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程永婷

作品数:10 被引量:18H指数:3
供职机构:河北北方学院更多>>
发文基金:河北省自然科学基金河北省中医药管理局科研计划项目张家口市科学技术研究与发展计划项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 10篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 4篇真核
  • 4篇真核表达
  • 4篇核表达
  • 3篇蛋白
  • 3篇衣原体
  • 3篇荧光
  • 3篇免疫
  • 2篇真核表达载体
  • 2篇沙眼
  • 2篇沙眼衣原体
  • 2篇细胞
  • 2篇免疫荧光
  • 2篇基因
  • 2篇间接免疫
  • 2篇间接免疫荧光
  • 2篇肺炎
  • 2篇肺炎衣原体
  • 2篇WESTER...
  • 2篇BLOT
  • 2篇HELA细胞

机构

  • 10篇河北北方学院
  • 3篇河北北方学院...
  • 1篇中国人民解放...

作者

  • 10篇程永婷
  • 7篇贾天军
  • 6篇贾晓晖
  • 4篇李萍
  • 3篇马良
  • 2篇赵霞
  • 2篇李婷
  • 1篇张敬
  • 1篇马峰
  • 1篇张斌

传媒

  • 4篇中国病原生物...
  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇临床检验杂志
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇世界中医药
  • 1篇药物评价研究

