王胜香
- 作品数：16 被引量：53H指数：5
- 供职机构：遵义医学院更多>>
- 发文基金：贵州省教育厅自然科学研究项目贵州省优秀科技教育人才省长资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 重组hIL-31抗体制备及其拮抗皮肤炎症的研究
- 2011年
- 目的:高效表达重组hIL-31制备IL-31抗体,探讨IL-31抗体拮抗皮肤炎症的作用,为研发IL-31抗体治疗性新药奠定基础。方法:①培养工程菌、IPTG诱导、菌体、超声破碎,用镍NTA柱纯化重组蛋白。②重组hIL-31蛋白溶液加佐剂免疫家兔,制备兔抗IL-31多克隆抗体。③将IL-31抗体分为3个剂量,经皮下注射和皮肤直接涂抹的途径,对已经致皮肤炎症的BALB/c小鼠治疗7d,治疗后3d取治疗部位皮肤作石蜡切片进行HE染色观察组织学变化,并检测血清中IL-6、IL-8、L选择素和MIP-3β等细胞因子的变化。结果:①SDS-PAGE电泳证实获得了高纯度的纯化人IL-31蛋白。②用重组hIL-31蛋白疫苗免疫家兔,在免疫后4周抗体滴度达到高峰,经ELISA法测血清抗体滴度为1∶15000～1∶20000,双扩滴度为1∶16。Western blot结果重组IL-31蛋白能与抗IL-31抗体特异性结合。③小鼠皮肤组织切片HE染色显示,治疗组皮下和皮内均有炎症细胞浸润,呈现剂量依赖性趋势。④血清中炎性因子ELISA检测,涂抹组和注射组小鼠血清中IL-6、IL-8、MIP-3β均明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论:①获得稳定表达的重组人IL-31蛋白,以此作为免疫原免疫家兔,诱导分泌高滴度的IL-31抗体。②IL-31抗体使皮肤炎症中炎性细胞减少,血清中炎症相关细胞因子明显降低。
- 魏培孙万邦黄俊琼曹雪梅罗军敏郑静王胜香宋明英
- 关键词：IL-31抗体拮抗皮肤炎症
- 抗狂犬病毒鸡卵黄抗体的制备工艺
- 抗狂犬病毒卵黄抗体的制备工艺，包括如下步骤：免疫接种疫苗鸡的选择-免疫接种疫苗剂量-免疫程序-卵黄分离方法与技巧-卵黄抗体水溶性组分液WSF制备-卵黄抗体分离提取-卵黄抗体提取物无菌处理-PEG溶液配制-透析袋处理。本发...
- 郭锦锦孙万邦唐艳丽王胜香
- 文献传递
- 重组人白细胞介素10抗家兔同种异体皮肤移植排斥模型的建立被引量：7
- 2010年
- 背景:研究表明,白细胞介素10在移植排斥反应的预防和治疗中具有一定的应用前景,有望成为一种新的临床用免疫抑制剂。动物移植模型是研究免疫抑制剂常用的实验平台,最常用的皮肤移植模型动物是小鼠,但小鼠属于小动物模型,移植技术要求较高。目的:建立家兔同种异体皮肤移植模型,观察重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植排斥反应的效果。方法:取家兔背部皮肤修剪成含真皮层的全厚皮片、中厚皮片和不含真皮层的薄层皮片进行家兔自体皮肤移植,随机分为固定组和非固定组,固定组用自制脖套对家兔头颈部活动进行一定限制;药物抗家兔同种异体移植排斥设重组人白细胞介素10组、环孢素A阳性对照组和生理盐水阴性对照组。采用混合淋巴细胞反应法观察家兔混合淋巴细胞反应增殖指数。在30d内连续观察移植皮肤出现排斥的时间和移植皮片平均存活时间。结果与结论:供、受体混合淋巴细胞培养呈增殖反应,表明家兔同种异体主要组织相容性复合体不同,相互皮肤移植可发生排斥反应。移植皮片厚度以含真皮的中厚皮片为最佳;自制脖套固定可有效限制家兔脖头颈部活动,有利于移植创面的保护。实验成功建立了重组人白细胞介素10抗家兔同种异体皮肤移植排斥模型,重组人白细胞介素10具有抗移植排斥的作用。
- 冯继红孙万邦罗军敏刘凯山张磊温琼娜陈富超王胜香
- 关键词：皮肤移植免疫抑制剂移植排斥
- 中药组方NDRF对佐剂性关节炎家兔滑膜MMP-3、VEGF分子及其mRNA的影响被引量：9
- 2014年
