- MTH1抑制剂TH588在制备治疗多发性骨髓瘤的药物中的应用
- 本发明提供了MTH1抑制剂TH588在制备治疗多发性骨髓瘤的药物中的应用。MM U266细胞株经MTH1抑制剂TH588处理后，48h即可以使U266细胞形态不规则、细胞变小、有细胞碎片产生，大量细胞呈现凋亡、死亡状态；...
- 王立生王欣张林肖凤君吴祖泽
- 文献传递
- Mesothelin对乳腺癌细胞MDA-MB-231生物学行为的影响
- 2023年
- 目的探讨间皮素(Mesothelin)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。方法免疫化学染色检测TNBC组织、癌旁组织及乳腺癌细胞系中Mesothelin的表达。将过表达Mesothelin慢病毒质粒(Mesothelin组)及对照Scramble质粒(Scramble组)转染TNBC细胞系MDA-MB-231细胞,未感染细胞作为Control组。流式细胞术检测病毒感染效率;实时荧光定量PCR、流式细胞术及Western blot检测Mesothelin表达;CCK-8检测细胞增殖情况;利用Annexin V-APC/PI检测细胞凋亡;Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力。结果Mesothelin在TNBC肿瘤组织中表达高于癌旁组织(P<0.05),在乳腺癌细胞系中有表达。流式细胞术验证发现慢病毒感染效率达到90%以上。与Scramble组相比,Mesothelin组Mesothelin mRNA和蛋白表达水平升高,细胞增殖率升高,细胞凋亡率降低,Bax、E-cadherin蛋白表达减少,Bcl-2、Ncadherin和Vimentin蛋白表达增加,细胞的迁移及侵袭能力增强(P<0.05)。结论Mesothelin能够促进乳腺癌细胞增殖,抑制细胞凋亡,增加细胞的迁移及侵袭能力。
- 李宇翔李葛高振芳侯春梅韩根成孙慧燕王立生
- 关键词：三阴性乳腺癌细胞运动间皮素
- 变应性鼻炎与支气管哮喘被引量：4
- 2008年
- 王立生张春玲李黎
- 关键词：哮喘
- 造血因子联合铁死亡抑制剂对造血干祖细胞体外增殖的影响被引量：1
- 2020年
- 目的探讨造血干祖细胞在缺乏造血因子作用下细胞的死亡方式以及细胞铁死亡关键调控蛋白GPX4表达水平的变化;探索铁死亡抑制剂Fer-1(Ferrostatin-1)联合造血因子作用对造血细胞增殖的影响,为造血干祖细胞体外扩增提供理论依据。方法采用CCK-8增殖实验检测细胞的增殖;不同浓度的小分子化合物Erastin(1,2.5,5,7.5,10μmol/L)以及Fer-1(1μmol/L)作用于细胞,检测细胞的存活率;流式细胞术测定TF-1细胞铁死亡相关脂质活性氧(ROS)的表达;Western印迹测定铁死亡相关蛋白GPX4的表达。结果CCK-8细胞增殖实验显示,TF-1细胞在Erastin诱导及缺乏粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的诱导下均会发生死亡,Fer-1可逆转细胞死亡;流式和Western印迹结果表明,Fer-1抑制TF-1细胞内脂质ROS的产生,促进GPX4蛋白的表达。原代造血干祖细胞增殖实验结果表明,Fer-1可逆转人脐带血CD34+细胞在低剂量造血因子作用下诱导的细胞铁死亡,同时促进细胞的增殖;Western印迹结果显示,在人脐带血CD34+细胞低剂量造血因子的作用下,GPX4随Fer-1浓度增加而表达上调。结论造血细胞在体外扩增的过程中会出现细胞铁死亡,通过铁死亡抑制剂Fer-1结合造血因子可促进细胞的增殖。造血因子联合铁死亡抑制剂将是提高造血干、祖细胞扩增效率的新策略。
- 张丹王祎铭张林高川成孙杨王立生王立生
- 关键词：造血因子造血干祖细胞去铁胺脂氧素类
- 氯吡格雷对支气管哮喘小鼠P-选择素、CD40L影响的研究
- 目的：观察氯吡格雷对支气管哮喘小鼠的血小板表面抗原P-选择素、CD40L表达及肺泡灌沈液中的中性粒细胞的影响。
方法: 雌性BALB/c小鼠共30只随机分成3组，正常对照组、哮喘模型组、氯吡格雷干预组;用流式细...
