王相国
- 作品数：112 被引量：186H指数：6
- 供职机构：北京农学院动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 鸡眼镜
- 一种鸡眼镜包括镜片(1)、支架(2)、粘接架(3)和插杆(7)，其特征在于：所述支架(2)上设有供插杆(7)的通过的通孔(4)，所述支架(2)将两侧的镜片(1)连接在一起，所述粘接架(3)紧贴于支架(2)中部的下侧，其由...
- 盛熙晖邢凯齐晓龙王相国常迪肖龙菲郭勇倪和民
- 文献传递
- 表皮生长因子对绵羊子宫内膜上皮原代细胞增殖的影响被引量：5
- 2020年
- 通过建立和完善绵羊子宫内膜上皮原代细胞体外培养技术,为研究绵羊母体和孕体之间的相互作用机制建立体外着床模型。采用组织块法分离培养子宫内膜上皮细胞,观察其生长情况,并比较不同表皮生长因子(EGF)浓度对子宫内膜上皮细胞增殖的作用效果。结果显示,组织块培养1~2 d后,组织周围迁出子宫内膜上皮细胞,长满60 mm培养皿需9~12 d;经差时消化法纯化后,F1代绵羊子宫内膜上皮细胞纯度可达90%以上,表明所获细胞可用于后续试验;F2代细胞在不同浓度EGF(0、12.5、25、50、75、100 ng/mL)下培养144、168 h,经检测在144 h,12.5、25和100 ng/mL浓度下D 450 nm值极显著高于对照组(P<0.01),50 ng/mL浓度下显著高于对照组(P<0.05),在168 h,12.5 ng/mL浓度下显著高于对照组(P<0.05),因此,在12.5 ng/mL EGF作用下效果最佳;F3代细胞在0、12.5 ng/mL浓度下培养不同时间(24、48、72、96、120、144、168、192、216 h),经检测D 450 nm值在144 h差异显著(P<0.05),168 h后差异极显著(P<0.01)。因此,在培养液中添加12.5 ng/mL EGF可以更加高效、快速得到子宫内膜上皮细胞。
- 王利娟陈超磊苏运泽李博宇王相国盛熙晖郭勇倪和民
- 关键词：绵羊子宫内膜上皮细胞EGF免疫荧光染色
- 一种快速预测鸡胸肌肉滴水损失的方法
- 一种快速预测鸡胸肌肉滴水损失的方法，具体步骤如下：步骤一：屠宰n只的鸡，其中n为自数，分别为每只鸡采集同一部位的肌肉；步骤二：取上述鸡的同一部位的肌肉用取样器采集5g测试样品(6)，记为W<Sub>0</Sub>；测试样...
- 盛熙晖邢凯齐晓龙郭勇倪和民王相国
- 文献传递
- 外泌体miR-218抑制脂多糖诱发子宫内膜上皮细胞免疫因子释放研究被引量：1
- 2021年
- 【目的】探究奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体及其miR-218在减轻大肠杆菌脂多糖诱发免疫反应中的作用。【方法】用不同质量浓度大肠杆菌脂多糖作用于奶牛子宫内膜上皮细胞系24 h后采用细胞计数试剂盒检测细胞活性;酶联免疫吸附测定检测免疫因子IL-1β和TNF-α释放;采用透射电子显微镜和蛋白印记法验证提取外泌体的粒径和标识蛋白CD63表达,荧光定量聚合酶链式反应法检测外泌体中miR-218表达变化;采用激光共聚焦显微镜观察外泌体与奶牛子宫内膜上皮细胞融合;细胞转染mimics 218检测其对大肠杆菌脂多糖诱发奶牛子宫内膜上皮细胞免疫因子释放的影响。【结果】100μg/mL大肠杆菌脂多糖处理奶牛子宫内膜上皮细胞后,IL-1β、TNF-α含量均显著高于对照组(P<0.05);大肠杆菌脂多糖刺激奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体中miR-218的表达量极显著低于奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体中miR-218的表达量(P<0.01);正常培养奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体能够与大肠杆菌脂多糖处理的奶牛子宫内膜上皮细胞融合并与NF-ΚB(p65)蛋白共定位于细胞质中。将奶牛子宫内膜上皮细胞来源外泌体加入到100μg/mL大肠杆菌脂多糖处理奶牛子宫内膜上皮细胞24 h后,显著抑制了大肠杆菌脂多糖引起的奶牛子宫内膜上皮细胞培养上清中的IL-1β和TNF-α释放(P<0.05)。同样的,转染进奶牛子宫内膜上皮细胞内mimics 218与磷酸化的NF-ΚB(p65)核外部分共定位并显著抑制了大肠杆菌脂多糖诱发的奶牛子宫内膜上皮细胞中TNF-α释放(P<0.05),而对IL-1β释放无显著差异。【结论】miR-218能够随着健康子宫内膜上皮细胞分泌外泌体进入到受到大肠杆菌脂多糖刺激奶牛子宫内膜上皮细胞内,并与磷酸化p65核外部分共定位并抑制大肠杆菌脂多糖引起的TNFα的释放。
- 谢彤彤付博凡姚鑫鑫盛熙晖郭勇肖龙菲倪和民王相国
- 关键词：子宫内膜炎外泌体大肠杆菌脂多糖MIR-218子宫内膜上皮细胞
- 奶牛子宫内膜炎的检测标志物及其获得方法和应用
- 本发明提供了奶牛子宫内膜炎的检测标志物及其获得方法和应用，获得方法包括提取外泌体；提取外泌体中的RNA；根据RNA构建miRNA库；对miRNA库进行深度测序和数据分析，以筛选出具有差异表达的miRNA，即目标差异基因，...