- 目的:观察中药组方NDRF及联合MTX对佐剂性关节炎家兔滑膜MMP-3、VEGF分子及其mRNA变化的影响,为中药及其联合西药治疗类风湿关节炎提供实验依据。方法:(1)将50只家兔随机分为正常组(A)8只,其余42只注射完全弗氏佐剂及TNF-α改良诱导造模,将造模成功的造模组随机分为模型组(B)、中药NDRF组(C)、MTX组(D)、中药NDRF联合MTX组(E);治疗35 d后,检测家兔滑膜组织中MMP-3、VEGF细胞因子的水平及相应mRNA水平。结果:与模型组比较,中药NDRF及联合MTX组AA家兔滑膜组织MMP-3、VEGF水平及其mRNA的相对表达量均显著降低(P<0.05)。AA家兔滑膜液MMP-3的含量与滑膜MMP-3 mRNA表达水平呈显著正相关(r=0.655,P<0.01)。AA家兔滑膜液VEGF的含量与滑膜VEGF mRNA表达水平呈显著正相关(r=0.905,P<0.01)。结论:中药组方NDRF及联合MTX可降低AA家兔滑膜组织中MMP-3、VEGF分子及相应mRNA的水平,提示中药组方NDRF对AA家兔有治疗作用,中西医结合治疗RA具有良好的研究前景,值得深入研究。
- 谈益芬唐艳丽王胜香郭锦锦李均孙万邦
- 关键词：佐剂性关节炎基质金属蛋白酶-3
- 重组hIL-10质粒构建及其在毕赤酵母SMD1168中的表达和纯化被引量：16
- 2010年
- 构建重组hIL-10真核表达载体,探索在毕赤酵母中的表达,为进一步研究hIL-10生物学功能及临床应用奠定基础。PCR扩增目的基因hIL-10cDNA,经EcoRI/XbaI双酶切后,将其亚克隆至同样双酶切的载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-hIL-10;电转化法,将其转入毕赤酵母SMD1168,甲醇诱导Mut+型转化子基因表达;对目的蛋白进行检测及纯化。扩增出了目的基因hIL-10cDNA,重组质粒pPICZaA-hIL-10经酶切鉴定和序列测定正确;表达产物经SDS-PAGE分析在42.0kD处可见较浓染条带,Westernblotting分析可见特异条带;ELISA检测72h上清液中目的蛋白浓度可达1.973mg/L;纯化后目的蛋白纯度达67.0%。实现了重组hIL-10在毕赤酵母SMD1168中的成功表达和初步纯化。
- 封建凯孙万邦陈富超黄俊琼罗军敏杜联峰姚新生王胜香
- 关键词：HIL-10质粒构建毕赤酵母基因表达
- 空肠弯曲菌pcDNA3.1(-)-peb1A壳聚糖佐剂疫苗对小鼠免疫原性和保护性研究被引量：3
- 2012年
- 目的:研究空肠弯曲菌pcDNA3.1(-)-peb1A壳聚糖佐剂疫苗的免疫原性和保护性。方法:健康雄性昆明小鼠分为实验组和对照组。实验组设pcDNA3.1(-)-peb1A组3个剂量和壳聚糖-pcDNA3.1(-)-peb1A组3个剂量;对照组设空载体pcDNA3.1(-)(100μg/100μl)组和生理盐水(NS)组,各组均采用小鼠股四头肌注射法。在第0、10、20天免疫,于每次免疫后第10天采集各组小鼠血清,以间接ELISA法检测血清中特异性IgM、IgG的含量。分离各组小鼠脾淋巴细胞包被细胞培养板,以细胞ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞CD20、CD21表达水平。设空肠弯曲菌液灌胃攻击免疫后小鼠,检测肠道分泌液细菌培养数量。结果:裸DNA组和壳聚糖-DNA组各组特异性IgG水平均高于两对照组(P<0.05)。裸DNA组和壳聚糖-DNA组小鼠脾淋巴细胞CD20、CD21表达水平均高于两对照组(P<0.05),壳聚糖-DNA组高于裸DNA组(P<0.05)。肠道分泌液细菌培养结果细菌指数裸DNA组的低于两对照组;佐剂DNA组低于裸DNA组。结论:重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A经肌肉注射免疫小鼠,具有较好的免疫原性和保护作用,壳聚糖能增强pcDNA3.1(-)-peblA的免疫原性,有望成为空肠弯曲菌基因疫苗的候选佐剂。