年份

  • 1篇2023
  • 1篇2020
  • 3篇2017
  • 4篇2016
  • 1篇2015
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
ACBD3基因片段真核表达载体的构建与表达被引量:1
2017年
目的构建ACBD3基因片段真核表达载体并表达蛋白,为研究其与肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308/Cpn0147相互作用的分子机制奠定基础。方法根据与肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308/Cpn0147作用的配体核苷酸序列设计引物,以HeLa细胞cDNA为模板,通过PCR获得ACBD3基因片段,与pcDNA3.1+/Flag质粒经双酶切后在T4连接酶作用下连接,构建表达载体pcDNA3.1+/Flag-ACBD3,经菌落PCR、双酶切及质粒测序鉴定后转染HeLa细胞,采用Western blot与间接免疫荧光法检测目的蛋白表达。结果 PCR扩增目的基因片段约883bp,与预期相符。经菌落PCR、双酶切验证及测序分析重组质粒构建成功。间接免疫荧光法检测重组质粒转染后的HeLa细胞,观察到表达的蛋白位于细胞胞浆;SDS-PAGE检测表达蛋白分子质量单位(Mr)为33.5×10~3,与预期相符。结论成功构建了pcDNA3.1+/Flag-ACBD3真核表达载体并实现目的蛋白的表达,为进一步研究其生物学功能及其与肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308/Cpn0147之间的相互作用奠定了基础。
马良程永婷赫聪慧贾晓晖李萍贾天军
关键词:真核表达载体WESTERNBLOT间接免疫荧光
肺炎衣原体Taqman探针实时荧光定量PCR检测法被引量:5
2016年
目的针对Cpn0308基因建立检测肺炎衣原体的Taqman探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法。方法根据肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308基因序列设计引物和Taqman探针,建立Taqman FQ-PCR检测体系,对反应体系进行优化,进行灵敏度、特异性、重复性评价;并与商品化肺炎衣原体核酸检测试剂盒检测临床标本进行对比分析。结果肺炎衣原体Taqman FQ-PCR方法的引物浓度300 nmol/L,探针浓度200 nmol/L,Mg^(2+)4.0 mmol/L为最优反应条件;灵敏度为8.36×102copies/μL;该法对常见几种呼吸道病原菌及沙眼衣原体无交叉反应;重复性试验中4个浓度变异系数均小于3%。自建方法与商品化试剂盒对呼吸道感染组、心血管疾病组及正常对照组标本检出率分别为10%vs 10%(χ~2=0.167,P>0.05),44.44%vs 40.74%(χ~2=0,P>0.05),6.67%vs 3.33%(χ~2=0,P>0.05),各组阳性率间差异无统计学意义;2种方法的总阳性率(16.54%vs 14.96%)比较差异无统计学意义(χ~2=0.071,P>0.05)。结论本研究建立的Taqman探针实时荧光定量PCR检测肺炎衣原体的方法灵敏度好,特异性高,重复性好,可应用于临床肺炎衣原体核酸检测。
程永婷贾晓晖马良贾天军
关键词:肺炎衣原体TAQMAN探针实时荧光定量PCR
Cpn0147基因真核表达载体的构建及在HeLa细胞中的表达
2015年
目的构建肺炎衣原体Cpn 0147基因真核表达重组质粒,为进一步研究其与宿主相互作用的分子机制打下基础。方法以Cpn AR39株基因组为模板,以Cpn0147全长编码特异性引物进行PCR扩增;将Cpn0147基因插入至pcDNA3.1+/His/Myc载体,构建pcDNA3.1+/His/Myc-Cpn0147重组质粒,经双酶切及测序鉴定后转染至HeLa细胞中,采用RT-PCR检测重组质粒转染情况,采用免疫荧光法及Western blot检测Cpn0147蛋白在细胞中的表达。试验设pcDNA3.1+/His/Myc载体为阴性对照。结果从CpnAR39株基因组DNA中扩增出Cpn0147基因片段,大小466bp,经双酶切、连接、转化、筛选,得到pcDNA3.1+/His/Myc-Cpn0147重组质粒,序列测定证实与GenBank Cpn AR39株Cpn0147基因序列一致;RT-PCR扩增出Cpn0147基因,与理论大小一致;免疫荧光检测重组质粒转染后HeLa细胞胞浆观察到红色荧光,对照组无荧光;Western blot检测到特异反应条带位于16kd,对照组无此条带。结论成功构建pcDNA3.1+/His/Myc-Cpn0147重组质粒并在真核细胞内表达Cpn0147蛋白,为进一步研究其分子生物学功能奠定了基础。
赵霞贾天军李萍贾晓晖李婷程永婷
关键词:肺炎衣原体真核载体间接免疫荧光免疫沉淀
高分辨率熔解曲线分析技术检测MASP-2基因点突变方法的建立及评价被引量:1
2017年
目的建立高分辨率熔解曲线(HRM)分析技术检测人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)基因g.21370(G>T)位点单核苷酸多态性(SNP)的方法并进行评价。方法通过测序获得MASP-2基因g.21370(G>T)位点3种不同基因型对照品,并用其建立HRM技术检测MASP-2基因点突变方法。利用60份待测DNA样品对建立的HRM方法的准确性、重复性及稳定性进行评价。结果建立的MASP-2基因HRM分析方法扩增反应正常,G/G、G/T、T/T 3种基因型区分明显,扩增产物Melt曲线良好,无非特异性产物出现;与基因序列测定结果对比显示准确性良好;对野生型和突变型标本3次重复检测结果显示,Tm值变异系数为0.017和0.023;χ~2检验结果表明,本研究选取的随机体检人群MASP-2基因g.21370(G>T)位点基因型频率分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡。结论建立的MASP-2基因g.21370(G>T)位点HRM检测方法准确性高、重复性及稳定性良好,为下一步临床分析MASP-2基因SNP提供一定的技术支持。
贾晓晖阎敏娜贾天军程永婷张斌
关键词:高分辨率熔解曲线基因型单核苷酸多态性
甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(MAp19)在HeLa细胞的表达
2016年
