李贵才
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 供职机构:新疆医科大学第五附属医院更多>>
- 发文基金:新疆医科大学科研创新基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 以EdU体外标记人脐带间充质干细胞:5,10μmol/L是其最适浓度被引量:1
- 2015年
- 背景:Ed U为新一代细胞核标记物,目前对此标记的研究较少。目的:采取Ed U标记人脐带间充质干细胞,筛选出Ed U标记人脐带间充质干细胞的最适浓度。方法:采用组织块法分离、纯化及传代培养人脐带间充质干细胞,倒置显微镜观察其形态及生长情况,流式细胞仪鉴定细胞表面标志物,并进行成脂诱导分化能力鉴定。分别采用5,10,20,50,100μmol/L浓度的Ed U标记脐带间充质干细胞24 h,选择标记率最高的优化浓度,绘制细胞增殖曲线。结果与结论:倒置显微镜下观察细胞为贴壁生长,形态为长梭形,且EdU标记后的细胞形态与其一致,流式细胞仪检测CD44呈阳性表达,成脂诱导后具有向脂肪细胞分化的能力。5,10μmol/L Ed U的标记率最高,两种浓度标记的人脐带间充质干细胞生长曲线未见明显差异,故5,10μmol/L是体外标记人脐带间充质干细胞的最适浓度。
- 王武张飞李贵才齐宝军武忠炎曹鹏
- 关键词:干细胞细胞示踪脐带间充质干细胞EDU组织块法
- 人脐带间充质干细胞生物特性比较:胰酶冷消化和组织块法体外培养被引量:4
- 2014年
- 背景:以往采用胰酶冷消化法培养脐带间充质干细胞的研究较少。目的:比较两种方法体外培养人脐带间充质干细胞的生物学特性。方法:采用胰酶冷消化法和组织块法从人脐带中分离、纯化和传代培养人脐带间充质干细胞,记录首次出现贴壁细胞时间及原代培养周期,倒置相差显微镜观察脐带间充质干细胞的形态及生长情况,制作第3代脐带间充质干细胞生长曲线,流式细胞仪分析检测第3代脐带间充质干细胞表面标志的表达,第3代脐带间充质干细胞加入成神经诱导培养基诱导分化第3天行荧光免疫化学染色检测Nestin的表达。结果与结论:使用上述两种方法均可获得脐带间充质干细胞,胰酶冷消化法首次出现贴壁细胞时间早于组织块法(P<0.05);原代培养周期差异无显著性意义(P>0.05)。倒置相差显微镜下细胞均为贴壁生长,形态为成纤维细胞样,但胰酶冷消化法培养的少数原代细胞呈多角形,不规则,细胞的体积较组织块法大。组织块法获得第3代细胞的增殖速率显著快于胰酶冷消化法,在进入对数生长期后各个时间点细胞数量差异有显著性意义(P<0.05)。两种细胞具有均一的细胞表型,均表达CD29,CD105,不表达CD34,CD45。两种方法培养出来的第3代脐带间充质干细胞经诱导后,免疫荧光均显示神经干细胞特征性标志物nestin阳性表达。结果表明胰酶冷消化法与组织块法均能培养出脐带间充质干细胞,但组织块法更适合于此类细胞的培养,对细胞的伤害更低。
- 张飞王一雄武忠炎李贵才曹鹏王武
- 关键词:干细胞组织块法脐带间充质干细胞