丁博
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:河南省重大公益性科研项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 大鼠肝库普弗细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析被引量:2
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(partial hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心结合免疫磁珠方法分离库普弗细胞(Kupffer cell,KC),用外胚层发育不良抗原2(ectodermal dysplasia antigen2,ED2)和溶菌酶(lysozyme,LYZ)的免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的库普弗细胞,用RT-PCR定量库普弗细胞的ED2和LYZmRNA,用蛋白免疫印迹方法定量库普弗细胞的ED2和LYZ蛋白.初步证实,分离的肝库普弗细胞中ED2和LYZ阳性细胞占96%以上,从PH后各时间点分离的库普弗细胞ED2和LYZmRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离库普弗细胞方法具有收率和纯度高、活性好等优点,值得采用.
- 丁博王磊谢来峰樊晋宇徐存拴
- 关键词:库普弗细胞免疫磁珠标记蛋白
- 大鼠肝硬化与肝再生的基因表达谱比较分析被引量:1
- 2012年
- 目的了解肝硬化(LC)与肝再生(LR)的相关性。方法取成年SD雄性大鼠24只,每组6只,用CCl4诱导方法建立大鼠LC模型;将114只SD雄性大鼠随机分为19组,包括9个部分肝切除组,9个假手术组和1个正常对照组,用2/3肝切除手术建立LR模型。用大鼠全基因组表达谱芯片Genome 230 2.0检测大鼠LC发生与大鼠LR中肝组织的基因表达谱,用生物信息学和系统生物学等方法分析基因表达谱预示的生理活动的异同,并用定量PCR证明芯片检测结果的可靠性。结果 LC发生中304个基因和LR中948个基因发生了有意义表达变化,其中121个基因为两者共有,183个基因为LC特有,827个基因为LR特有。H-clustering分析表明,LC和LR的生理活动未显示时间上的相关性。K-means聚类分析显示,LC和LR的C1~C5组基因表达趋势相似,C6组相反,但LR的变化更为丰富。应用基因本体论(GO)分类和功能聚类分析发现,在LC和LR中,免疫反应、炎症反应、细胞迁移、细胞黏附等生理活动增强,各种物质代谢活动减弱。其中,LC的刺激反应在C2强于肝再生,在C6弱于肝再生,而DNA修复、细胞增殖、脂类代谢、内环境稳态和氧化应激等均弱于肝再生。结论 LC与LR的基因表达变化和生理活动有共同方面,也有差异之处。
- 秦志华丁博王改平樊晋宇杨军英徐存拴
- 关键词:肝硬化肝再生GENOME荧光定量PCR基因表达谱