赵志华
- 作品数:1 被引量:6H指数:1
- 供职机构:河南省肿瘤病理重点实验室更多>>
- 发文基金:河南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 靶向GCSsi RNA表达载体与胃癌细胞耐药性被引量:6
- 2007年
- 目的构建葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)小干扰RNA(SiRNA)表达载体,观察其对胃癌耐药细胞(SGC7901/VCR)GCS基因表达和耐药性的影响。方法根据siRNA的设计原则,针对人GCS的mRNA序列设计并合成编码siRNA的寡核苷酸序列,并将其克隆入SiRNA的表达载体,构建重组质粒,将重组质粒转染胃癌长春新碱(VCR)耐药细胞SGC7901/VCR,通过蛋白印迹实验(WB)等方法检测转染细胞GCS的表达水平,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞耐药情况。结果构建的GCS siRNA表达载体经限制性酶切分析,证实释放出的片段大小与预期结果一致;转染SGC7901/VCR细胞后,可使细胞中GCS的表达受抑制,并使细胞对VCR的敏感性增加。结论GCS siRNA表达载体的成功构建及其对GCS表达的抑制和细胞耐药的逆转,使其可能成为肿瘤基因治疗的一种新手段。
- 刘宗文张艳赵志华尹磊
- 关键词:RNA干扰葡萄糖神经酰胺合成酶胃癌细胞抗药性