董娜
- 作品数：12 被引量：38H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
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- 7种植物多糖对小鼠卵清蛋白免疫反应的佐剂活性(英文)被引量：14
- 2013年
- 目的寻找和筛选具有较好佐剂功能的天然多糖。方法自中药提取当归多糖、黄芪多糖、板蓝根多糖、茯苓多糖、黄精多糖、枸杞多糖和淫羊藿多糖。苯酚硫酸法测总糖含量;间羟联苯法分析糖醛酸含量;凝胶渗透色谱法测定多糖分子量分布。按照分组,每只BALB/c小鼠肌内注射60μg卵清蛋白(OVA),OVA+0.1mg氢氧化铝,OVA+1mg多糖,OVA+生理盐水,并分别在第1,28和58天进行3次注射,在第21,52,70天采血,测定血清OVA抗体滴度。结果 7种多糖中的总糖含量为板蓝根总糖,65.41%;当归总糖,30.88%;黄芪总糖,43.70%;黄精总糖,48.88%;茯苓总糖,58.68%;枸杞总糖,45.83%;淫羊藿总糖,32.60%;总糖中糖醛酸含量为板蓝根糖醛酸,13.36%;当归糖醛酸,19.73%;黄芪糖醛酸,6.53%;黄精糖醛酸,5.96%;茯苓糖醛酸,1.96%;枸杞糖醛酸,8.96%;淫羊藿糖醛酸,7.53%。7种多糖表现出不同的分子质量分布特征。初次免疫,7种多糖和铝佐剂均未激活小鼠血清OVA抗体产生;在第2次免疫后,淫羊藿多糖佐剂组产生较高滴度的抗体,达到1:105;第3次免疫后淫羊藿多糖佐剂组抗体滴度进一步提高,板蓝根多糖、当归多糖及茯苓多糖佐剂组的OVA特异性抗体滴度均达到1:105,与OVA+0.1mg氢氧化铝及OVA+生理盐水组比较有显著差异(P<0.05)。结论板蓝根多糖、当归多糖、茯苓多糖及淫羊藿多糖均具有很好的佐剂作用,特别是淫羊藿多糖具有较强的激发体液免疫活性。多糖有望成为候选的新型免疫佐剂。
- 董娜张贵强贾培媛武军华李帅单俊杰王玉霞
- 关键词：免疫佐剂
- 淫羊藿多糖对HIV-1 gp120膜蛋白的佐剂活性研究
- 目的：评价淫羊藿总多糖(EKP)中组分EKP-B和均一多糖EKP-B-1对人类免疫缺陷病毒HIV-1 gp120蛋白的免疫佐剂活性.方法：EKP-B、EKP-B-1、铝佐剂和生理盐水分别与HIV-1gp120配伍免疫小鼠...
- 单俊杰董娜李倩张贵强贾培媛武军华赵修南王玉霞
- 关键词：艾滋病疫苗结构蛋白
- 文献传递
- 膨化脱毒处理后蓖麻籽粕中蓖麻毒素的检测被引量：1
- 2013年
- 目的检测膨化脱毒蓖麻籽粕中的残余毒素。方法蓖麻籽粕经过粉碎、匀浆及离心后得到匀浆上清,应用酶联免疫吸附分析(ELISA)、免疫印迹、金标免疫层析试纸检测蓖麻籽粕在PBST匀浆上清中的蓖麻毒素;应用细胞生长抑制实验测定蓖麻籽粕在生理盐水匀浆上清的细胞毒性。结果经双夹心ELISA检测蓖麻原粕匀浆含有较高浓度的蓖麻毒素,达到0.25 mg/g;对细胞生长有明显的抑制作用;应用蓖麻毒素检测试纸显示强阳性条带。应用试纸条检测经加热膨化处理后的样品只显示微弱条带。ELISA检测结果表明加热膨化处理后蓖麻籽粕中的毒素含量明显下降,脱毒率达到99%以上。加热膨化处理后样品的匀浆上清在高浓度时对细胞生长仍有一定抑制作用,但与原粕比较细胞毒性明显下降;应用免疫印迹检测蓖麻籽粕结果与ELISA和细胞实验结果一致。结论本研究将ELISA、免疫印迹和免疫层析试纸相结合,建立了有效检测蓖麻籽粕中残余蓖麻毒素的方法,为蓖麻籽粕脱毒处理样品的质量检测及其应用提供了实验依据。
- 武军华李倩董娜王玉霞贾培媛梁晓赵元忠
- 关键词：蓖麻毒素酶联免疫吸附分析免疫印迹