目的构建甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(MAp19)真核表达载体并表达MAp19。方法应用PCR技术扩增得到MAp19基因,利用基因克隆技术构建真核表达载体pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19,酶切及测序对其进行鉴定;将构建成功的重组载体通过脂质体转染He La细胞,并采用G418筛选已获得整合有pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19的阳性细胞克隆,用荧光显微镜观察MAp19融合蛋白在He La细胞的定位;Western blot法检测MAp19融合蛋白的水平。结果构建了具有筛选特征和能够稳定表达的pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19重组质粒,测序结果与NCBI数据库比对完全一致;采用G418筛选后获得表达外源性MAp19蛋白的He La细胞,该蛋白定位于细胞质中;Western blot结果确定MAp19为分泌性蛋白。结论 MAp19真核表达载体构建成功,并能在真核细胞中表达出目的蛋白。
李婷李萍贾天军贾晓晖赵霞程永婷
关键词:真核表达转染
中医药治疗手足综合征随机对照试验的Meta分析被引量:3
2020年
目的:评价中医药治疗手足综合征的疗效。方法:计算机检索2007年1月1日至2019年1月1日国内外发表的关于中医药治疗HFS的临床随机对照研究文献,根据Cochrane Handbook 5.0版有关随机对照试验的质量评价标准,对纳入的研究进行方法学质量评价,并采用Stata 12.0软件进行Meta分析。结果:共纳入12篇文献,总的比较研究间存在较大异质(I^2=83.1%,P=0.00),敏感性分析结果显示1篇文献的研究结果与其他文献存在较大异质性;将所剩余11篇文献按引起HFS的不同因素,分为卡培他滨、靶向治疗、化疗或靶向治疗3个亚组进行Meta分析,结果显示虽然合并Meta分析显示各研究间仍存在较大异质性(I^2=73.4%,P=0.000);但是卡培他滨亚组(I^2=31.6%,P=0.232)、靶向治疗亚组(I^2=40.5%,P=0.151)、化疗或靶向治疗亚组(I^2=47.3%,P=0.150)各亚组间不存在大的异质性,且各亚组实验组与对照组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:中医药治疗HFS有效,且总有效率要优于单纯西药治疗;对于不同发生机制的HFS在临床治疗或研究中要区分治疗或研究。
黎鹏程永婷
关键词:手足综合征卡培他滨中医药治疗随机对照实验META分析
沙眼衣原体CT813与CREB3相互作用的鉴定
沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)是严格活细胞内寄生、且具有独特的发育周期的微生物。通过性传播感染泌尿生殖道,可引起女性盆腔炎、宫外孕和不孕不育等,引起学者高度关注。  CT感染开始于原体(E...
程永婷
关键词:沙眼衣原体亚细胞定位免疫共沉淀生物学功能
文献传递
沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813真核表达载体的构建及表达被引量:3
2016年
目的构建沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813真核表达载体并观察其在Hela细胞中的表达,为研究其与宿主间的相互作用奠定基础。方法克隆CT813基因,分别对CT813与pcDNA3.1/Myc-HisA空质粒进行双酶切,T4连接酶进行连接,然后进行菌落PCR、酶切及测序鉴定;将构建的重组质粒pcDNA3.1/Myc-HisA-CT813转染Hela细胞后采用Western blot与间接免疫荧光法检测目的蛋白表达。结果 PCR显示,扩增的目的基因片段约795bp,与预期相符;经NotⅠ与kpnⅠ双酶切鉴定重组质粒构建正确,测定其序列与NCBI数据库完全一致;Western blot显示重组质粒转化Hela表达的CT813融合蛋白分子质量单位为29.4kd左右;间接免疫荧光法检测该蛋白位于细胞胞浆中,是衣原体分泌性蛋白。结论成功构建了PcDNA3.1/Myc-His A-CT813真核表达载体并表达了沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813,对研究其生物学功能及与宿主配体间的相互作用具有重要意义。
程永婷贾天军李萍贾晓晖马良
关键词:WESTERNBLOT间接免疫荧光法
乳香没药精油自微乳的制备与抗炎镇痛作用评价被引量:4
2023年
目的制备乳香没药精油(FMO)自微乳化给药系统(FMO-SMEDDSs),并评价其抗炎镇痛效果。方法水蒸气蒸馏法提取FMO,考察FMO与不同种类油相、乳化剂和助乳化剂的配伍相容性并确定了FMO-SMEDDSs的处方组成,最终根据伪三元相图法得到其处方配比;以热力学稳定性、动态光散射、透射电镜等实验手段评价FMO-SMEDDSs的理化性质。将SD大鼠随机分为5组:对照组、模型组、布洛芬(阳性药,20 mg·kg^(−1))组、FMO(生药剂量90 mg·kg^(−1))组、FMOSMEDDSs(90 mg·kg^(−1))组,每天ig给药2次,连续给药7 d,对照组与模型组ig生理盐水;除对照组外,其余4组大鼠均在右后足跖sc 40.0%甲醛溶液0.1 mL,6 h后用千分尺测量大鼠右后足厚度,并计算肿胀度和肿胀抑制率;ELISA试剂盒法分别检测致炎足足底组织中前列腺素E_(2)(PGE_(2))水平,血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。通过小鼠扭体法评价布洛芬(40 mg·kg^(−1))组、FMO(180 mg·kg^(−1))组、FMO-SMEDDSs(180 mg·kg^(−1))的镇痛效果。结果根据配伍相容性及伪三元相图结果,分别选择肉豆蔻酸异丙酯(IPM)、聚山梨酯80和异丙醇作为FMO-SMEDDSs的油相、乳化剂和助乳化剂,配比为4∶4∶2;FMO-SMEDDSs形成的微乳平均粒径为(57.8±1.1)nm,PDI为(0.216±0.014),Zeta电位为(−11.5±0.05)mV,在透射电镜下可观察到微乳呈球状,FMO-SMEDDSs热力学稳定性良好。与模型组比较,布洛芬、FMO、FMOSMEDDSs组大鼠的致炎足肿胀度及肿胀率均显著降低(P<0.05),PGE2、TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.05);与FMO组比较,FMO-SMEDDSs组大鼠致炎足肿胀度及肿胀率进一步显著降低(P<0.05),PGE_(2)、TNF-α和IL-6水平进一步显著降低(P<0.05)。与模型组比较,ig布洛芬、FMO以及FMO-SMEDDSs后均能显著延长小鼠扭体反应潜伏期,显著减少15 min内的扭体次数(P<0.05);相对于FMO组,FMO-SMEDDSs抑制小鼠扭体反应作用更明显。结论成功制备FMO-SMEDDSs,其
黎鹏程永婷马峰任成波孙建伟张敬
关键词:自微乳化给药系统抗炎镇痛前列腺素E2
衣原体分泌蛋白的研究进展被引量:1
2016年
衣原体通过其自身产生的分泌蛋白实现与宿主的相互作用,此类蛋白主要包括分泌到包涵体膜上(如包涵体膜蛋白等)、分泌到胞浆中(如CPAF、TARP等)及其他分泌蛋白(SINC)。近年来出现了关于不同类型分泌性蛋白的最新研究成果,本综述主要对这些分泌性蛋白的一些新功能进行了论述。
程永婷贾天军
关键词:TARP
共1页<1>
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