田丽春
- 作品数：2 被引量：13H指数：2
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- 发文基金：武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 密码子优化的植酸酶基因appA-P在毕赤酵母中的高效表达被引量：10
- 2007年
- 根据毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子使用偏爱性,对Escherichia coli来源的高比活植酸酶基因（appA）全面地进行密码子优化,人工合成了植酸酶基因（appA-P）,并将该基因克隆到毕赤酵母诱导型分泌表达载体pHBM905A上,获得重组质粒pHBM905A-appA-P,通过PEG1000转化法将线性化的重组质粒转化毕赤酵母GS115菌株,筛选得到一个高效表达植酸酶的重组菌株GS115-appA-P,在25℃摇瓶培养168 h后酶活力达到422 U/mL,该植酸酶最适反应温度为60℃,最适反应pH为4.5,在20-50℃、pH1.0-6.0范围内较稳定.
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- 关键词：毕赤酵母密码子优化
- 一种快捷可靠的大肠杆菌重组质粒筛选方法被引量：3
- 2008年
- 针对如何大规模地筛选大肠杆菌重组子,将质粒快检和菌落PCR两种方法巧妙地融合,建立一种新的高效快捷的重组质粒筛选方法.该方法不需接种抽取质粒,在转化子长出当天即可筛选到重组质粒.大规模基因克隆表明该方法能够快速、准确地筛选出阳性克隆.
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- 关键词：重组质粒菌落PCR