- 淫羊藿多糖对甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的免疫佐剂作用被引量：16
- 2013年
- 目的研究探讨淫羊藿多糖对甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的免疫佐剂活性。方法淫羊藿多糖G1和G4,生理盐水分别与流感病毒裂解疫苗配伍免疫小鼠,初次免疫后2周收集小鼠血清,ELISA法检测血清中抗体的滴度;MTT法测定脾淋巴细胞增殖反应;ELISA测定IFN-γ和IL-4的水平,流式细胞术测定脾淋巴细胞CD4+、CD8+、CD3+和CD19+亚群。结果初次免疫后,淫羊藿多糖G1和G4能显著提高免疫小鼠血清的抗体滴度;能明显增强脾T淋巴细胞的增殖反应,可以显著提高脾淋巴细胞CD4+、CD8+和CD3+的含量及CD3+/CD19+的比值,诱导分泌IFN-γ的水平升高。结论淫羊藿多糖可增强小鼠对H1N1的免疫应答,可以作为甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的一种新型免疫佐剂。
- 董娜李倩张贵强贾培媛武军华单俊杰王玉霞
- 关键词：淫羊藿多糖甲型H1N1流感病毒裂解疫苗免疫佐剂
- 板蓝根多糖疫苗佐剂的候选药研究
- <正>疫苗是人类目前可以彻底消灭某一疾病的唯一武器。近20年,随着生物技术的快速发展以及对疫苗安全性的强烈要求,新型疫苗大量涌现。这些新技术疫苗虽具有良好的抗原性和低毒等优点,但其免原性大大减弱,必须配合高效的佐剂使用,...
- 王玉霞朱婷李倩麻浩董娜文松赵修南单俊杰
- 文献传递
- 淫羊藿多糖对HIV-1 gp120膜蛋白的佐剂活性研究
- 目的评价淫羊藿总多糖(EKP)中组分EKP-B和均一多糖EKP-B-1对人类免疫缺陷病毒HIV-1gp120蛋白的免疫佐剂活性。方法 EKP-B、EKP-B-1、铝佐剂和生理盐水分别与HIV-1gp120配伍免疫小鼠。免...
- 单俊杰董娜李倩张贵强贾培媛武军华赵修南王玉霞
- 关键词：淫羊藿多糖HIV-1GP120佐剂
- 文献传递
- 蓖麻毒素细胞毒性及其中毒小鼠组织病理改变被引量：6
- 2013年
- 目的探讨蓖麻毒素对不同细胞的细胞毒性及小鼠各主要组织脏器毒性的基本病理改变。方法应用MTT法检测不同浓度(1 ng/ml,10 ng/ml,100 ng/ml,1μg/ml)蓖麻毒素给药24 h对不同细胞株(Caco-2,MDCK,MDCK-MDR1,HepG2,H1299)的细胞活性的影响;经灌胃方式使小鼠中毒,中毒24 h观察蓖麻毒素对小鼠脏器的基本病理变化,测定相关生化指标,分析蓖麻毒素对小鼠肝肾损伤。结果不同浓度的蓖麻毒素对Caco-2,MDCK,MDCK-MDR1,HepG2和H1299细胞均有一定的毒性,随着毒素浓度的升高,细胞毒性亦呈上升趋势,有明显量效关系,其中MDCK细胞对蓖麻毒素最为敏感。病理学检测显示蓖麻毒素可致小鼠肾小球出血及部分肾血管内皮细胞缺如,肝细胞水肿、近端肠绒毛损伤、轻度坏死性肺炎并有炎性细胞浸润。血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、甘油三酯(TG)、肌酐(CREA)均升高,表明小鼠中毒3 h内肝功能和肾功能已出现一定程度的损伤。结论蓖麻毒素通过抑制蛋白质合成而导致细胞坏死。不同细胞对蓖麻毒素具有不同的敏感性,表现为蓖麻毒素中毒早期,动物即可出现严重的肝、肾损伤。
- 董娜武军华贾培媛李倩温新宇冯泽国周建平王玉霞
- 关键词：蓖麻毒素细胞毒性病理改变
- 脱毒蓖麻籽粕中蓖麻毒素的提取及测定被引量：1
- 2013年