- 倪和民王相国郭勇盛熙晖齐晓龙邢凯
- 文献传递
- 程序化冷冻前后小鼠正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3基因表达的研究被引量：2
- 2017年
- 试验旨在研究程序化冷冻前后小鼠正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3蛋白的分布及转录水平的差异表达情况,为阐明哺乳动物胚胎在抗冻过程中的相关调控机制提供理论依据。试验选用ICR系雌性小鼠,从妊娠第5天小鼠子宫回收正常孵化囊胚;构建延迟着床模型获取小鼠休眠胚胎,利用激光共聚焦和实时荧光定量PCR技术对各组胚胎进行细胞免疫荧光和C3mRNA相对表达量的检测。结果发现,程序化冷冻前后的正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3在转录和翻译水平均有表达;正常孵化囊胚经冷冻处理后C3mRNA相对表达量显著上调(P<0.05);休眠胚胎冷冻后C3mRNA相对表达量与冷冻前相比显著下调(P<0.05);冷冻前休眠胚胎C3mRNA相对表达量显著高于冷冻前正常孵化囊胚(P<0.05);冷冻后休眠胚胎C3mRNA相对表达量显著低于冷冻后正常孵化囊胚(P<0.05)。结果表明,胚胎中C3基因在转录水平的下调表达对胚胎抗冻具有一定的积极作用,C3基因很可能参与了胚胎抗冻过程的相关调控。
- 刘迪倪和民顾美超卢文瑾盛熙晖齐晓龙王相国郭勇
- 关键词：小鼠囊胚
- 动物医学专业临床实践教学模式改革与创新思考被引量：5
- 2019年
- 为适应我国高等教育的深入改革和社会需求,培养具有创新能力的动物医学专业型人才,本文介绍了我校动物医学专业临床实践教学存在的主要问题,同时探讨了学校开展实践教学模式改革与创新的必要性,从实践教学内容、实习基地的建设、科研训练等方面提出了一些可行的改革与创新措施,有利于构建动物医学专业临床实践教学新模式,最终提高学生的创新能力和综合素质,同时促进动物医学专业的整体发展。
- 常迪陈玲超王相国倪和民
- 关键词：动物医学临床实践教学
- 牛体外受精早期胚胎培养体系优化的研究被引量：6
- 2019年
- 研究旨在筛选牛体外受精的最优培养体系,提高体外受精的囊胚孵化率。本研究将培养体系分为四组,CR1aa组,mCR组,CR1aa前+mCR后组,mCR前+CR1aa后,通过统计胚胎发育情况。结果显示CR1aa组卵裂率,八细胞率,囊胚率,孵化率分别为82.29±0.58,48.79±1.12,24.99±0.28,14.42±0.86;mCR组卵裂率,八细胞率,囊胚率,孵化率分别为57.18±1.61,26.48±0.53,22.15±1.20,18.12±0.57;CR1aa前+mCR后组卵裂率,八细胞率,囊胚率,孵化率分别为82.24±1.32,48.60±1.93,34.07±1.04,24.87±0.66;mCR前+CR1aa后组卵裂率,八细胞率,囊胚率,孵化率分别为58.80±2.26,26.77±1.21,24.15±0.73,13.10±1.09;从四组结果中可以看出CR1aa前培养液与mCR前相比可以显著提高牛体外受精的卵裂及八细胞率(P<0.05),但其后期发育不佳。mCR后与CR1aa后相比可以显著提高牛体外受精胚胎的囊胚率和孵化率(P<0.05)。由此得出mCR前+CR1aa后组可以显著的提高体外受精的囊胚和孵化率。为了进一步验证该组合的稳定性,利用mCR前+CR1aa后体系分别在不同季节进行验证,结果显示除夏季相对不佳外,其他季节均能维持较高的卵裂囊胚孵化率。进而认为CR1aa前+mCR后体系最有利于牛体外受精胚胎的生产且孵化率较高,有利于后期胚胎移植的进行。
- 陈超磊王利娟胡新宇倪和民王相国盛熙晖齐晓龙邢凯郭勇
- 关键词：胚胎体外受精囊胚
- 转hTERT基因牛胎盘滋养层细胞生长及分泌特性研究被引量：3
- 2021年
- 本研究旨在培养符合实验要求的牛胎盘滋养层细胞,并探究外源hTERT基因对细胞生长及功能特性的影响。利用联合组织块培养法、胰蛋白酶消化法获得原代牛胎盘滋养层细胞,利用脂质体转染pc1-neohTERT质粒,通过WesternBlot检测细胞角蛋白7(Cytokeratin7,CK7)和波形蛋白(Vimentin)的表达,又通过免疫组化检测胎盘催乳素(Placental Prolactin,PL)和绒毛膜促性腺激素(Chorionic Gonadotropin,CG)等的表达。结果表明:研究中培养获取的原代牛胎盘滋养层细胞90%以上可表达特异性角蛋白CK7,转染质粒后细胞可连续稳定传代15代以上,且CG和PL的分泌量与原代细胞相比无显著差异,证明转染质粒对细胞主要功能及生长特性没有明显影响,细胞可用于后续实验。
- 李茜茹邢凯苏月李博宇苏运泽王春伟郭勇肖龙菲齐晓龙盛熙晖倪和民王相国
- 关键词：胎盘滋养层细胞HTERT基因原代细胞培养
- 一种胎盘类器官模型的构建方法
- 本发明提供了一种胎盘类器官模型的构建方法，属于生物和医药领域，尤其涉及早期胎盘发育与类器官研究。本发明所述构建方法包括提取纯化牛胎盘滋养层细胞，获得永生化牛胎盘滋养层细胞系以及构建永生化牛胎盘类器官。本发明利用永生化的牛...
- 王相国肖龙菲安红刘冰颖盛熙晖齐晓龙郭凯军
