表达重组蛋白,并用镍柱亲和层析法进行纯化,最终获得纯度较高的Gn1重组蛋白。本研究为RVF新型疫苗研发及诊断试剂的研发提供了重要材料。
- 孙潇张艳芳叶静叶静曹胜波
- 关键词：重组杆状病毒蛋白纯化
- 五株鼠痘病毒的分离及生物学特性分析
- 2024年
- 目的:通过对5例疑似感染鼠痘病毒的实验小鼠脑组织进行病毒分离培养、分子生物学鉴定和形态学研究,进一步深入探索鼠痘病毒的生长特性与形态学特征。方法:从感染的鼠脑组织中分离鼠痘病毒,针对鼠痘病毒基因设计特异性引物,建立一种实时荧光定量PCR检测方法,对病毒进行检测鉴定;利用非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc145细胞),通过电镜切片观察和生长曲线测定,考察病毒的形态特征和感染特征。结果:成功分离得到5株鼠痘病毒,病毒感染Marc145细胞后发生相应病变效应,在感染后0~72 h病毒滴度逐渐升高并在72 h达到最高值,随后滴度逐渐降低,但在感染96 h仍然保持较高病毒滴度;5株鼠痘病毒毒株在整体的生长特性与形态学方面具有相似性。结论:研究结果为深入探究鼠痘病毒的生命周期、感染机制、病毒结构和宿主免疫反应等病毒学基础提供了基础。
- 邓雅丽谢玲玲付杰周敏张艳芳胡思婧邓菲
- 关键词：鼠痘病毒生物学特性
- 一种抗SFTSV的中和性单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及一种抗SFTSV的中和性单克隆抗体，其重链可变区包含三个CDR区，所述CDR区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示，轻链可变区包含三个CDR区，所述CDR...
- 邓菲沈姝张艳芳吴晓丽阿布力米提·莫明胡思婧王华林张涛
- 寨卡病毒NS1蛋白在杆状病毒系统中的表达及免疫原性分析被引量：4
- 2020年
- 本研究旨在采用杆状病毒表达系统表达并纯化寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)NS1蛋白,并对其免疫原性进行鉴定。将ZIKV NS1基因克隆至杆状病毒载体pFastBac1中,构建重组转移载体,将其转化DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选。将鉴定正确的重组杆粒转染sf9细胞,获得重组杆状病毒,经SDSPAGE和Western-blot鉴定蛋白正确表达后,将其感染High5细胞,大量表达重组蛋白,并用镍柱亲和层析法进行纯化,将纯化后的ZIKV NS1蛋白免疫BALB/c小鼠,进行血清特异性抗体效价检测。最终结果显示,获得了纯度较高分泌表达的ZIKV NS1蛋白,并且血清特异性抗体效价实验表明,纯化的ZIKV NS1蛋白能够诱导小鼠产生特异性免疫反应,有很好的免疫原性。本研究为ZIKV疫苗和诊断试剂盒的研发奠定了重要的基础。
- 魏思琪张路平张艳芳叶静叶静曹胜波
- 关键词：NS1蛋白杆状病毒免疫原性