- 徐岗村杜联峰孙万邦王宜峰王胜香罗军敏姚新生夏嫱杨瑞余妍
- 关键词：空肠弯曲菌壳聚糖免疫原性
- 以实践能力培养为核心的基础护理实验教学改革被引量：8
- 2014年
- 在基础护理实践教学中从教学理念、内容、方法与手段等方面进行创新与实践,以提高教学质量、培养护生自主学习能力、提高护生专业实践能力水平。
- 谈益芬王胜香李佳袁野陈乾雄
- 关键词：基础护理实验教学护理教育自主学习能力
- 空肠弯曲菌DNA疫苗构建及其疫苗免疫程序研究
- 2012年
- 目的:构建空肠弯曲菌peb1A基因真核表达载体,探讨DNA疫苗不同免疫程序的免疫效果。方法:以重组pET28a(+)-peb1A质粒为模板,将空肠弯曲菌peb1A基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转染COS-7细胞中表达,Western blot鉴定表达蛋白;昆明小鼠随机分组:设空白对照组、空载体对照组、pcDNA3.1(-)-peb1A实验组,用ELISA法检测免疫后的昆明小鼠血清IgG和IgM抗体水平。结果:重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A经双酶切和PCR鉴定,构建正确。peb1A基因测序结果与GenBank中peb1A基因序列一致。重组质粒成功转染COS-7细胞,并能正确表达重组蛋白。裸DNA组IgG水平均高于两对照组,有显著性差异(P<0.05)。同一剂量短时间(0、10、20天)免疫程序优于长时间(0、15、25、35天)免疫程序(P<0.05)。结论:成功构建空肠弯曲菌真核表达重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A,其经肌肉注射免疫小鼠,具有较好的免疫原性,短时间免疫程序免疫效果好。
- 杜联峰徐岗村孙万邦王宜峰王胜香罗军敏姚新生夏嫱杨瑞余妍
- 关键词：空肠弯曲菌免疫程序
- 重组hIL-10抗家兔皮肤移植反应中CC、IL-8/CXCL8趋化因子的变化
- 2011年
- 目的:检测家兔皮肤移植经rhIL-10作用后,血清中CC、IL-8/CXCL8趋化因子的变化,探讨CC、IL-8/CXCL8趋化因子在rhIL-10抗免疫排斥机制中的作用。方法:皮肤移植家兔分6组:①rhIL-10低剂量,②rhIL-10高剂量,③CsA低剂量,④CsA高剂量,⑤rhIL-10+CsA低剂量联合和⑥生理盐水组;每只家兔均于术前1天开始肌注给药,连续注射10天;各组分别于术前1天、术后1、4、7、14、21、28天取外周血,分离血清,以ELISA法检测移植家兔血清CC、IL-8/CXCL8趋化因子水平。结果:(1)术后各组IL-8水平均升高,术后4天、7天⑥组IL-8水平高于各组(P<0.05)。(2)术后各组MCP-1水平明显升高,术后1天、4天,⑥组MCP-1水高于各组(P<0.05),术后7天⑥组MCP-1水平高于①组、⑤组(P<0.05);术后7天、14天CsA抑制组高于联合组(P<0.05)。(3)术后各组MIP-1α明显升高,术后4天⑥组MIP-1α水平高于①、③、⑤组,术后7天⑥组MIP-1α水平高于各组(P<0.05);(4)术后各组MIP-1β水平升高,但同时间段组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CC、IL-8/CXCL8趋化因子在皮肤移植后明显升高,表明在急性排斥反应中发挥了重要作用,随排斥反应加重而进一步增高,皮片排斥后下降,可作为观察和诊断移植排斥的合适标志物。
- 李佳孙万邦吕岩岩戴小波张磊王胜香罗军敏
- 关键词：重组人白细胞介素10皮肤移植趋化因子
- 幼儿血清IL-2、IL-6、sIL-2R及T细胞分泌IL-2、IL-6的功能被引量：1
- 1998年
- 王胜香毛兰芝张忆雄刘先奎孙万邦
- 关键词：血清白细胞介素2IL-2SIL-2RT细胞
