梁文军
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：嘉应学院医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒的构建及在HePG_2细胞的表达定位被引量：3
- 2009年
- 目的:构建pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒并检测其在人肝癌细胞株HePG2中的表达和亚细胞定位。方法:采用PCR法从pET28b/LOC51255重组质粒中克隆得到LOC51255cDNA全长序列,并将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRed1-C3中。构建好的pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒经双酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染人肝癌细胞株HePG2,再用荧光显微镜直接观察LOC51255在其中的表达及定位情况。结果:经双酶切及DNA测序结果证实成功构建重组质粒pDsRed1-C3/LOC51255;荧光显微镜观察证实该重组质粒能在HePG2细胞中表达,且LOC51255蛋白主要定位于HePG2细胞的细胞质。结论:成功构建pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒,并在HePG2细胞中得到表达,同时证实LOC51255定位于HePG2细胞的胞质,为进一步研究人类LOC51255基因的功能奠定了基础。
- 黄湘谭家余邱玉林梁文军周铭李明
- 关键词：真核表达质粒亚细胞定位
- 抗人LOC51255单克隆抗体的制备及亚细胞定位被引量：4
- 2009年
- 目的:制备抗人LOC51255单克隆抗体,并构建pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒,了解LOC51255在人肝癌细胞株HepG2中的亚细胞定位情况,为进一步研究其功能提供实验工具和基础。方法:以纯化的重组蛋白pET28b/LOC51255为抗原,免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备LOC51255单克隆抗体,并用间接ELISA法和Western blot法对单克隆抗体的特性进行鉴定;通过构建含红色荧光蛋白(pDsRed1)的pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒,转入人肝癌细胞株HepG2表达重组蛋白,并对LOC51255进行亚细胞定位。结果:成功建立2株稳定分泌抗LOC51255单克隆抗体的杂交瘤细胞株;ELISA检测抗LOC51255单克隆抗体的腹水效价分别为1∶12 800和1∶25 600。2株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG1。通过Western blot实验证实,2株单克隆抗体均能特异性结合真核细胞内源性LOC51255蛋白。荧光显微镜观察发现LOC51255主要定位于HepG2细胞的细胞浆。结论:成功制备了2株效价高、特异性好的抗LOC51255单克隆抗体,制备的单克隆抗体可用于LOC51255蛋白的鉴定;亚细胞定位分析证实LOC51255主要表达于HepG2细胞的胞浆,为LOC51255的生物学功能研究奠定了基础。
- 黄湘谭家余邱玉林梁文军李晓栋肖光文李明
- 关键词：杂交瘤单克隆抗体真核表达质粒亚细胞定位
- 药理学实验中曲马多替代哌替啶进行镇痛药物药效验证被引量：1
- 2021年
- 目的探究曲马多替代哌替啶,在经典教学实验“镇痛药的药效学观察”中的实验效果。方法选用昆明种小鼠60只,随机分为哌替啶组、曲马多组、对照组。分别采用冰醋酸和智能热板仪制备小鼠疼痛模型,与哌替啶组及对照组比较,检测曲马多的镇痛效果。结果冰醋酸致小鼠扭体实验结果显示,曲马多对扭体反应抑制率达到100%;热板致小鼠舔足实验结果显示,曲马多给药后0.5 h、1 h均能提高小鼠对热板的痛阈(P<0.01)。结论曲马多作用机制与哌替啶相同,镇痛效果明显,且实验现象具有直观性和教学课时紧凑性,可以替代哌替啶,应用在药理学的实验教学中。
- 张超朱海扬吴欢曾宇阳梁文军游筱清吴家华
- 关键词：药理学教学实验镇痛药
