田平平 作品数:4 被引量:2 H指数:1 供职机构: 四川大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
HEXIM1蛋白与Alu SINE RNA相互作用的研究 被引量:1 2014年 为了探讨Alu SINE RNA和HEXIM1蛋白之间是否存在相互作用.本实验构建了带有FLAG标签的HEXIM1真核表达载体,转染人胚肾293(HEK293)细胞,做anti-FLAG的RNA免疫共沉淀(RIP)后运用免疫印记和逆转录PCR(reverse transcription PCR,RTPCR)等方法检测.证明了Alu SINE RNA和HEXIM1蛋白之间存在相互作用,表明Alu SINE RNA和HEXIM1蛋白共同影响基因转录调控,以及细胞在应对外界刺激时能及时在基因水平做出有效反应的可能. 田平平 吴传芳 欧阳劲 秦岭关键词:ALU SINE RNA 免疫印迹 基因转录调控 Star-PAP蛋白的纯化分析及其限定性因子的分离 2014年 克隆并构建了Star-PAP的表达载体,然后将该载体转染HEK293细胞,经纯化得到了重组的Star-PAP蛋白.以细胞总RNA和体外转录的U6snRNA为底物,对纯化到的Star-PAP的TUTase活性进行了分析.结果显示重组的Star-PAP能够对细胞总RNA以及U6snRNA进行体外尿苷化修饰,表明纯化到的Star-PAP具有良好的TUTase活性.此外,使用HPLC分离得到了具有U6snRNA底物特异性的细胞核组分.该组分除了含有StarPAP外,还含有一种未知蛋白,该未知蛋白可能就是赋予Star-PAP底物特异性的限定性因子. 于春雷 田平平 吴传芳 欧阳劲 秦岭关键词:SNRNA TUTASE 胚胎干细胞中DPPA2和DPPA4蛋白相互作用的研究 2013年 本文分别构建了小鼠胚胎干细胞的带FLAG多肽标签的DPPA和带HA多肽标签的DPPA4蛋白真核表达载体.将该质粒转入小鼠成纤维细胞HEK293中进行细胞体内表达,并利用免疫印记和免疫共沉淀技术证明了DPPA2和DPPA4蛋白在细胞内可以相互作用.因此,提出了在胚胎干细胞的自我更新和分化等过程中,DPPA2和DPPA4蛋白相互作用的结论. 杨洁 雷霆钧 田平平 吴传芳 欧阳劲 秦岭关键词:胚胎干细胞 免疫印记 免疫共沉淀 蛋白激酶C对转录延伸正调节因子b(P-TEFb)的影响 被引量:1 2011年 本文探讨了PKC的4种亚型α、βⅡ、γ和λ对P-TEFb各蛋白组分的表达影响.成功构建了带有HA标签的pcDNA3.1-PKC的各亚型真核表达载体,并转染HEK293细胞株,用Western bolt检测其表达情况,发现这四种PKC亚型在细胞中表达良好。将PKCβⅡ或者PKCλ转染进入HEK293细胞株,发现其可使CDK9和Cyclin T蛋白表达量升高;但在细胞中高表达PKCα和PKCγ,对P-TEFb各组分表达量没有影响.表明PKC可通过提高P-TEFb的组分表达量,从而上调某些基因的表达. 任浙丹 黄迎彬 杨洁 赵长宏 田平平 吴传芳关键词:转录调控