韩东晖
- 作品数:11 被引量:14H指数:3
- 供职机构:第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- CAR-T细胞治疗用于实体瘤的研究进展被引量:5
- 2017年
- 嵌合抗原受体(CAR)修饰的T细胞,即CAR-T细胞治疗策略是一种非常热门的免疫治疗策略,它可特异性识别肿瘤抗原,进而发挥特异性的杀伤作用.因此靶向性好,杀伤力强,并且T细胞的有效活化和增殖不依赖于MHC分子,是一种高效的免疫杀伤策略.目前,CAR-T细胞治疗正在从实验室逐渐走向临床.其在淋巴瘤治疗中效果良好,为血液肿瘤提供了治愈的希望.在实体瘤中,由于肿瘤微环境的复杂性,CAR-T细胞的治疗效果尚不理想,但是近年来在实体瘤方面也取得了不错的进展.本文就CAR-T治疗策略在实体瘤方面的研究进展进行综述.
- 葛玉凤韩东晖吴介恒杨发谢品秦卫军杨安钢温伟红
- 关键词:免疫治疗实体瘤
- 人源性抗前列腺特异性膜抗原单链抗体的表达及活性鉴定
- 2016年
- 目的构建人源性抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体(sc Fv)的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化后,对其生物学活性进行鉴定。方法将人源性抗PSMA sc Fv的基因克隆入原核表达载体p ET302,将其转化入大肠杆菌BL21后用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,摸索不同诱导条件使sc Fv呈可溶性表达,经SDS-PAGE和Western blot法确认表达后,利用Ni2+-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白。利用流式细胞术检测sc Fv与PSMA阳性和阴性细胞的结合情况。结果成功构建人源性抗PSMA sc Fv的原核表达载体;在30℃、IPTG终浓度为0.05 mmol/L时,可实现目的蛋白的可溶性表达;经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后获得纯度较高的抗PSMA sc Fv蛋白;流式细胞术结果显示该sc Fv可与PSMA阳性的LNCa P前列腺癌细胞特异性结合,而不与PSMA阴性的PC-3细胞结合。结论在大肠杆菌成功表达了可溶性人源性抗PSMA sc Fv,获得的抗PSMA sc Fv能够特异性地与PSMA阳性前列腺癌细胞结合。
- 韩东晖吴介恒欧阳清魏铭席文锦杨安钢温伟红秦卫军
- 关键词:单链抗体原核表达
- 人源性抗前列腺特异性膜抗原单链抗体的表达、纯化及体内外活性鉴定
- 目的:将通过抗体噬菌体展示技术筛选获得的一株人源性抗前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)的单链抗体,构建入原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化后,在体内...
- 韩东晖吴介恒闫飞袁建林秦卫军杨安钢温伟红
- 关键词:前列腺特异性膜抗原PSMA人源性单链抗体
- 人源性抗前列腺特异性膜抗原单链抗体的表达、纯化及体内外活性鉴定
- 目的 :将通过抗体噬菌体展示技术筛选获得的一株人源性抗前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)的单链抗体,构建入原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化后,在体...
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- 关键词:前列腺特异性膜抗原PSMA人源性单链抗体
- 文献传递
- 抗人前列腺特异性膜抗原(PSMA)的抗体偶联药物研究
- 研究背景:前列腺癌是严重威胁男性健康的常见泌尿系肿瘤。前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)特异性高表达于前列腺癌细胞表面,是理想的治疗靶分子。抗体偶联药物(...
- 吴介恒韩东晖魏铭郑国旭席文锦杨安钢秦卫军温伟红
- 关键词:前列腺癌PSMA人源性抗体ADC
- 文献传递
- 针对前列腺特异性膜抗原的抗体靶向治疗研究进展被引量:4
- 2017年
- 前列腺特异性膜抗原(PSMA)是一种2型跨膜糖蛋白,它特异性地表达于前列腺上皮细胞,是一种前列腺特异性标志物。PSMA在前列腺癌组织中的表达显著上调,且其表达水平与肿瘤的恶性程度及患者的生存密切相关。此外,PSMA也特异性地表达于多种肿瘤的新生血管内皮细胞。这些特点使得PSMA成为一种理想的肿瘤治疗靶点,以PSMA为靶点的肿瘤靶向治疗研究发展迅速,其中基于抗体的抗肿瘤策略如抗体偶联药物、免疫细胞治疗及免疫放射治疗等取得了显著的进展,证实了PSMA作为抗肿瘤靶点的可行性和有效性。本文就PSMA的结构和功能及针对PSMA的基于抗体的抗肿瘤治疗策略进行了总结。
- 熊诗诗吴介恒韩东晖杨安钢秦卫军温伟红
- 关键词:前列腺癌靶向治疗抗体
- 抗人前列腺特异性膜抗原(PSMA)的抗体偶联药物研究
- 研究背景:前列腺癌是严重威胁男性健康的泌尿系肿瘤。前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)特异性高表达于前列腺癌细胞,是理想的治疗靶点。抗体偶联药物(antib...
