孙奇峰 作品数:8 被引量:55 H指数:5 供职机构: 哈尔滨医科大学附属第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
失重下柚皮苷作用于T细胞干预的成骨细胞增殖分化研究 被引量:5 2022年 目的探讨在模拟微重力情况下,柚皮苷作用于T淋巴细胞-成骨细胞共培养体系后,成骨细胞的增殖分化情况及其机制。方法提取SD乳鼠成骨细胞,在微重力环境下,与大鼠T淋巴细胞体外共培养。分为干预组与对照组。干预组加入中药物质柚皮苷干预液,对照组加入同体积不含血清的培养基。通过CCK-8检测成骨细胞增殖情况、ALP活性检测盒检测ALP活性、Western Blot测定蛋白PCNA表达观察细胞增殖情况,测定细胞外调节蛋白激酶ERK表达,研究其机制通路。结果干预组的ALP活性高于对照组,PCNA蛋白表达增高,ERK蛋白表达增高,且具有统计学意义(P<0.05)。结论在微重力下柚皮苷促进了T细胞干预下的成骨细胞增殖分化,其作用机制可能是通过激活ERK通路来实现的。 周森 孙奇峰 蒋雷 张亚龙 杨宇恒 尹文哲关键词:模拟微重力 柚皮苷 T淋巴细胞 成骨细胞 细胞外调节蛋白激酶 失重下骨碎补总黄酮经MAPK通路促间充质干细胞向成骨细胞分化研究 被引量:11 2016年 目的:观察模拟失重状态下,骨碎补总黄酮促间充质干细胞向成骨细胞分化,MAPK/ERK通路变化。方法:体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,建立失重模型,加入骨碎补血清培养液,观察间充质干细胞向成骨细胞分化过程中形态学变化,MTT法测定细胞活性,PNPP法测定ALP活性,RT-PCR测定MAPK/ERK通路。结果:与空白对照组和低剂量组相比,中、高剂量组细胞增殖能力及ALP活性值均明显升高,且具有统计学意义(P<0.05),与阳性对照组接近。加入TFDF后,ERK1/2通路表达明显升高(P<0.05)。结论:失重下骨碎补能激活MAPK/ERK通路促间充质干细胞向成骨细胞增殖、分化成熟。 孙奇峰 尹文哲 高原 叶义杰 江磊磊 褚艳杰关键词:失重 骨碎补 间充质干细胞 成骨细胞 微重力对MC3T3-E1前成骨细胞增殖、分化影响的研究进展 被引量:3 2020年 宇航员在太空飞行中经历的微重力导致人体发生严重生理变化,其中包括头部液体移位、液体和电解质流失、肌肉质量减少、空间晕动病、贫血、免疫反应降低以及骨质流失等,骨质流失是这些问题中最重要的问题之一,其严重程度似乎与飞行持续时间有关。航天飞行期间宇航员每月损失1%~2%的骨量,这种损失很大程度上是由于促进骨形成的成骨细胞标志物的减少引起,导致骨形成明显减少和骨吸收增加的潜在分子机制尚不清楚。研究证明微重力条件下骨形成减少与骨成熟标志物的减少,细胞骨架的改变,凋亡和自噬的增加以及其他相关蛋白及基因的变化有关,这也间接表明了微重力下骨质流失是一个复杂的生理过程。本文对近年来模拟微重力条件下MC3T3-E1前成骨细胞增殖和分化影响的研究进展作一综述,以期为航空航天条件下骨丢失的预防和治疗提供一定的理论基础。 胡逍然 尹文哲 孙奇峰 李阳杰 吴桐 代显葵关键词:晕动病 微重力 航天飞行 太空飞行 骨丢失 失重下骨碎补总黄酮经ERK通路促成骨细胞增殖研究 被引量:16 2017年 目的:观察失重下骨碎补总黄酮对成骨细胞增殖作用及ERK通路变化,探讨骨碎补总黄酮促成骨细胞增殖的可能机制。方法:培养SD仔鼠成骨细胞,建立微重力模型,加高、中、低剂量骨碎补血清培,观察细胞形态学变化,PNPP检测成骨细胞ALP变化,MTT检测成骨细胞增殖。PCR测定ERK通路。结果:与空白对照组和低剂量组相比,中、高剂量组细胞增殖能力及ALP活性值均升高,ERK通路表达升高具有统计学意义(P<0.05),与阳性对照组接近。结论:骨碎补在失重下可促成骨细胞增殖,其机制与ERK通路激活相关。 尹文哲 邢成亮 王建业 孙奇峰 吕成倩 褚艳杰关键词:失重 骨碎补 胞外信号调节激酶 牛津膝关节评分量表应用于国内东北地区膝骨关节炎的信度和效度分析 被引量:17 2019年 目的初步分析牛津膝关节评分量表(Oxford knee score,OKS)应用于中国东北地区膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)评定的信度和效度。方法选取2017年9月1日至2018年9月1日于哈尔滨医科大学附属第二医院骨外四运动医学科就诊的KOA患者96例,使用OKS量表、美国西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(western Ontario and McMaster University osteoarthritis index,WOMAC)及根据《国际功能、残疾和健康分类》(international classification of functioning、disability and health,ICF)关联法则提取OKS有意义概念得到相匹配的条目组合进行评定。评定过程由2名受过统一培训的医生进行,采集数据后,对OKS的内部一致性、内容效度、结构效度、聚合效度等进行检验并与WOMAC、ICF对比。结果OKS量表本身信度检测结果Crohbach'α系数为0.892,每个项目与总分之间的spearman系数结果均表现出中高强度相关。因子结构分析中,KMO检验值为0.841,Bartlett球形检验χ^2=334.983,提取出的3个公因子与WOMAC相关维度呈高度相关,OKS与WOMAC项目以及匹配后的ICF项目在相应维度上均表现出良好的相关性,OKS也没有出现天花板及地板效应。