张捷
- 作品数:106 被引量:331H指数:10
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- 米非司酮诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡过程中PKB/Akt激酶的调控作用被引量:3
- 2011年
- 目的观察米非司酮在体外诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的作用机制以及Akt激酶在前列腺癌生长过程中的作用。方法采用Westernblot方法检测不同前列腺癌细胞株癌细胞以及米非司酮作用后PC-3细胞中Akt蛋白磷酸化后蛋白含量,以及相关蛋白的表达量。结果前列腺癌PC-3细胞中Akt磷酸化后蛋白即[p-Akt(Thr^308)和p-Akt(Ser^473)]的含量明显高于激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞中的蛋白表达量,其表达量分别为0.27±0.05和0.22±0.07;O.46±0.09和0.37±0.10(P〈0.05)。10μmol/L米非司酮作用于PC-3细胞后p-Akt(Thr^308)和p-Akt(Ser^473)磷酸化蛋白的含量均明显下降,但其中p-Akt(nr3。)蛋白表达量变化尤为显著,4~24h4个时间组蛋白含量分别为0.24±0.08、0.11±0.03、0.05±0.01和0.01±0.00;其蛋白表达量下降速度较p-Akt(Ser^473)快且显著,p-Akt(Serg7。)磷酸化蛋白4~24h4个时间组蛋白含量分别为0.56±0.17、0.42+0.11、0.28±0.09和0.12±0.05。米非司酮作用于PC-3细胞后使Caspase-9、Caspase-3被激活裂解出有活性的激活片段。结论Akt激酶在前列腺癌生长、发展以及激素依赖性向激素非依赖性的转变过程中起着重要作用。p-Akt(Thr^308)蛋白磷酸化水平在Akt磷酸化激活过程中占主导地位,是Akt激活的必要过程。米非司酮抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其可能是通过抑制Akt信号转导通路,从而激活Caspase。
- 张辉牛志宏张捷马春燕吕家驹
- 关键词:前列腺癌米非司酮脱噬作用
- 人RAGE sh-RNA表达载体的构建及其对前列腺癌细胞RAGE基因表达的抑制作用
- 构建人RAGEsh-RNA表达载体,探讨其对雄激素非依赖型前列腺癌DU145细胞中糖基化终末产物受体(Receptor for advanced glycation endproducts,RAGE)基因表达的影响,以深...
- 孙新平马春燕张捷崔彬刘晓雯辛玮赵跃然
- 关键词:RNA干扰前列腺癌
- 文献传递
- 多西他赛诱导乳腺癌Bcap37细胞凋亡作用的研究被引量:10
- 2006年
- 目的:探讨多西他赛(≤10μmol/L)体外对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的作用及其机制。方法:采用琼脂糖凝胶电泳观察Bcap37细胞凋亡情况;原位末端标记(TUNEL)法测定Bcap37细胞凋亡指数(apoptoticindex,AI);流式细胞仪检测Bcap37细胞周期。结果:与对照组相比,实验组琼脂糖凝胶电泳显示凋亡特有的梯状图谱;实验组显示细胞核染成棕色的凋亡细胞,且AI较对照组显著增大,具有量效依赖性,P<0·001。实验组G2/M期细胞比例较对照组显著升高,G1、S期细胞比例显著降低,P<0·01。结论:多西他赛(≤10μmol/L)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡,细胞周期阻滞在G2/M期。
- 魏爱英张庆柱张捷
- 关键词:细胞凋亡
- 重组人白细胞介素-18的高效表达、初步纯化及其生物学活性研究
- <正> 人白细胞介素-18(hIL-18)是一种重要的免疫调节因子,可以诱生IFN-γ、GM-CSF等多种细胞因子,促进NK细胞和T细胞的成熟与活化,增强NK细胞、T细胞的细胞毒活性,协同IL-12诱导Th1状态的出现,...
