许健
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术生物学更多>>
- 人外周血单个核细胞miR-UL112水平在HCMV感染中的诊断价值研究
- 2014年
- 目的探讨单个核细胞中人巨细胞病毒(HCMV)微小RNA(miR)-UL112-3p、miR-UL112-5p水平对HCMV潜伏和激发感染的诊断价值。方法选取非肿瘤患者92例[其中HCMV特异性CD8+T淋巴细胞高水平组(简称CD8+细胞高水平组)57例、HCMV特异性CD8+T淋巴细胞低水平组(简称CD8+细胞低水平组)35例]、肿瘤化疗患者30例,提取外周血单个核细胞,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(PCR)检测HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-UL112-3p和miR-UL112-5p水平对HCMV潜伏感染的诊断价值。结果肿瘤化疗组HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平明显高于非肿瘤组(P<0.05)。非肿瘤组中CD8+细胞高水平组HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平明显高于CD8+细胞低水平组(P均<0.01);以CD8+细胞低水平组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p水平为标准,CD8+细胞高水平组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p阳性率分别为59.65%、64.91%。分别以1.09、1.52作为miRUL112-3p和miR-UL112-5p诊断HCMV较高水平潜伏感染状态的Cut-off值,敏感性分别为59.65%、64.91%,特异性分别为97.1%、97.1%。以非肿瘤组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p水平的x珋+s(即5.24、6.63)作为诊断HCMV激发感染的标准,肿瘤化疗组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p阳性率分别为50.00%、73.33%。结论 miRUL112-3p及miR-UL112-5p对HCMV潜伏和激发感染可能有一定的诊断价值。
- 吴蓉孔倩倩吕志异许健倪振华相芬芬康向东
- 关键词：人巨细胞病毒
- 抗HPV18 E6多肽单克隆抗体的制备及鉴定
- 2016年
- 目的制备特异性抗人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）18 E6多肽抗体。方法通过在线分析软件AB-Cpred和Bcepred预测 HPV 18E6特异性多肽序列，将多肽序列与牛血清蛋白（bovine albumin，BSA）偶联，以偶联后多肽为抗原免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术制备抗 HPV18 E6多肽单克隆抗体；以 HPV18阳性分泌物标本DNA为模板，聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）获得 HPV 18 E6基因，将该基因插入表达质粒 pET-28a，转化大肠埃希菌BL21（DE3），异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达；采用 Western Blot方法鉴定抗 HPV18 E6多肽抗体与目的蛋白的反应性。结果建立的杂交瘤细胞株能稳定产生 HPV18 E6多肽单克隆抗体；重组表达质粒 pET-28a-HPV18 E6测序证明构建正确，成功表达 HPV18 E6蛋白；纯化后的抗 HPV 18 E6多肽抗体可特异性识别原核表达 HPV 18 E6蛋白。结论成功制备抗 HPV18 E6多肽序列，该抗体具有较好的特异性。
- 孔倩倩唐振华相芬芬詹月萍许健吴蓉康向东
- 关键词：人乳头瘤病毒多肽单克隆抗体
- EB病毒再激活过程中HLA优势基因型的分析被引量：3
- 2017年
- 目的分析中国人群高频率的人类白细胞抗原(HLA)基因型及其所递呈EB病毒(EBV)蛋白表位序列。方法通过Net MHC软件分析预测并合成HLA能够递呈EBV蛋白表位的23种多肽,按照HLA表型HLA-A*2402、HLA-A*1101和HLA-B*4001分为3组。收集160名健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMC),用3组多肽刺激PBMC,血液分析仪检测增殖,采用γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测IFN-γ水平,并用流式细胞术检测CD8、白细胞介素17(IL-17)、CD40L、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、CD45RA、转录因子(Foxp3)的表达水平。结果在160例外周血样本中,对3组多肽刺激反应阳性数为61例,其中HLA-A*2402型阳性数为24例,阳性率为15%;HLA-A*1101型阳性数为34例,阳性率为21%;HLA-B*4001型阳性数为31例,阳性率为19%。阳性反应组外周血中CD8、IL-17、CD40L、TNF-α的表达水平显著高于阴性反应组,差异有统计学意义(P<0.05),而CD45RA、Foxp3的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论中国人群HLA-A*1101基因型在递呈EBV表位序列中占优势。
- 许健吴蓉相芬芬詹月萍倪振华郝文斌乐红红康向东
- 关键词：EB病毒表位人类白细胞抗原免疫反应CD8^+T细胞
