杨玉芝
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
- 供职机构:黑龙江省医院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人包皮成纤维细胞来源的多能性干细胞的建立被引量:3
- 2012年
- 目的探讨人包皮成纤维细胞重编程为诱导多能性干细胞(iPSCs)的方法。方法利用反转录病毒携带绿色荧光蛋白(GFP)作为指示,转导到人包皮成纤维细胞中,确定最佳的病毒感染剂量,应用经典的Yamanaka方法,联合小分子物质组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸盐(VPA)诱导人包皮成纤维细胞为多能性干细胞。通过碱性磷酸酶(AKP)染色及免疫荧光细胞化学方法,检测人胚胎干细胞多能性标记物在所建立的诱导多能性干细胞(iPSCs)中的表达,RT-PCR检测拟胚体(EB)三胚层特异基因的表达。结果以GFP作为指示,建立了高效的反转录病毒感染体系,将人包皮成纤维细胞重编程为iPSCs;所建立的iPSCsAKP染色阳性,表达人胚胎干细胞多能性标记物OCT4、TRA-1-60和TRA-1-81,体外诱导分化后具有三胚层特异基因的表达;小分子物质VPA的添加并未显著提高重编程效率。结论在GFP所指示的最佳病毒感染剂量下,联合小分子物质VPA成功建立了人包皮成纤维细胞来源的iPSCs。
- 李雪单智焱吴嫣爽申景岭杨玉芝雷蕾
- 关键词:干细胞分化包皮成纤维细胞绿色荧光蛋白免疫荧光