李盼
- 作品数:10 被引量:13H指数:3
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- 嗜水气单胞菌外膜蛋白基因DNA疫苗载体的构建及分析被引量:4
- 2013年
- 为构建嗜水气单胞菌的DNA疫苗载体,根据已发表的该菌外膜蛋白基因momp的核苷酸序列设计一对特异性引物,应用PCR技术,扩增到嗜水气单胞菌L316的主要外膜蛋白基因,并插入到真核表达载体pcDNA3上,构建成DNA疫苗,命名为pcDNA3-POMP。以纯化的原核表达蛋白GST-POMP免疫SD大鼠制备抗血清,用ELISA测定抗体效价达到1∶100 000以上;用pcDNA3-POMP质粒转染293细胞,转染48h后收集细胞,提取细胞的RNA进行RT-PCR,检测到外源基因的表达。至此,初步完成嗜水气单胞菌DNA疫苗表达载体的构建,为进一步疫苗免疫和效价的检测奠定基础。
- 李盼李素一吴唯维林天龙林晨韬陈叙
- 关键词:嗜水气单胞菌DNA疫苗外膜蛋白
- 嗜水气单胞菌外膜蛋白ISCOM疫苗免疫欧洲鳗鲡后抗体分泌细胞变化
- 2013年
- 制备嗜水气单胞菌MOMP-ISCOMs疫苗,使用该疫苗口服和注射免疫欧洲鳗鲡,分别于口服或注射免疫后第14、28d分离欧洲鳗鲡的皮肤和肾脏细胞,使用ELISPOT技术分析其中抗体分泌细胞ASC的数量变化。结果显示:2种免疫方式均能不同程度增加皮肤和肾脏中免疫细胞的数量;其中口服免疫组非特异性免疫细胞数量增加速度较快,注射免疫组特异性免疫细胞数量增加更多。
- 林晨韬黄春兰李艳虹李盼宋铁英
- 关键词:欧洲鳗鲡ASC
- 嗜水气单胞菌DNA疫苗免疫欧洲鳗鲡的初步探索
- 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)是引起欧洲鳗鲡暴发性败血症的主要病原菌之一,严重威胁鳗鲡养殖产业.DNA疫苗作为新一代疫苗,因其安全高效倍受关注.DNA疫苗在欧洲鳗鲡中的应用在国内外尚属空白...
- 陈叙林晨韬杨金先李素一陈曦李盼
- 关键词:嗜水气单胞菌DNA疫苗欧洲鳗鲡
- 创伤弧菌外膜蛋白OmpU的基因克隆与表达被引量:2
- 2013年
- 创伤弧菌是导致鳗鲡产生体表溃疡死亡的重要致病菌。本研究克隆了创伤弧菌FJ03-X2株外膜蛋白基因(ompU),构建含该基因的原核表达载体,命名为pET-32a-ompU,将其转化到大肠杆菌E.coli中进行融合表达。37℃,0.5mmol.L-1的IPTG诱导4h,融合蛋白rompU以可溶形式表达,采用Ni-NTA亲和层析法纯化融合蛋白,SDS-PAGE显示纯化后的rompU为与预期大小一致的单一条带。将纯化的rompU免疫SD级大鼠,ELISA检测收获的多克隆抗体血清效价,并通过Western-blot证实该OmpU多克隆抗体可以识别创伤弧菌FJ03-X2株中的天然外膜蛋白OmpU。
- 李素一吴唯维李盼柯翎许斌福林晨韬林天龙陈叙
- 关键词:创伤弧菌克隆原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- 创伤弧菌DNA疫苗载体的构建及表达分析
- 创伤弧菌/(Vibrio vulnificus/),又名海洋弧菌,其属于弧菌属,是一种革兰氏阴性,嗜盐性的杆状细菌,常存在于海鲜与海水中,能引起水产鱼类疾病。鳗鲡感染此菌可引起出血病,且发病速度快,死亡率高,对鳗鲡养殖业...
