孙佩龙
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南开大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- EIAV gp45和HIV gp120基因在不同表达系统中表达效果比较被引量：2
- 2011年
- 马传染性贫血病毒(EIAV)gp45基因编码跨膜蛋白TM,该蛋白在介导病毒与靶细胞之间的融膜过程中起关键作用。gpl20蛋白是人类免疫缺陷病毒(HIV)的外膜糖蛋白,是病毒的主要抗原。通过大肠杆菌原核表达系统和果蝇细胞真核表达系统分别表达gp45及gp120,并对其表达效果进行对比,结果表明:在大肠杆菌表达系统中,gp45可成功表达,而gp120却不能表达。在真核表达系统中,gp120成功表达,而gp45却未能表达。通过对这两种系统表达情况效果的比较,发现gp45在原核系统中表达有利,而gp120在真核系统中表达有优势,表明这些基因的表达具有特异性,本研究指导我们根据特定的基因选用适当的表达系统,以便纯化所需的目的蛋白,同时也为深入研究HIV的包膜蛋白的生物学结构特性及推动相关疫苗的研究奠定基础。
- 崔严方孙佩龙刘新奇
- 关键词：EIAVHIVGP120特异性表达
- 一种HIV-1 CRF07BC gp41多肽疫苗设计及其制备方法
- 本发明公开了一个针对HIV-1 gp41的多肽疫苗设计及其制备方法。该多肽疫苗是通过比较EIAV的致病株和疫苗株的gp45在一级结构和三级结构上的不同，找到两个毒株gp45结构上的差异，获得EIAV疫苗株产生的结构基础，...
- 刘新奇杜建森孙佩龙
- 文献传递
- HIV包膜蛋白Gp120在果蝇Schneider 2细胞内的表达纯化及初步性质鉴定被引量：2
- 2010年
- 构建pMT/BiP/V5-HisA-HIVgp120真核表达载体,通过稳定转染获得稳定表达gp120蛋白的果蝇Schnei-der2(S2)细胞系,并对gp120蛋白进行大量表达和纯化。应用聚合酶链式反应技术从重组载体PVR1012-gp120中扩增出中国流行株CRF07-BCgp120全长基因后,将其插入载体pMT/BiP/V5-HisA。应用脂质体转染技术将真核表达载体和抗性筛选质粒共转染果蝇S2细胞,通过杀稻瘟菌素反复筛选,建立稳定高表达gp120蛋白的果蝇S2细胞系,并通过镍柱亲和层析和分子筛法纯化目的蛋白。用SDS-PAGE对重组蛋白的分子量和纯度进行分析,并通过Western blot和酶联免疫吸附技术(ELISA)对其进行鉴定。成功构建了gp120真核表达载体并获得了稳定转染该蛋白的果蝇S2细胞系,成功的表达了具有良好抗体反应性的gp120全长蛋白。此结果为深入研究HIV包膜蛋白gp120的生物学特性及进行HIV疫苗的研究提供了良好的物质基础。
- 孙佩龙周建华吕淑霞刘新奇
- 关键词：真核表达载体
- 重组截短型ELR1蛋白在昆虫表达系统中的分泌表达与结晶被引量：1
- 2011年
- 为获得马传染性贫血病毒单一受体(ELR1)的结晶体,本研究通过PCR方法获得ELR1胞外区基因片段,利用基因重组技术构建包含ELR1胞外区基因的重组杆状病毒表达质粒(Bacmid-ELR1)。将其转染至昆虫细胞sf9中进行蛋白表达,western blot检测结果显示ELR1胞外区截短型重组蛋白在昆虫表达系统中获得表达。目的蛋白经亲和层析和凝胶过滤方法纯后化,通过多组结晶条件筛选获得了ELR1胞外区重组蛋白结晶体。本研究为ELR1立体结构和功能的解析提供了重要基础。
- 孙佩龙郝飞飞吕淑霞刘新奇周建华林跃智
- 关键词：纯化