结论OKS可以为中国东北地区KOA患者提供更为详细的症状分级描述,为治疗提供更为敏感的评定。 李阳杰 孙奇峰 邓传超 胡逍然 尹文哲关键词:膝关节骨性关节炎 模拟失重下柚皮苷经STAT3信号通路对T细胞介导下成骨细胞增殖分化的作用机制 被引量:1 2022年 目的研究模拟失重下柚皮苷经信号传导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路对T细胞介导下成骨细胞(osteoblast,OB)增殖分化的作用机制。方法取12只3~5日龄SD乳鼠颅盖骨提取并培养成骨细胞,培养T淋巴细胞。将成骨细胞随机分为6组,a组:正常重力下OB培养组;b组:模拟失重下OB培养组;c组:正常重力下OB与T细胞共培养组;d组:模拟失重下OB与T细胞共培养组;e组:正常重力下柚皮苷干预OB与T细胞共培养组;f组:模拟失重下柚皮苷干预OB与T细胞共培养组。将T细胞与成骨细胞直接接触共培养48 h(期间加入柚皮苷1×10^(-5)mol/L予以干预)。MTT检测成骨细胞增殖能力,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测成骨细胞ALP活性;RT-PCR检测Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、STAT3 mRNA水平;Western blot法检测Runx2及STAT3通路的蛋白表达。结果与正常重力下OB培养组比较,模拟失重下OB培养组细胞增殖能力和ALP活性降低,Runx2及STAT3的表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模拟失重下OB与T细胞共培养组比较,模拟失重下柚皮苷干预OB与T细胞共培养组细胞增殖能力和ALP活性增加,Runx2及STAT3的表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论柚皮苷在失重环境下可促进T细胞介导的成骨细胞增殖分化,其机制与STAT3通路相关。 张佳豪 尹文哲 代显葵 孙奇峰 陈建兴关键词:柚皮苷 成骨细胞 模拟失重 STAT3 模拟微重力下骨碎补柚皮苷对T细胞干预的成骨细胞BMP-2及OPN蛋白表达的影响 被引量:5 2022年 目的:观察模拟微重力下骨碎补柚皮苷对T淋巴细胞干预下的成骨细胞BMP-2及OPN蛋白表达的影响。方法:取SD乳鼠颅盖骨提取成骨细胞进行培养,按照实验分组,与原代T淋巴细胞共培养24 h,将对照组置于微重力模型中培养,将骨碎补主要成分柚皮苷作为药物干预进行实验,其余参照组均加入同体积培养液于37℃,5%CO_(2)培养箱培养24 h,显微镜下观察成骨细胞增殖变化,ALP活性检测盒检测成骨细胞的ALP表达,通过ELISA方法和Western blot方法检测BMP-2蛋白表达;通过ELISA方法检测OPN蛋白表达。结果:与对照组相比,在模拟微重力情况下,与T淋巴细胞共培养组的成骨细胞BMP-2及OPN蛋白表达显著下降(P<0.05);加入骨碎补柚皮苷药物干预后BMP-2及OPN表达有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:模拟微重力下骨碎补柚皮苷能够改善T细胞干预的成骨细胞的BMP-2及OPN的蛋白表达,从而促进成骨细胞的增殖及分化能力。 张亚龙 尹文哲 孙奇峰 周森 蒋雷 张佳豪关键词:成骨细胞 BMP-2 OPN 模拟微重力下柚皮苷对T细胞共育的成骨细胞增殖分化的影响 2022年 目的 在模拟微重力情况下,探索柚皮苷作用于T细胞-成骨细胞共育体系后,对成骨细胞增殖分化的影响。方法 本实验设正常重力对照组、正常重力柚皮苷组、模拟微重力对照组、模拟微重力柚皮苷组,其中对照组分别在正常重力或模拟微重力条件下将T细胞与成骨细胞共育,柚皮苷组分别在对照组基础上加入1×10mol/L柚皮苷溶液。显微镜下观察成骨细胞形态学,CCK-8法检测成骨细胞增殖率,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP活性,实时荧光定量聚合酶链式反应检测Runt相关转录因子2(Runx2)、白细胞介素6(IL-6)m RNA相对表达水平,Western blot法检测Runx2和IL-6蛋白相对表达水平。结果 与正常重力对照组比较,模拟微重力对照组成骨细胞密度降低,仅有少量聚集,细胞形态以圆形居多;与模拟微重力对照组比较,模拟微重力柚皮苷组成骨细胞成梭形或多角形,形态饱满,成鱼群状聚集。与正常重力对照组比较,正常重力柚皮苷组成骨细胞增殖率、ALP活性、Runx2 mRNA和蛋白相对表达水平显著升高,IL-6 m RNA和蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05);模拟微重力对照组成骨细胞增殖率、ALP活性、Runx2 mRNA和蛋白相对表达水平显著降低,IL-6 mRNA和蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05)。与模拟微重力对照组比较,模拟微重力柚皮苷组成骨细胞增殖率、ALP活性、Runx2 mRNA和蛋白相对表达水平显著升高,IL-6 m RNA和蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05)。结论 在T细胞-成骨细胞共育体系中,模拟微重力可以抑制成骨细胞的增殖分化能力;该条件下柚皮苷可以改善成骨细胞的增殖分化能力,其作用机制与IL-6水平的降低及Runx2水平的升高有关。 陈建兴 尹文哲 孙奇峰 周森 张亚龙 王翌关键词:柚皮苷 成骨细胞 模拟微重力 增殖分化 T细胞