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耿红娟
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
河南农业大学
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发文基金:
河南省杰出人才创新基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
魏娟
河南农业大学
王鑫
河南农业大学
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王鑫
1篇
魏娟
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耿红娟
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中国畜牧兽医
年份
1篇
2009
共
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表达绿色荧光蛋白的伪狂犬基因缺失病毒的构建
被引量:3
2009年
通过酶切、补平、连接的方法对PUSK载体质粒进行改造,消除了该载体上的BamHⅠ和HindⅢ两酶切位点。根据pAcGFP1-C1基因序列设计1对引物,分别在上、下游引物的5′端引入了NotⅠ酶切位点,通过PCR扩增将目的基因AcGFP(包括GFP、CMV、MCS、SV40 Poly(A))克隆入经改造的PUSK载体内,构建了转移载体质粒PUSG。利用脂质体介导的方法,将转移载体质粒PUSG与伪狂犬病病毒基因组DNA共转染PK-15细胞。于荧光显微镜下48 h便能观察到绿色荧光,用吸管将有荧光的病变细胞吸出,经连续传代3次得到了纯化病毒。重组病毒的获得为下一步研制二价或多价疫苗的筛选提供了方便。
王鑫
李文刚
吴凤笋
魏娟
耿红娟
靳永健
关键词:
伪狂犬病病毒
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