- 王立生
- 关键词：氯吡格雷血小板活化
- 文献传递
- 牦牛血清对H9c2细胞增殖及衰老的影响
- 2022年
- 目的研究在其他培养条件相同的情况下不同类型新生牛血清对H9c2细胞体外培养的影响,为更加合理选择H9c2细胞生长适应的血清类型提供参考依据。方法采用牦牛血清、Hyclone血清、四季青血清3种牛血清对H9c2细胞进行培养,通过细胞计数法和CCK8法测定细胞生长的细胞数量及活力,并在镜下观察细胞形态,以比较3种血清细胞培养的效果,采用q-PCR测定p21、p16、p38、p53表达情况以了解细胞衰老情况。结果牦牛血清培养细胞的细胞数在第2~6天均显著高于四季青血清,在第2天显著高于Hyclone血清,差异均有统计学意义(P<0.05);其他时间点比较,差异均无统计学意义(P>0.05);Hyclone血清培养细胞的细胞数在第3~6天均显著高于四季青血清(P<0.05)。牦牛血清培养细胞的细胞倍增数在第24、48、72、96、120小时均显著高于Hyclone血清和四季青血清,差异均有统计学意义(P<0.05),Hyclone血清培养细胞的细胞倍增数在第24小时显著高于四季青血清,差异均有统计学意义(P<0.05),其余时间点比较,差异均无统计学意义(P>0.05);此外,与牦牛血清和Hyclone血清比较,四季青血清H9c2细胞p21、p53表达最高。结论牦牛血清的细胞培养效果优于Hyclone血清和四季青血清,H9c2细胞可能更适应于在牦牛血清中生长。
- 白玉婷格日力王立生苏晓灵
- 关键词：牦牛血清H9C2细胞细胞增殖细胞衰老
- 支气管哮喘BALB/c小鼠血小板p-选择素的表达变化
- 哮喘的发病过程的发挥的作用越来越受到重视。P-选择素是血小板活化的标志，实验中用流式细胞仪通过对哮喘小鼠的血小板源性P-选择素进行测定，来探讨在哮喘发病中血小板的参与。本实验通过动物实验，由流式细胞仪检测到支气管哮喘小鼠...
- 王立生张春玲孙荣丽李黎肖宝红武晓
- 关键词：支气管哮喘发病机制病因分析动物实验
- 银杏花化学成分对血管内皮细胞铁死亡的抑制作用被引量：11
- 2020年
- 目的探讨银杏花提取物及其中化学成分对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)铁死亡的抑制作用,筛选出有效部位和有效化合物,为成药性提供初步研究数据。方法将银杏花70%乙醇提取物依次用不同有机溶剂萃取,得到4个萃取部位。利用erastin处理HUVEC细胞建立血管内皮细胞铁死亡模型,对4个萃取部位及前期从乙酸乙酯部位分离得到的9个化合物应用CCK-8法进行抗血管内皮细胞铁死亡活性筛选,并通过Western印迹法(WB)对其作用机制进行初步探讨。结果erastin诱导的HUVEC细胞死亡可被阳性药ferrostatin-1(Fer-1)逆转,是理想的血管内皮细胞铁死亡模型。银杏花总提物组能抑制eras-tin诱导的HUVEC细胞铁死亡,细胞存活率较erastin模型组明显提高(P<0.05),且乙酸乙酯部位组细胞存活率提高最多,为其活性部位。