- 张瑞军田志刚魏海明孙汭刘金生王郡甫王增鑫张捷
- 文献传递
- 环氧合酶-2在低分子肝素干预大鼠酒精性肝病中的作用机制研究被引量:1
- 2012年
- 目的研究低分子肝素干预大鼠酒精性肝病模型的作用机制。方法 56%(V/V)的白酒平均以8 g/kg的剂量2次/d灌胃10周,初步制备大鼠酒精性肝病模型,成模后部分大鼠低分子肝素(100 IU/kg)皮下注射进行干预,4周后观察低分子肝素对大鼠的血清生物化学指标、肝组织中丙二醛及环氧化酶-2的影响。结果与模型组比较,低分子肝素治疗组大鼠血清转氨酶、血脂及丙二醛含量明显下降(P<0.05);光学显微镜观察HE染色见脂肪变性、炎症反应程度明显减轻(P<0.01),免疫组织化学染色及逆转录聚合酶链反应显示环氧化酶-2的表达均明显降低(P<0.05)。结论低分子肝素通过改善脂肪代谢、抑制氧化应激及降低环氧化酶-2的表达而对酒精性肝病大鼠起到一定的保护治疗作用。
- 阎春英石军杨艳郝菁华任万华张捷
- 关键词:酒精性肝病低分子肝素环氧化酶-2
- 重组人白细胞介素15表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达被引量:2
- 2000年
- 目的 :获得重组人白细胞介素 1 5 (rhIL 1 5 )高效表达菌株。方法 :经细菌脂多糖 +γ干扰素活化的人外周血单个核细胞提取细胞总RNA ,用RT PCR方法扩增出编码人IL 1 5cDNA的基因片段 ,采用 pBV2 2 0表达载体 ,经DNA重组技术构建IL 1 5基因工程菌。结果 :核酸序列测定与预期一致 ,所表达的IL 1 5经SDS PAGE证明分子量约 1 5kD ,表达量占菌体总蛋白的 2 8% ,经CTLl2 细胞检测 ,表达产物粗提物 1∶1 0 0复性后效价可达到1 0 6IU /ml。结论 :构建的基因工程菌为IL 1 5高效表达菌株。
- 孙汭田志刚魏海明刘杰张捷冯进波
- 关键词:DNA重组大肠杆菌IL-15
- 高脂饮食致大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化模型的建立被引量:29
- 2011年
- 目的建立并研究高脂肪饮食导致大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝纤维化的动物模型。方法雄性SD大鼠60只,随机分成正常对照组30只和模型组30只,分别给予普通饲料与高脂饲料,于第4、8、12周末将正常对照组与模型组随机处死10只。分别检测血清学指标,取肝组织做HE染色及Masson染色,应用图像分析法对Masson染色进行纤维化面积定量分析。结果两组大鼠体重均增加,8周时肝指数明显升高,血清胆固醇及总甘油三酯8周开始与正常对照组比较差异具有统计学意义。转氨酶不同时间点均有升高,8、12周时与正常对照组比较差异具有统计学意义。高脂饮食4周末,HE染色可见肝小叶结构完整,汇管区见少量炎症细胞浸润,无病理性纤维化发生。8周末,达到脂肪肝的诊断标准,开始出现肝纤维化趋势。造模12周,大鼠肝组织脂肪变程度达重度,纤维化面积增大。结论经改良配方后,成功建立了大鼠NASH肝纤维化模型。
- 孙林林石军郝菁华任万华阎春英张捷林晓燕崔彬
- 关键词:高脂饮食
- 抗人Leptin单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用被引量:2
- 2002年
- 本研究用本室制备的重组人Leptin为抗原,以鼠伤寒沙门氏裸菌为佐剂,通过脾内、腹腔、静脉三种途径相结合免疫BALB/c鼠,以PEG为促融剂,将免疫小鼠的脾细胞和SP2/0细胞进行融合,HAT、HT选择性培养基、间接ELISA筛选阳性克隆,有限稀释法进行4次克隆化,获得三株能稳定分泌抗人Leptin单抗的杂交瘤细胞株。对所获得的细胞株及其分泌的单抗特性进行较系统的鉴定显示,获得的单抗特异性高,亲和力强,免疫球蛋白亚类均为IgG3。初步应用的研究显示,获得的单抗不仅可用于体外Leptin的免疫印迹检测,而且可通过免疫组化、免疫荧光等技术用于脂肪组织中Leptin的检测,为Leptin的基础和临床研究奠定了基础。
- 董秀华赵跃然张建华王郡甫张捷刘伟张彩田志刚
- 关键词:单克隆抗体
- 碱性成纤维细胞生长因子等体外诱导成人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的研究被引量:5
- 2003年
- 目的 成人骨髓间充质干细胞 (h MSCs)体外定向诱导分化为神经元样细胞。方法 采用 Percoll分离液离心分离 h MSCs,体外扩增 ,分别采用含碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)和 2 -巯基乙醇 (2 - ME)等无血清DMEM诱导 h MSCs分化为神经元。免疫组化鉴定神经元烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结果 h MSCs在体外扩增传至 5代后 ,流式细胞仪显示 99.5 % ,97.8% ,98.8% h MSCs表面抗原 CD2 9、CD4 4、CD90 表达阳性。接种到 12孔板 ,3d后加入 b FGF和 2 - ME联合或 2 - ME单种诱导剂诱导后 ,h MSCs胞体收缩 ,突起伸出 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞 NSE、 NF表达阳性 ,GFAP阴性。
- 刘雪平姚红张捷赵跃然焦玉莲宋玉琴
- 关键词:碱性成纤维细胞生长因子体外诱导成人骨髓间充质干细胞细胞分化神经元样细胞
- 粘附性NK细胞的制备及免疫学特性初探被引量:1
- 2002年
- 目的 初步探讨粘附NK细胞的制备方法及免疫学特性。方法 首先经淋巴细胞分离液、贴壁粘附及尼龙毛柱粘附对外周血NK细胞进行初步分离 ,然后联合使用Percoll不连续密度梯度离心法和T细胞Panning法进一步纯化NK细胞 ,应用流式细胞仪鉴定NK细胞并检测其纯度。rhIL 2 (6 0 0 0IU ml)诱导纯化的NK细胞 (R NK)转变为粘附NK(A NK)细胞 ,然后利用细胞计数法、MTT法和RT PCR方法检测A NK细胞的增殖和杀伤等免疫学特性。结果 经过纯化、诱导获得较高纯度、较高活性的A NK细胞。结论 初步建立了利用人外周血NK细胞制备A
- 房静田志刚张彩魏海明孙汭张建华张捷
- 关键词:NK细胞白细胞介素-2免疫学