李雅琪
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：河北医科大学第四医院更多>>
- 发文基金：河北省科技计划项目国家自然科学基金河北省科学技术研究与发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IFN-λ真核表达载体的建立及其表达产物的生物学功能评估被引量：2
- 2015年
- 目的构建IFN-λ真核表达体系,检测IFN-λ基因在真核细胞中的表达,评估真核细胞表达IFN-λ的抗增殖和抗病毒生物学作用。方法从poly I∶C刺激的Hu H-7细胞mRNA中克隆IFN-λ1/2基因全长,并进行DNA基因测序;构建pc DNA3-IFN-λ1/2质粒,酶切鉴定,并将其转染COS-7细胞,应用Western印迹检测IFN-λ1/2在COS-7细胞中的表达。COS-7细胞表达的IFN-λ1/2作用于人食管癌YES5和T.Tn细胞株,CCK-8法检测癌细胞增殖,Western印迹检测凋亡蛋白caspase-3的活化,实时荧光定量PCR检测ISG15及Mx A抗病毒基因表达。结果经PCR、DNA测序和酶切鉴定,克隆的IFN-λ1/2基因与Gen Bank公布的序列一致,IFN-λ1/2基因序列正确构建入pc DNA3载体中;在pc DNA3-IFN-λ1/2转染的COS-7细胞中检测到IFN-λ1/2蛋白表达;其表达产物可诱导食管癌细胞增殖抑制、活化凋亡蛋白caspase-3,并且上调抗病毒ISG15及Mx A基因。结论建立了IFN-λ真核表达体系,即通过pc DNA3-IFN-λ1/2转染COS-7细胞实现了IFN-λ表达;经此体系表达的IFN-λ具有抗增殖、诱导凋亡及上调抗病毒基因表达的生物学作用;此体系的建立为IFN-λ的生物学功能研究和临床应用奠定了基础。
- 李竞齐义新房桂英李雅琪周慧敏刘文宣胡洁李全海
- 关键词：真核表达抗增殖抗病毒
