郭慧芳
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
- 供职机构：河北师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学农业科学更多>>
- 荧光蛋白MiCy、Citrine作为FRET传能对的研究
- 2009年
- 探索了2种新型荧光蛋白MiCy、Citrine作为荧光共振能量转移技术(FRET)传能对的可能性。首先通过基因工程方法表达纯化了这2种蛋白,并对其进行了光谱学研究,由于MiCy具有高的量子产率,且MiCy与Citrine的光谱重叠积分J较大,计算表明MiCy与Citrine的Frster距离为R0=5.81nm,比CFP-YFP的大(R0=5nm)。进一步以Ni2+-NTA-agarose为FRET模型,结果表明:无论在荧光分光光度计还是在激光共聚焦显微镜上,都可以明显地检测到MiCy与Citrine的能量转移。由于二者较文献报道的其它FRET对具有更大的Frster距离,而且更适合以激光作为激发光进行测量,因此该FRET对应有更加广泛的应用前景。
- 刘德龙王晓静郭慧芳白娟孙大业
- 关键词：绿色荧光蛋白荧光共振能量转移
- 绿色荧光蛋白为传能对的供体光漂白法测定FRET效率的探讨被引量：2
- 2008年
- 探讨以两种新荧光蛋白MiCy,mKo为传能对并应用供体光漂白法测量荧光共振能量转移(FRET)效率。首先通过基因工程方法表达纯化了这两种蛋白,并测量了荧光光谱及光漂白性质,表明MiCy极易光漂白而mKo抗光漂白。进一步以Ni-NTA-agarose为FRET模型,在Confocal上对MiCy进行光漂白时间常数的测量,并计算了FRET效率。结果表明MiCy-mKo传能对适合用供体光漂白法测量FRET效率,此传能对将在蛋白质相互作用研究中有广泛应用。
- 周晓娟郭慧芳刘德龙孙大业
- 关键词：绿色荧光蛋白荧光共振能量转移
- 用绿色荧光蛋白为传能对的供体光漂白法测定FRET效率
- ＜正＞生物分子通过组装成分子机器而在细胞中发挥功能。鉴定和表征蛋白质相互作用能够提供生命运动的分子水平直观图像。分子问FRET技术是实时探测蛋白质相互作用的有效方法。目前测量FRET的技术主要有:双通道比值法、三组滤光片...
- 刘德龙周晓娟郭慧芳白娟孙大业
- 文献传递
- FRET探测活细胞中蛋白质相互作用的进展
- 刘德龙郭慧芳白娟孙大业
- 关键词：FRET蛋白质相互作用GFP
- 文献传递
- 钙调素与重金属Pb^(2+)结合反应的方波极谱与循环伏安法研究被引量：3
- 2009年
- 采用方波极谱法研究了重金属Pb2+与钙调素(CaM)的结合反应,直接检测到Pb2+-CaM配合物的存在,并进一步利用循环伏安法研究了Pb2+-CaM的电极反应.在pH=6.5时,用方波极谱法在Pb2+-CaM体系中检测出2个还原峰,峰电位分别为-0.44^-0.47 V和-0.73^-0.77 V,说明在Pb2+-CaM体系中铅有2种存在形式,-0.44^-0.47 V的还原峰对应于游离态Pb2+,电位更负的还原峰对应于配合物[Pb2+-CaM].2个还原峰的峰电流均随着cPb2+/cCaM比值增大而增大;至cPb2+/cCaM≥10后,配合物[Pb2+-CaM]的峰电流基本不再变化,而游离态Pb2+的峰电流则继续增大.利用极谱滴定曲线的拐点可判断出Pb2+在CaM中有10个结合位点.进一步的测量结果表明,循环伏安曲线出现游离态Pb2+的氧化峰和还原峰,而络合态的[Pb2+-CaM]只有其还原峰,反向电压扫描时不出现阳极波,即没有相对应的氧化峰出现.
- 刘德龙吴彦环郭慧芳白娟孙大业
- 关键词：钙调素结合位点方波极谱法循环伏安法
- 新荧光蛋白micy-mko作为FRET传能对的探讨
- 随着后基因组时代的到来,蛋白质相互作用的重要性已越显突出。复制,转录,翻译,信号转导, 蛋白折叠及蛋白降解等过程均是通过蛋白质复合物或分子机器来完成的。鉴定和表征蛋白质相互作用及完整的相互作用网络(相互作用组,inter...
- 刘德龙郭慧芳王晓静白娟孙大业
- 文献传递
