张驰
- 作品数:10 被引量:24H指数:3
- 供职机构:河南农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金河南省科技攻关计划河南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 哺乳动物BMP4基因A型启动子的比较分析被引量:1
- 2010年
- 以鸭嘴兽BMP4基因组序列为模型,采用比较基因组学方法分析哺乳动物BMP4基因A型启动子的结构特点。该研究分离出一段长112bp的进化上高度保守的核心启动子序列以及多个转录因子结合位点和CpG岛结构,并且在BMP4核心启动子区域发现了2种具有重要生物学功能的回文结构,为进一步研究该型启动子的转录调控功能提供了理论基础。同时以鸭嘴兽基因组为参照模型,也为今后研究其他哺乳动物进化上保留下来的基因提供更多新信息。
- 张驰陈其新李明周建设秦楠
- 关键词:BMP4启动子CPG岛回文结构
- 猪BMP4基因原核表达及优化被引量:1
- 2011年
- 构建猪BMP4基因pET32a-BMP4原核表达质粒,在E.coli中表达并分离纯化目的蛋白。采用PCR技术以pMD18-T-BMP4重组质粒为模板扩增获得BMP4基因编码成熟肽片段,并插入到原核表达载体pET32a中,构建原核表达重组质粒pET32a-BMP4。将阳性重组质粒转化到表达宿主菌中,在不同的温度、IPTG浓度和时间下进行诱导表达,SDS-PAGE分析鉴定。构建的重组表达质粒经PCR、酶切和DNA测序鉴定与预期的结果一致,表达宿主菌经IPTG诱导表达分子量约为31 ku的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的30%以上。成功构建了pET32a-BMP4原核表达质粒,并经纯化得到BMP4目的蛋白,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础。
- 周建设李明陈其新张驰石晓卫赵巧辉
- 关键词:骨形态发生蛋白4原核表达
- 牡丹PsAP3基因的克隆与表达分析
- 2024年
- 优质牡丹花型育种是牡丹产业发展遭遇的瓶颈问题之一。本研究以牡丹(Paeonia sufruticosa)单瓣和雄蕊瓣化品种为植物材料,以调控牡丹雄蕊发育相关的关键基因PsAP3为切入点,通过基因克隆、亚细胞定位、表达分析初步解析了牡丹PsAP3基因的功能,筛选了PsAP3可能存在下游互作基因,构建了TRV2-PsAP3沉默载体并成功转化农杆菌,用于后续牡丹瞬时沉默试验。结果显示:牡丹PsAP3基因全长612 bp(GenBank登记号:MT225537),编码203个氨基酸,分子量为23891.18,属亲水蛋白,含有一个MADS结构域和一个K结构域。系统进化分析表明PsAP3与栓皮栎亲缘关系最近。亚细胞定位结果显示PsAP3蛋白定位在细胞核中。表达分析结果显示,与单瓣品种的雄蕊相比PsAP3在雄蕊瓣化品种的内瓣中表达量显著提高,这也预示着可能是PsAP3基因在在花器官中表达扩张,在雄蕊中显著高表达导致了牡丹的雄蕊瓣化现象。酵母双杂交结果表明PsAP3编码的蛋白与PsAP1-1、PsPI、PsSEP、PsAG编码的蛋白互作。本研究初步解析了牡丹PsAP3的功能,为牡丹雄蕊瓣化分子机理的揭示提供理论依据,并为进一步精细化调控牡丹花型奠定理论基础。
- 周佩刘燕柴梦娟李韶文张驰张驰李永华栗燕
- 关键词:亚细胞定位酵母双杂交
- 冠状病毒受体的研究进展被引量:2
- 2021年
- 近年来多种感染人或家畜的冠状病毒病轮番出现,给人类社会的经济和公共卫生安全带来很大危害。特别是在2019年底出现并在全球迅速蔓延的SARS-CoV-2,由此引发的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在2019年12月至2020年3月之间在全球范围内造成超过7万人死亡。冠状病毒感染宿主的第一步是识别宿主细胞膜受体分子并与之结合,随后启动入侵使病毒基因组进入宿主细胞内部。因此冠状病毒细胞受体的阐明对于了解病毒的宿主与组织嗜性具有重要意义,同时也有助于了解病毒的致病与传播机制以及新型抗病毒药物研发。本文介绍了近年来主要的冠状病毒受体的最新研究进展,包括血管紧张素2(the angiotensin converting enzyme 2,ACE2)、氨基肽酶N(aminopeptidase N,APN)、二肽酰肽酶4(dipeptyl peptidase 4,DPP4)、唾液酸(sialic acid,SA)和癌胚抗原相关细胞黏附分子1(carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1,CEACAM1)等。
