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杆状病毒经口感染因子之间相互作用分析被引量：1: 2018年; 昆虫杆状病毒包涵体衍生型病毒（Occlusion-derived virus,ODV）被幼虫食下后通过感染中肠上皮细胞引发全身感染,这个过程被称为经口感染。多种ODV囊膜蛋白在经口感染中发挥关键作用,它们被称为经口感染因子（PIFs）。研究表明7种PIFs：P74、PIF1、PIF2、PIF3、PIF4、PIF6、P95（Ac83）和2种ODV特异性蛋白,Ac5和Ac108,与ODV表面复合物相关,该复合物被称为PIF复合物。阐明杆状病毒PIFs之间,尤其是复合物各个成分之间的相互作用特点是了解经口感染因子功能的关键。本研究以杆状病毒模式种-苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV）为研究对象,利用酵母双杂交和双分子荧光互补技术探究了与PIF复合物相关的9种蛋白之间相互作用的特点。我们鉴定到了6对相互作用,分别为PIF1-PIF2、PIF1-PIF3、PIF1-PIF4、PIF1-P95、PIF2-PIF3和PIF3-PIF4,但是没有鉴定到P74、PIF6、Ac5和Ac108参与相互作用。其中PIF1-PIF3、PIF2-PIF3和PIF1-P95为强相互作用,其他相互作用为中等强度相互作用。根据这些结果我们推测PIF1是PIF复合物的中心,其他成分都和PIF1存在相互作用。最后,我们对目前为止已报道的PIF之间相互作用进行了总结,包括10对不同蛋白之间的相互作用：PIF1-PIF2、PIF1-PIF3、PIF1-PIF4、PIF1-P95、PIF2-PIF3、PIF3-PIF4、ODV-E56-PIF1、ODV-E56-PIF2、ODV-E56-PIF3和ODV-E56-P74,以及2对自相互作用：PIF3-PIF3和ODV-E56-ODV-E56。总之,本研究探索了PIF复合物中蛋白质的相互作用特点,揭示了复合物中各成分如何通过相互作用有机地结合在一起,推进了对该复合物的认识。; 郑秦范颖王海萍许伟凡孔祥硕吴小锋; 关键词：杆状病毒相互作用酵母双杂交

家蚕Bm NPV经口感染因子P74与家蚕互作蛋白的初步筛选: 昆虫杆状病毒包涵体衍生型病毒（Occlusion-derived virus,ODV）被幼虫食下后通过感染中肠上皮细胞引发全身感染,这个过程称为经口感染。多种ODV囊膜蛋白在经口感染中发挥关键作用,它们被称为经口感染因子...; 郑秦孔祥硕王海萍许伟凡吴小锋; 关键词：家蚕杆状病毒; 文献传递

昆虫杆状病毒经口感染因子P74的结构和功能被引量：1: 2016年; 杆状病毒(Baculovirus)是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒,在自然界中以节肢动物(主要是昆虫)作为专一性宿主进行感染和传播。包涵体衍生型病毒是杆状病毒的一种表型,主要通过宿主经口食入引发感染。多种包涵体衍生型病毒囊膜蛋白在病毒原发感染过程中发挥作用,它们被称为经口感染因子。P74是最早被鉴定且研究最为深入的一种经口感染因子,本文从五个方面综述了国内外关于P74的研究成果。P74含有三个跨膜结构域和两个功能结构域。在病毒释放过程中,P74会分别受到包涵体内碱性蛋白酶和宿主中肠胰蛋白酶酶切,P74及其酶切产物和囊膜表面稳定复合物有微弱相互作用。作为病毒结合蛋白,P74和刷状缘囊膜中一个大小约为35kDa的蛋白存在相互作用,使得病毒结合到宿主细胞上。对P74结构和功能的深入研究将促进我们对昆虫杆状病毒原发感染详细分子机制的认识,并为农业生产病害控制提供参考。; 郑秦吴小锋; 关键词：杆状病毒