- 目的优化双夹心ELISA法检测蓖麻籽粕中蓖麻毒素含量检测方法,并对方法学进行必要的验证。方法以蓖麻籽粕中蓖麻毒素的含量为指标,对提取溶剂、蓖麻籽粕与溶剂体积比、提取时间、提取过程是否匀浆进行单因素实验,选取最佳提取条件。在最佳提取条件下对方法的精密度和准确度进行验证。结果优化出双夹心ELISA法检测蓖麻籽粕中蓖麻毒素的最佳提取溶剂为含0.1%Tween 20的磷酸盐缓冲液(PBST),提取溶剂体积为1∶10(质量/体积),匀浆后提取浸泡时间为1 h。该方法特异性高,蓖麻籽粕中杂质成分对测定无干扰。蓖麻毒素在3.91～250μg/L浓度范围内线性关系良好,日内和日间精密度测定的相对标准偏差(RSD)值分别小于3.2%和11.8%。同一样品重复测定日间RSD值小于5.5%。结论蓖麻籽粕中的残余蓖麻毒素可采用优化后的实验方法进行有效提取,应用双夹心ELISA方法进行毒素含量的定量分析,该方法为蓖麻籽粕脱毒工艺的确定及脱毒样品的质量控制提供了技术支持。
- 李倩董娜武军华王玉霞贾培媛张任鹏睢大筼
- 关键词：蓖麻毒素酶联免疫吸附分析
- 7种植物多糖对小鼠卵清蛋白免疫反应的佐剂活性(英文)
- 目的寻找和筛选具有较好佐剂功能的天然多糖。方法自中药提取当归多糖、黄芪多糖、板蓝根多糖、茯苓多糖、黄精多糖、枸杞多糖和淫羊藿多糖。苯酚硫酸法测总糖含量;间羟联苯法分析糖醛酸含量;凝胶渗透色谱法测定多糖分子量分布。按照分组...
- 董娜张贵强贾培媛武军华李帅单俊杰王玉霞
- 关键词：佐剂
- 文献传递
- 朝鲜淫羊藿多糖对HIV-1包膜蛋白质gp120的免疫佐剂活性被引量：2
- 2013年
- 目的评价淫羊藿总多糖(EKP)中组分B(EKP-B)和均一多糖B-1(EKP-B-1)对人类免疫缺陷病毒HIV-1 gp120蛋白的免疫佐剂活性。方法 EKP-B(150μg)、EKP-B-1(150μg)、铝佐剂(200μg)和生理盐水分别与HIV-1gp120(20μg)配伍肌内注射免疫小鼠1次。免疫后2和4周收集小鼠血清,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度。4周后处死小鼠,MTT法测定小鼠脾T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测免疫小鼠血清干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)含量,流式细胞术测定脾细胞中CD4+/CD8+和CD3+/CD19+T细胞亚群百分比。结果免疫后2周,与HIV-1gp120单独免疫组相比,EKP-B-1与HIV-1gp120配伍可提高小鼠血清特异性抗体滴度(P<0.05),EKP-B无明显作用。免疫后4周,EKP-B和EKP-B-1与HIV-1gp120配伍均能明显提高小鼠血清特异性抗体滴度(P<0.05),还能明显促进B细胞增殖反应和IFN-γ的分泌(P<0.01),对小鼠脾T淋巴细胞增殖以及胸腺IL-4的分泌无明显影响,同时EKP-B还能提高脾细胞CD3+/CD19+细胞百分率(P<0.01),EKP-B-1提高脾细胞CD4+/CD8+细胞百分率(P<0.05)。结论 EKP-B和EKP-B-1(每只鼠150μg)对HIV-1gp120抗原显示良好的佐剂活性,能明显提高HIV-1gp120免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫功能,提示EKP-B和EKP-B-1有可能作为艾滋病疫苗的佐剂。
- 张贵强董娜王玉霞李倩贾培媛武军华麻浩李海霞单俊杰王海南
- 关键词：朝鲜淫羊藿多糖人类免疫缺陷病毒佐剂
