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张谷青
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
沈阳药科大学
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相关领域:
生物学
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合作作者
陈微微
军事医学科学院生物工程研究所
张惟材
军事医学科学院生物工程研究所
汪建华
军事医学科学院生物工程研究所
熊向华
军事医学科学院生物工程研究所
游松
沈阳药科大学
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军事医学科学...
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沈阳药科大学
作者
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游松
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张谷青
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生物技术通讯
年份
1篇
2012
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酮古龙酸菌山梨酮脱氢酶的原核表达及活性鉴定
被引量:1
2012年
目的:克隆酮古龙酸菌Y25的山梨酮脱氢酶基因sndh2,在大肠杆菌中进行表达,并检测表达产物的活性。方法:以酮古龙酸菌Y25基因组DNA为模板,PCR扩增sndh2基因,连接到pET22b表达载体后转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达;对菌体裂解液进行SDS-PAGE分析;以D-木糖为底物,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后活性染色及DCIP检测法鉴定表达产物的脱氢酶活性。结果:扩增得到1290 bp的山梨酮脱氢酶基因;构建了表达质粒pET22b-sndh2,SDS-PAGE结果显示获得相对分子质量为43.1×103的可溶性表达产物;非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳胶上出现的蓝黑色条带及DCIP检测液颜色的变化说明表达产物在以D-木糖为底物时表现出脱氢酶活性。结论:在大肠杆菌中表达的山梨酮脱氢酶具有生物活性。
张谷青
陈微微
熊向华
汪建华
游松
张惟材
关键词:
原核表达
活性电泳
生物活性
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