雷求刚
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 腺相关病毒载体的杆状病毒生产系统的构建被引量：2
- 2010年
- 由于腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的非致病性及能感染多种组织类型,重组AAV载体(rAAV)在基因治疗领域备受关注。然而,如何高效生产rAAV以适应临床上对其高产量的需求一直是限制其应用的瓶颈。借助杆状病毒携带rAAV包装所需组分,通过感染昆虫细胞来生产rAAV是一种能够解决其产量瓶颈的生产方式。将AAV2的Rep、Cap基因序列以及含AAV2 ITR及EGFP表达框的序列分别构建到三个杆状病毒中,通过共感染Sf9细胞来生产rAAV,结果显示成功包装出rAAV病毒,且病毒活力较好。这种生产方式很容易放大,将为AAV载体产业化及临床应用奠定基础。
- 雷求刚徐增辉钱其军
- 关键词：RAAV杆状病毒
- 重组AAV（rAAV）杆状病毒生产系统的研究
- 腺相关病毒/(Adeno-associated Viruses, AAV/)感染人体后不会产生致病性,通过去除病毒基因仅保留两端ITR序列进一步增加了重组AAV载体的安全性,而且其携带的基因表达期比较长,因此在基因治疗领...
- 雷求刚
- 关键词：杆状病毒
- 文献传递
- 重组腺相关病毒2/8的聚乙烯亚胺制备法
- 2010年
- 重组腺相关病毒2/8(recombinant adeno-associated virus 2/8,rAAV2/8)是基因治疗中的一种非复制型病毒,包装困难、耗时、费力。本研究中,一种采用非病毒载体聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)来高效包装重组腺相关病毒的方法被成功建立。在成功构建并鉴定包装rAAV2/8所需的pAAV-neo-eGFP、p5E18-VD286和pSH3-D 3个质粒后,用优化过转染条件的PEI转染方法共转染这3个质粒到HEK293细胞,获得了高效稳定的转染效率,并成功包装出携带有绿色荧光蛋白eGFP的rAAV2/8。rAAV2/8的细胞感染实验表明包装出的病毒具感染活性,证明了用PEI共转染三质粒高效包装rAAV2/8具可行性。
- 徐增辉雷求刚周秀梅钱其军
- 关键词：PEI
