李战伟
- 作品数:6 被引量:4H指数:1
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 人工锌指蛋白随机库的构建及其在锌指核酸酶筛选中的应用研究
- 锌指核酸酶是由能够识别并结合特定DNA序列的人工锌指蛋白和一个非特异性核酸内切酶Fok I融合而成的一种人工合成酶,是目前进行高等生物基因组编辑的一个新工具。锌指蛋白与DNA识别的特异性和结合能力是影响ZFN特异性和效率...
- 李战伟
- 关键词:锌指核酸酶锌指蛋白
- 文献传递
- 锌指核酸酶技术在基因治疗中的应用研究进展被引量:1
- 2011年
- 锌指核酸酶技术是一种新兴的基因高效靶向修饰和调控技术,目前该技术已在人类疾病的基因治疗中得到应用,通过敲除致病基因使其丧失致病性或者通过修复突变基因使基因表达正常,实现了对多种人类疾病的基因治疗。基于提高锌指核酸酶效率、特异性和降低细胞毒性等方面的研究较少的现状,特就人工锌指核酸酶介导的基因敲除和基因同源重组修复等在人类疾病基因治疗方面的应用及存在问题进行了综述,并对相关研究的开展进行了展望。
- 李战伟王令任刚王昕张智英
- 关键词:基因治疗锌指核酸酶同源重组
- IL2R基因人工锌指核酸酶的设计、基因扩增及真核表达载体的构建
- 引言同源重组和反转录病毒介导转基因法是目前基因组修饰中常用的两种主要方法。由于这些传统方法的效率极低,特异性差等缺点,制约了其在研究中的应用。锌指核酸酶(Zinc Finger Nuclease,ZFN)是一种人工
- 王令李战伟张智英
- 关键词:基因扩增真核载体
- 文献传递
- 人工锌指蛋白随机库的构建及其在锌指核酸酶筛选中的应用被引量:3
- 2012年
- 利用开源式(Oligomerized pool engineering,OPEN)方法筛选具有较高特异性和亲和性的锌指蛋白(Zinc finger protein,ZFP)。以已知三锌指蛋白为框架,使单个锌指关键位点氨基酸编码序列产生随机突变,构建3个人工锌指蛋白随机库,建立和完善应用人工锌指蛋白随机库筛选特异性锌指蛋白的技术平台。以人DYRK1A基因为例,测试和验证该技术平台的可行性和效率,分别获得对DYRK1A基因靶序列中左侧和右侧位点具有较高亲和性的50个三锌指蛋白;然后将得到的锌指蛋白与非限制性核酸内切酶FokⅠ连接,构建DYRK1A锌指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN),应用酵母验证系统测试DYRK1A锌指核酸酶的活性,结果表明,90%的组装锌指核酸酶能够在靶位点进行切割。
- 李战伟王昕任刚王令杨涵江张智英
- 关键词:锌指蛋白锌指核酸酶
- 一种开源方式筛选靶向结合人DYRK1A基因靶位点的锌指蛋白的方法
- 本发明一种开源方式筛选靶向结合人DYRK1A基因靶位点的锌指蛋白的方法,属于基因工程技术领域。该方法包括:(1)3个锌指蛋白库的构建;(2)报告载体和报告菌株的构建;(3)有效锌指库的筛选;(4)有效锌指库的连接、组装;...
- 张智英李战伟杨涵江任刚王令张存芳张婷婷王瑞贾杰只雷洁李亚明支旭勃韩新艳辛颖
- 文献传递
- 一种由锌指核酸酶介导的哺乳动物内源基因定向敲除的方法和该锌指核酸酶及其表达载体
- 本发明一种由锌指核酸酶介导的哺乳动物内源基因定向敲除的方法和该锌指核酸酶及其表达载体,属于基因工程技术领域。其中所述的方法包括:(1)内源基因靶位点的选择;(2)构建穿梭载体pAdTrack-CMV-T2A;(3)制备重...
- 张智英王令张婷婷李亚明李战伟任刚杨涵江张存芳雷洁王瑞麻丽霞
- 文献传递