进一步对活性部位中分离获得的化合物进行活性筛选,结果表明,山柰酚、芹菜素、木犀草素及山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷在10μmol/L时均能较模型组显著提高细胞存活率(P<0.01),其药效接近或超过Fer-1水平,其中木犀草素可使铁死亡细胞恢复至正常水平。WB结果显示,同模型组比,木犀草素可下调酰基辅酶A合成酶长链家族成员4和上调谷胱甘肽过氧化酶4的表达(P<0.01)。结论筛得银杏花乙酸乙酯部位为其抗血管内皮细胞铁死亡活性部位,木犀草素为其活性化合物,本研究将为抗血管炎症损伤药物研发提供新靶点和新的治疗策略。
- 李敏张丹张丹王立生王立生李彬董俊兴肖凤君
- 关键词：黄酮类化合物
- 靶向MTH1抑制多发性骨髓瘤细胞增殖和诱导凋亡的作用研究被引量：2
- 2020年
- 目的:检测MTH1在多发性骨髓瘤(MM)患者CD138阴性细胞(CD138^-)及CD138阳性细胞(CD138^+)中的表达,探讨MTH1抑制剂对MM细胞株U266细胞的形态、增殖和凋亡等细胞生物学特性的影响。方法:分离MM患者CD138^-及CD138^+并提取RNA,应用Q-PCR分别检测NUDT家族的表达情况。利用MM细胞系U266观察白细胞介素-6(IL-6)对MTH1表达变化的影响。在荧光显微镜下观察TH588作用于U266细胞48 h后的形态变化,用DAPI染色法观察细胞核的变化。应用荧光素酶活性检测TH588对U266细胞增殖的影响,应用流式细胞术检测TH588对U266细胞凋亡的影响。结果:MM患者CD138^+中MTH1、NUDT2、NUDT5及NUDT21表达较CD138^-高(P<0.05)。荧光素酶报告显示TH588处理U266细胞后,与对照组相比,荧光强度值明显降低,且药物浓度越大,荧光强度值越低(r=-0.91);应用IL-6能使MTH1表达水平增高,荧光显微镜下观察,TH588处理U266细胞48 h后,细胞出现皱缩、变小以及形状不规则等表现,DAPI染色后,TH588处理过的细胞呈现细胞核缩小、染色不均、花瓣状和放射状等凋亡特征;流式细胞术分析结果显示,TH588处理U266细胞48 h后,存活细胞比例明显降低(P<0.05)。结论:MTH1在部分MM患者的CD138^+中高表达,U266细胞在IL-6的作用下可见MTH1表达增高,MTH1抑制剂TH588对MM U266细胞株具有明显地抑制增殖和诱导细胞凋亡的作用。
- 王欣吴颖张林李宇翔韩冰史雪史雪王伟
- 关键词：多发性骨髓瘤
- 卡泊芬净成功治愈奥默柯达真菌血症1例被引量：4
- 2011年
- 1例确诊为奥默柯达(毕赤)真菌血症的75岁女性患者经卡泊芬净治疗后痊愈。该患者既往有冠状动脉粥样硬化性心脏病、高血压病、糖尿病及糖尿病肾病,近期因脑出血行脑内血肿置管引流术,术后因肺炎及呼吸衰竭行气管切开及机械通气,因消化道出血行全胃肠外营养。此后多次血液及静脉导管头培养均提示为奥默柯达真菌感染,先后给予氟康唑、伏立康唑、卡泊芬净及移除深静脉导管后血培养转阴,续用卡泊芬净21 d并连续6次血培养阴性考虑真菌血症治愈。目前报道的所有奥默毕赤真菌血症患者都存在免疫功能低下,卡泊芬净适合于肾功能不全患者,移除深静脉导管和停止静脉营养是治疗该病的重要措施,为避免复发抗真菌药物的疗程应在血培养阴性后维持2周以上。
- 张春玲徐德祥王立生孙荣丽李黎
- 关键词：真菌血症卡泊芬净