家蚕中肠细胞与家蚕核型多角体病毒经口感染因子P74的互作蛋白筛选被引量：1: 2018年; 家蚕核型多角体病毒（Bm NPV）包涵体衍生型病毒粒子（ODV）被家蚕幼虫食下后通过侵染中肠上皮细胞引发全身性感染,这个过程称为经口感染。已知有多种ODV囊膜蛋白在经口感染中发挥关键作用,被称为经口感染因子（PIF）。P74作为最早被鉴定的PIF,与ODV结合中肠上皮细胞有关。为了鉴定宿主家蚕中肠细胞中与P74互作的蛋白质,构建家蚕中肠酵母文库,并以P74作为诱饵进行酵母双杂交筛选。初步筛选到7种互作候选蛋白,分别为U3小核仁核糖核蛋白IMP3、60S核糖体蛋白L5、JAB-MPN结构域蛋白、细胞质肌动蛋白A3、35 k D蛋白酶、富半胱氨酸和组氨酸蛋白1-B和真核翻译起始因子1A。免疫共沉淀实验结果表明JAB-MPN结构域蛋白和P74之间存在强烈互作,该蛋白质可能是ODV结合中肠细胞的关键宿主因子。研究结果为进一步阐明Bm NPV经口感染的详细分子机制提供了新的线索。; 郑秦孔祥硕王海萍许伟凡吴小锋; 关键词：家蚕家蚕核型多角体病毒

家蚕核型多角体病毒Bm92a与经口感染因子PIF1的相互作用: 家蚕核型多角体病毒的orf92a(Bm92a)基因在所有已测序的鳞翅目昆虫杆状病毒中高度保守。通过5’RACE发现Bm92a的转录起始于晚期基因启动子基序TAAG的第一个A,表明Bm92a是一个晚期基因。为了鉴定Bm92...; 沈运旺郑秦孔祥硕张健家冯敏吴小锋; 文献传递

昆虫杆状病毒经口感染因子复合物中各蛋白的相互作用特点: 杆状病毒包涵体衍生型病毒(ODV)通过感染宿主幼虫启动病毒原发感染。多种ODV囊膜蛋白在经口感染中发挥关键作用,它们被称为经口感染因子(PIFs)。目前共鉴定到九个PIFs,包括P74、PIF1、PIF2、PIF3、PI...; 郑秦沈运旺孔祥硕张健家冯敏吴小锋; 关键词：蛋白质相互作用原发感染; 文献传递

昆虫杆状病毒经口感染因子之间相互作用分析: 昆虫杆状病毒包涵体衍生型病毒（Occlusion-derived virus,ODV）被幼虫食下后通过感染中肠上皮细胞引发全身感染,这个过程被称为经口感染。多种ODV囊膜蛋白在经口感染中发挥关键作用,它们被称为经口感染因...; 郑秦范颖王海萍许伟凡孔祥硕吴小锋; 关键词：杆状病毒相互作用酵母双杂交; 文献传递

家蚕核型多角体病毒BV病毒结构蛋白间的互作网络: 杆状病毒的结构蛋白虽有大部分已被鉴定,但它们之间的相互作用关系尚不清楚。为揭示家蚕核型多角体病毒（BmN PV）出芽型病毒结构蛋白及结构相关蛋白间的互作关系,本文利用酵母双杂交（Y2H）系统对病毒27个结构蛋白间的互作关...; 张健家冯敏范颖许伟凡郑秦吴小锋; 关键词：家蚕核型多角体病毒结构蛋白; 文献传递

利用丝素蛋白抗体鉴定古代丝织品被引量：4: 2014年; 利用酶联免疫吸附法(ELISA法)对制备的2种丝素蛋白抗体(抗体Ⅰ和抗体Ⅱ)的效价进行检测,在二抗羊抗兔IgG-HRP使用5 000倍稀释浓度及丝素蛋白最佳包被质量浓度下,抗体Ⅰ与抗体Ⅱ的效价分别为1∶60 000和1∶20 000,且抗体Ⅰ对丝素蛋白的特异性更好。利用抗体Ⅰ对浙江省安吉县出土的战国时期(约公元前200年)的2份丝织品进行ELISA定性检测,结果2份样品均呈阳性,说明其为丝素蛋白纤维织物。进一步建立定量检测丝素蛋白的间接竞争ELISA方法,其标准曲线回归方程为Y=3.620 2X2-7.515 2X+3.645 5,检测限为0.48μg/mL。定量检测上述2份出土丝织品样品提取液中的丝素蛋白含量,其质量浓度分别为50.67μg/mL和128.65μg/mL。采用这种基于丝素蛋白特异抗体的ELISA检测方法,对样品中丝素蛋白的检测灵敏度高,特异性好,并且检测成本低,可用于对考古现场发掘丝织品的快速鉴定。研究结果也提示丝素蛋白在家蚕漫长的进化过程中仍然具有高度的保守性。; 郑秦吴小锋郑海玲周旸; 关键词：酶联免疫吸附法古代丝织品

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