李宁
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- YKL-40基因真核表达载体的构建及对人胃癌SGC-7901细胞增殖作用的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:构建针对人类软骨糖蛋白-39(HCGP-39,YKL-40)的真核表达载体,观察其对肿瘤细胞增殖的影响.方法:采用逆转录方法从乳腺癌组织中获得基因YKL-40,双酶切后插入线性化的pcDNA3.1载体真核启动子下游,重组体经限制性内切酶及测序鉴定,将阳性克隆的载体转染胃癌细胞株SGC-7901,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖活性、细胞计数并观察细胞生长情况、半定量RT-PCR检测基因YKL-40 mRNA的表达、流式细胞术检测SGC-7901细胞的周期变化情况.结果:限制性内切酶及测序鉴定表明成功地构建了针对基因YKL-40的真核表达载体;将其转染胃癌细胞SGC-7901后,发现细胞增殖加快,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测基因YKL-40 mRNA的表达增加;流式细胞检测S期细胞增多.结论:成功地构建了针对基因YKL-40的真核表达载体,该载体可使胃癌细胞株SGC-7901增殖加快.
- 庞春艳车团结李宁闫琨李琳王勤陈卫
- 关键词：YKL-40胃肿瘤
- 链霉菌Streptomyces sp. S9木聚糖酶基因xynBS9的克隆表达及性质分析被引量：1
- 2009年
- 通过设计简并引物和构建基因组文库的方法从链霉菌Streptomycessp.S9中克隆得到-βl,4-木聚糖酶基因xynBS9。该基因全长1 023 bp,编码340个氨基酸。将不带原基因信号肽编码序列的xynBS9以正确阅读框架克隆到表达载体pET-22b(+)上,并在大肠杆菌BL2 l(DE3)中诱导表达。重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和疏水柱纯化后达到电泳纯。酶学性质分析表明,重组木聚糖酶最适温度为60℃,最适pH为6.5,在碱性条件下具有良好的稳定性。
- 姚国玉李宁石鹏君陈强姚斌
- 关键词：链霉菌木聚糖酶
