葛晖
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 供职机构：中国农业大学农学与生物技术学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 葡萄SCARECROW基因家族的分析与表达被引量：4
- 2012年
- 赤霉素(GA)促进葡萄果实的膨大,目前对外源赤霉素促进葡萄果实膨大的信号转导途径还不完全清楚。有研究发现GA3处理后葡萄果实中一个SCARECROW(SCR)蛋白的表达出现上调,为了进一步揭示GA的作用途径,本研究通过分析在其他植物中已经确认的SCR基因序列,对葡萄全基因组进行BLAST比对,获得了可能编码葡萄SCR的11个基因片段序列SCRs。分别设计特异性引物,以无核白鸡心葡萄(Vitis vinifera L.cv.Centennial seedless)不同组织器官,以及盛花后12d以30mg/L GA3处理无核白鸡心葡萄的花序,并于花后13、15、19、45、61d采收的果实为材料,进行半定量RT-PCR测定SCRs的表达。结果显示:这些基因在成叶、幼叶、根、花序、新梢顶尖、休眠芽、胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织中存在差异表达;在花后13、19、45、61d的葡萄果实中有不同状态的上调。研究结果对进一步探讨SCRs在葡萄果实发育和成熟过程的作用与功能提供了线索。
- 陈丽华葛晖柴丽娟陈尚武马会勤
- 关键词：葡萄SCARECROWGA3处理半定量基因家族
- 2个葡萄GID(Gibberellin Insensitive Dwarf)基因的克隆与表达被引量：2
- 2013年
- 为探讨外源GA介导的无核葡萄果实膨大的机理,本试验根据葡萄基因组序列设计特异性引物,以葡萄果实cDNA一链为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)克隆了2个假定的葡萄GID基因。测序比对结果表明其中一个属于GID1ac家族,根据序列相似性,命名为VvGID1-3,另一个属于GID2 F-box基因家族,命名为VvGID2。在烟草中分别超表达这2个基因,结果表明:VvGID1-3和VvGID2转基因植株叶圆片在MS培养基上生长7d后面积都约为对照的140%;VvGID1-3和VvGID2转基因烟草种子的萌发率降低,萌发过程对0.5和1μmol/L的GA3处理表现超敏特征;内源激素水平测定结果显示VvGID1-3转基因烟草中的GA和ABA含量低于对照,VvGID2转基因植株中IAA含量高于对照;在葡萄胚性愈伤组织中分别表达VvGID1-3-GFP和VvGID2-GFP,信号均定位于细胞核中;对VvGID1-3和VvGID2的启动子进行克隆,pVvGID1-3::GUS和pVvGID2::GUS转基因烟草的染色结果表明,信号在幼嫩和快速生长的组织中最强,在成叶中主要在叶脉中表达,在不定根中的表达量很低。
- 金良葛晖陈尚武孙卉卉马会勤
- 关键词：启动子克隆
- 葡萄GA受体基因GID1初探及其在果实GA处理条件下的差异表达被引量：14
- 2011年
- 本研究通过分析在其他植物中已经确认的GA受体基因序列,对葡萄全基因组进行BLAST比对,获得了可能编码葡萄GA受体GID1的7个基因片段序列。经过聚类分析,根据其序列特征,分别设计特异性引物,以无核白鸡心葡萄(Vitis viniferaL.cv.Centennial seedless)不同组织器官为试材提取RNA,反转成cDNA-1链后,进行半定量RT-PCR,结果显示这些基因在成叶、幼叶、花序、新梢顶尖和休眠芽中存在差异表达。以30 mg/L的GA3在盛花后12 d处理无核白鸡心果穗,并于处理后1、3和7 d(果实第1次快速生长期),33 d(缓慢生长期),49 d(果实第2次快速生长期)进行采样,提取果实RNA,半定量RT-PCR结果显示除VvGID1-4和VvGID1-5外,果实中这些推测的GID1推测基因的表达水平在GA处理条件下均有上调或下调表达,推测上述研究结果为葡萄GA受体的全基因克隆与功能验证奠定了基础。
- 葛晖赵晓王增陈尚武马会勤
- 关键词：葡萄GA处理半定量RT-PCR