- 袁一心赵福杰张驰胡慧
- 关键词:冠状病毒病毒受体公共卫生安全
- 猪细小病毒NS1蛋白65-133位氨基酸缺失对其核定位的影响被引量:4
- 2020年
- 为了探究猪细小病毒NS1蛋白入核机制,通过生物信息学网站预测PPV NS1核定位序列,根据GenBank上传的PPV非结构蛋白NS1的序列设计NS1扩增引物和一系列重叠PCR引物,以河南省动物性食品安全重点实验室保存的猪细小病毒DNA为模板,扩增NS1和缺失突变体基因,构建真核表达重组质粒pCAGGS-HA-NS1、pCAGGS-HA-NS165-133aaDel、pCAGGS-HA-NS1207-267aaDel。将其转染至PPV易感猪源细胞系PK-15细胞,通过免疫荧光和Western-blot鉴定NS1和不同的NS1缺失突变体在细胞内的核定位情况。结果表明,pCAGGS-HA-NS1、pCAGGS-HA-NS165-133aaDel、pCAGGS-HA-NS1207-267aaDel编码蛋白均成功表达。免疫荧光和Western-blot显示NS1和NS1207-267aaDel蛋白定位于细胞核,而NS165-133aaDel蛋白的细胞定位较NS1发生改变,由细胞核定位改变为细胞质定位,说明PPV NS1蛋白65-133位氨基酸缺失能改变其在细胞内的核定位,PPV NS1蛋白核定位序列NLS存在于NS1的65-133aa处。
- 张驰徐盟龙袁一心王朋涛靳晓慧魏战勇
- 关键词:猪细小病毒NS1蛋白核定位
- 猪细小病毒NS1基因真核表达载体pEGFP-N1-NS1的构建与表达被引量:3
- 2018年
- 根据Gen Bank上发表的PPV的基因组序列,设计扩增非结构蛋白NS1基因的特异性引物。通过PCR方法克隆NS1基因,经双酶切及与pEGFP-N1载体连接构建了真核表达载体pEGFP-N1-NS1,将双酶切和测序鉴定正确的质粒转染至293T细胞,经过荧光观察和PCR方法鉴定。结果表明,克隆了猪细小病毒NS1基因的全序列1989 bp,成功构建了NS1基因的真核表达载体,并在293T细胞中转染表达。
- 周雍张驰王朋涛韩丽靳晓慧魏战勇
- 关键词:猪细小病毒真核载体NS1
- 猪细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其感染PK-15细胞后的蛋白质组学研究
- 猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是造成猪繁殖障碍的主要病原体之—,导致母猪流产,产死胎、木乃伊胎、畸形胎儿和弱胎。目前,PPV流行范围极广,在世界各个国家均可检到,由于该病毒对外界环境的强抵抗力...
- 张驰
- 关键词:猪细小病毒实时荧光定量PCR蛋白质蛋白质组学
- 文献传递
- 山羊BMP4基因多态性及其与生产性状关联性的研究
- 骨形态发生蛋白4/(BMP4/)属于转化生长因子超家族/(TGF-β/)的重要成员之一,BMP4基因是机体生长发育过程中的必须因子,尤其在诱导骨骼的形成及生长方面具有重要的调控作用。鉴于BMP4基因有如此重要的功能,故本...
- 张驰
- 关键词:山羊BMP4SSCP
- 文献传递
- 骨形态发生蛋白4与哺乳动物卵泡发育的研究进展被引量:8
- 2010年
- 骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein-4,BMP-4)属于转化生长因子超家族成员(TGF-β),参与机体的细胞生长、分化、凋亡、迁移及细胞外基质形成等众多病理、生理活动的调控。BMP-4基因与哺乳动物的繁殖性能密切相关,尤其在卵泡的生长分化过程中起着重要的调控作用,是原始卵泡和卵母细胞生存的必需因子。作者就骨形态发生蛋白4的基因结构、受体种类、信号调控机制及该基因与哺乳动物卵泡发育的关系作一综述。
- 张驰周建设秦楠李明陈其新
- 关键词:骨形态发生蛋白4信号调控机制卵泡发育
- 猪细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其感 感染PK--15细胞后的蛋白质组学研究
- 猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是造成猪繁殖障碍的主要病原体之一,导致母猪流产,产死胎、木乃伊胎、畸形胎儿和弱胎。目前,PPV流行范围极广,在世界各个国家均可检到,由于该病毒对外界环境的强抵抗力...
- 张驰
- 关键词:猪细小病毒荧光定量聚合酶链式反应PK-15细胞蛋白质组学