成娟丽
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
- 供职机构:运城学院更多>>
- 发文基金:山西高校科技研究开发项目山西省青年科技研究基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体的设计与构建被引量:1
- 2014年
- 目的:分析设计抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体表达质粒并进行构建验证。方法:根据GeneBank中提供的抗菌肽MagaininⅡ氨基酸序列,结合表达菌株毕赤酵母密码子偏爱性,设计出MagaininⅡ的表达序列,并于其两端插入一对同尾酶SalⅠ和XhoⅠ的酶切识别序列及裂解位点AGA,人工合成后插入质粒载体pUC19中,利用同尾酶法构建抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体。结果:经M13引物进行PCR及SalⅠ/PstⅠ双酶切进行鉴定,成功构建出抗菌肽MagaininⅡ1-5拷贝串联体重组质粒。结论:该研究设计的MagaininⅡ串联体构建方法可行。
- 成娟丽李锋王红林金水
- 关键词:抗菌肽同尾酶串联体
- 谷氨酸棒杆菌中苯酚羟化酶的鉴定及功能研究
- 2015年
- 【目的】鉴定谷氨酸棒状杆菌中ncgl 2588基因编码的苯酚羟化酶,并验证其在苯酚降解中的作用。【方法】构建谷氨酸棒状杆菌ncgl 2588基因缺失突变株,比较突变株和野生型菌株利用苯酚能力的差异;同时将ncgl 2588基因克隆到表达质粒pET28a中并转化入大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导重组菌株原核表达,纯化并测定重组蛋白对苯酚的羟化作用。【结果】成功构建了谷氨酸棒状杆菌ncgl 2588基因缺失突变株,其在以苯酚为惟一碳源和能源的培养基中不能生长,而野生型谷氨酸棒状杆菌能正常生长;pET28a-ncgl 2588重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达分子质量为73ku的目的蛋白,此蛋白酶活为0.37mmol/(min·mg);在以苯酚为惟一碳源和能源培养谷氨酸棒状杆菌时,苯酚羟化酶得到最高表达,用其他芳香族化合物培养则苯酚羟化酶表达较少;进化树分析发现,谷氨酸棒状杆菌中的苯酚羟化酶与酵母Trichosporon cutaneum中的苯酚羟化酶序列同源性高达43%,远远高于与细菌中苯酚羟化酶的同源性。【结论】谷氨酸棒状杆菌中的ncgl 2588基因编码苯酚羟化酶,且该酶为可诱导酶,在苯酚降解中发挥着重要作用。
- 杨志方肖潇司美茹成娟丽沈锡辉王瑶
- 关键词:谷氨酸棒状杆菌基因敲除苯酚羟化酶
- 细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的筛选方法
- 本发明公开了一种细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的筛选方法,包括以下步骤:将粪肠球菌的fabK在大肠杆菌中表达,用三氯生抑制和不抑制大肠杆菌重组菌的FabI,构建针对FabK的双平板敏感差异筛选模型;构建绿脓杆菌的fabI基...
- 成娟丽林金水王红
- 辣椒疫霉NPP效应子基因家族生物信息学分析被引量:2
- 2014年
- NPP(necrosis—inducingPhytophthoraprotein)是一类效应子,在卵菌疫霉属病原菌中普遍存在,该类蛋白能够激发植物的防御反应,如引起植物细胞死亡、促使寄主防御基因表达及产生乙烯。利用生物信息学方法对辣椒疫霉(Phytophthoracapswi)基因组内的NPP基因家族存在状况进行分析,并对其氨基酸序列组成、基本理化性质、蛋白质三级结构等进行预测分析,旨在了解其结构特征,进而发掘辣椒疫霉的致病相关基因。结果表明:NPP基因家族有25个成员,其中大部分成员存在多个拷贝。对25个NPP氨基酸序列进行分析发现,其分子量在12.45—88.9ku之间;对其中15个NPP蛋白进行三级结构预测发现,它们的三维结构类似,其主要的结构元件为“一螺旋和β-片层;构建了25个NPP蛋白的进化树,进行了分子进化分析。
- 冯宝珍李培谦成娟丽刘缙
- 关键词:辣椒疫霉生物信息学
- 细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的筛选方法
- 本发明公开了一种细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的筛选方法,包括以下步骤:将粪肠球菌的fabK在大肠杆菌中表达,用三氯生抑制和不抑制大肠杆菌重组菌的FabI,构建针对FabK的双平板敏感差异筛选模型;构建绿脓杆菌的fabI基...
- 成娟丽林金水王红
- 文献传递