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陈永金
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
福建师范大学生命科学学院工业微生物教育部工程研究中心
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发文基金:
引进国际先进农业科技计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
王艳尊
福建师范大学生命科学学院工业微...
黄建忠
福建师范大学生命科学学院工业微...
林晓华
福建师范大学生命科学学院工业微...
雷娟娟
福建师范大学生命科学学院工业微...
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雷娟娟
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陈永金
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生物技术
年份
1篇
2010
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酿酒酵母HOR2基因缺失突变株的构建
被引量:2
2010年
目的:构建酿酒酵母HOR2基因缺失的突变株并研究其对甘油和乙醇产量的影响。方法:以PCR为基础,通过同源重组的方式使目的基因缺失。结果:通过设计含有与HOR2(GPP2)基因两侧序列同源的长引物,以质粒PUG6为模板进行PCR构建含有Cre/loxP系统的酿酒酵母HOR2基因敲除组件,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS2,获得为loxP-kan-loxP序列组件所替换而产生kanr的阳性克隆子。然后再将质粒PSH65转入阳性克隆子诱导表达Cre酶切除筛选标记,在原ORF基因处保留一个loxP位点,丢失质粒后获得HOR2单倍体缺陷型菌株。重复转化敲除组件实现另一条等位基因的敲除。发酵实验表明,突变株甘油产量降低3.34%,乙醇产量提高1.96%。结论:成功获得了酿酒酵母HOR2基因缺失的突变株,并命名为YS2-HOR2。
陈永金
林晓华
王艳尊
雷娟娟
黄建忠
关键词:
酿酒酵母
基因敲除
乙醇
甘油
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