- 吴介恒韩东晖杨发郑国旭张玲玲杨安钢秦卫军温伟红
- 关键词:前列腺癌PSMA人源性抗体ADC
- 悬浮驯化CHO细胞并用于抗前列腺特异性膜抗原的抗体表达被引量:3
- 2016年
- 目的将贴壁状态的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞驯化成用无血清培养基培养的悬浮CHO细胞(CHO-S),并验证用该悬浮细胞进行抗体表达的可行性。方法将贴壁状态的CHO-S细胞调整为悬浮培养后,再用逐步降低血清含量的方法将其驯化成用无血清培养基悬浮培养的CHO-S细胞。根据从噬菌体抗体库筛选获得的抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体的基因序列,人工设计并合成其重链和轻链基因,分别克隆入真核表达载体pc DNA3.1中,所得载体命名为pc DNA3.1-HC和pc DNA3.1-LC。将构建好的2个载体按照轻、重链比例为3∶1的量用Free Style MAX转染试剂瞬时转染CHO-S细胞,转染7 d后收集培养上清,用SDS-PAGE和Western blot法检测抗体表达情况,用流式细胞术检测其与PSMA阳性细胞的结合活性。结果成功将贴壁CHO细胞驯化成悬浮CHO-S细胞,成功构建了表达抗PSMA人源性抗体重链和轻链基因的真核表达载体,并在CHO-S细胞中实现了抗体的分泌表达,流式细胞术检测证实其可特异性结合PSMA阳性前列腺癌细胞。结论成功驯化获得悬浮CHO-S细胞,驯化后的CHO-S细胞可用于抗体的真核表达,为后续抗体的大量表达纯化及功能研究提供了工具。
- 吴介恒韩东晖魏铭郑国旭焦点席文锦杨安钢秦卫军温伟红
- 关键词:CHO细胞抗体表达真核表达转染
- 过表达前列腺特异性膜抗原和荧光素酶的PC3稳定细胞系的建立及成瘤性鉴定被引量:2
- 2017年
- 目的利用慢病毒感染的方法建立能稳定表达前列腺特异性膜抗原(PSMA)和荧光素酶的PSMA^+-PC3细胞系,并将其接种到裸鼠皮下检测其成瘤能力。方法包装表达PSMA的慢病毒和表达荧光素酶的慢病毒,将其感染PC3细胞后,用嘌呤霉素进行筛选,建立能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA^+ -PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA--PC3细胞;利用流式细胞术检测PSMA的表达情况。将PSMA^+ -PC3和PSMA^- -PC3细胞接种于裸鼠皮下建立荷瘤模型,利用生物发光成像法观察其在体内的成瘤情况,利用免疫组织化学染色法检测PSMA^+ -PC3和PSMA^- -PC3肿瘤组织中PSMA的表达情况。结果成功建立了能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA^+ -PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA^- -PC3细胞,流式细胞术检测证实PSMA^+ -PC3细胞上PSMA呈阳性表达,小动物活体成像结果显示PSMA^+ -PC3和PSMA^- -PC3细胞均可有效成瘤,免疫组织化学染色检测证实PSMA^+ -PC3肿瘤上PSMA的表达为阳性。结论成功建立了能稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA^+ -PC3细胞系,并在裸鼠体内证实其可有效成瘤,为靶向PSMA的研究提供了有用的细胞和动物模型。
- 张玲玲吴介恒韩东晖史圣甲杨发谢品席文锦郭张燕秦卫军杨安钢温伟红
- 关键词:PSMA
- 抗人前列腺特异性膜抗原(PSMA)的抗体偶联药物研究
- 研究背景:前列腺癌是严重威胁男性健康的泌尿系肿瘤。前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)特异性高表达于前列腺癌细胞,是理想的治疗靶点。抗体偶联药物(antib...
- 吴介恒韩东晖杨发郑国旭张玲玲杨安钢秦卫军温伟红
- 关键词:前列腺癌PSMA人源性抗体ADC
- 文献传递