- 李盼
- 关键词:创伤弧菌DNA疫苗LPP真核表达
- 文献传递
- 肠道消化吸收相关因子对大黄鱼生长速度的影响被引量:4
- 2015年
- 为了分析大黄鱼Pseudosciaena croce在人工养殖过程中,常常出现同一批次鱼苗在相同养殖条件下个体差异明显、部分鱼生长速度缓慢的原因,试验选取福州市连江县某鱼场同一网箱内同一批次投放的鱼苗,根据个体大小分组,体质量为60~100 g的为生长正常组,体质量为10~40 g的为生长缓慢组,在相同养殖条件下饲喂300 d,试验结束时,采用消化酶活性检测、荧光定量PCR和石蜡组织切片3种方法,分别测定大黄鱼肠道的消化酶活性和菌群数量,观察肠道的组织形态学变化并进行对比分析。结果表明:两组鱼的各种消化酶活性均无显著性差异(P〉0.05);在生长缓慢组鱼肠道内,酵母菌和弧菌等兼性厌氧菌数量高于生长正常组,且两组之间酵母菌数量有显著性差异(P〈0.05);生长正常组鱼肠道绒毛密集、修长且完整,而生长缓慢组鱼肠道绒毛稀疏,有大量损伤,前肠上皮内淋巴细胞数量显著高于生长正常组(P〈0.05)。研究表明,大黄鱼鱼群生长速度与肠道菌群及肠绒毛状态有关,而与肠道消化酶活性无关。
- 李英英陈曦李素一李盼李艳虹宋铁英
- 关键词:大黄鱼肠道菌群组织形态学
- 欧洲鳗鲡对创伤弧菌免疫应答相关基因的筛选
- 创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是公认的人兽共患病的重要致病菌之一,也是水产养殖经济动物的致病菌,由其引发的典型的血性败血症可导致鳗鲡爆发性死亡.作者所在实验室于2003年从福建省长乐市发病欧洲鳗鲡分离到毒...
- 吴唯维李盼李素一柯翎许斌福陈叙林天龙林晨韬
- 关键词:欧洲鳗鲡创伤弧菌抑制差减杂交免疫应答
- 斑马鱼在鱼类病原免疫学研究中的应用被引量:3
- 2014年
- 斑马鱼全基因组测序已经完成,建立了多个专门的在线数据库,作为模式生物在遗传学、发育生物学等领域已得到了广泛的应用。本文介绍了斑马鱼用于鱼类病原免疫学研究的优点,包括个体发育过程透明、免疫系统较成熟,具有先天性和获得性2种免疫系统;多种鱼类来源的细菌和病毒在成年斑马鱼和胚胎中都能感染和复制,使其成为研究鱼类病原的入侵机制和宿主免疫应答的模式生物。同时,对当前已建立的鱼类细菌和病毒病原斑马鱼感染模型以及在疫苗方面的研究现状作简要概述。
- 吴唯维李盼柯翎李素一陈华陈叙林天龙林晨韬
- 关键词:斑马鱼病原免疫模式生物
- 创伤弧菌DNA疫苗的构建及相应基因的原核表达、蛋白质纯化与抗体制备
- 创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是重要的人兽共患病的致病菌,在医学界和鱼病学界都颇受重视。本研究旨在构建创伤弧菌的DNA疫苗,并对DNA疫苗在欧洲鳗鲡上的应用进行初步探索,为合理选择疫苗提供新思路。我们应用...
- 陈叙林晨韬李素一柯翎李盼吴唯维
- 关键词:创伤弧菌DNA疫苗欧洲鳗鲡
- 创伤弧菌DNA疫苗的构建及斑马鱼的免疫
- 创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)出血性败血症的重要致病菌,严重危害了欧鳗的养殖.本实验室于2003年7月从福建省长乐市发病欧洲鳗鲡上分离到毒力较强的创伤弧菌菌...
- 李盼李素一吴维唯林晨韬陈叙
- 关键词:创伤弧菌DNA疫苗斑马鱼