周赛
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：北京农学院动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 柔嫩艾美耳球虫MIC4-N的真核表达被引量：4
- 2011年
- 应用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫的MIC4-N端基因并去掉信号肽,为了表达检测和纯化的方便,设计引物时改变了3'端的终止密码子,使MIC4-N的C末端带有c-myc和6His抗原标签。通过双酶切,使加工好的MIC4-N基因连接到毕赤酵母表达载体pPICZαA上,转化JM109感受态细胞。再经EcoRⅠ与NotⅠ双酶切、菌落PCR及测序鉴定,证明目的基因与真核表达载体pPICZαA构建成功,单酶切重组表达载体、电转转入GS115酵母感受态细胞中。用含高浓度Zeocin的YPD平板筛选酵母菌落,菌落PCR法鉴定转化成功的阳性菌,在BMMY培养基中摇瓶培养,并用甲醇诱导,经SDS-PAGE及Western Blot鉴定,蛋白分泌表达成功。
- 王卫婷姚鹏周赛王黎霞安健
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫
- 鸡球虫EtMIC4-N重组蛋白AbISCO^(■)-100疫苗免疫效果被引量：2
- 2013年
- 为了研究鸡球虫EtMIC4-N重组蛋白AbISCO-100疫苗免疫效果,将320只鸡分为8组,用真核表达的EtMIC4-N融合蛋白以1,5,10μg三种剂量单独免疫以及该三种剂量蛋白分别与50μg AbISCO-100佐剂结合后进行免疫,设非感染非免疫组和感染非免疫组作为对照。鸡只7日龄时腿部肌肉注射进行首次免疫,14日龄时每组随机取12只,分离盲肠淋巴细胞,标记特异性抗体,用流式细胞术检测CD4+T,CD8+T细胞分别占盲肠淋巴细胞的百分比,剩余鸡按一免相同的量进行二免。21日龄时每组随机取12只,分离盲肠淋巴细胞,剩余鸡经口感染Eimeria tenella河北野毒株8×104个卵囊(非感染非免疫组除外),称重。攻虫后7d,称重,盲肠病变计分,并计算卵囊下降率。结果表明:与其余各组相比,10μg蛋白+佐剂组CD4+T、CD8+T淋巴细胞百分率显著升高(P<0.05);与感染非免疫组相比,10μg蛋白+50μg佐剂组增重显著升高(P<0.05),病变计分、OPG值显著降低(P<0.05)。说明10μg蛋白+50μg AbISCO-100组抵抗球虫感染的效果最好。
- 周赛王黎霞张莹刘新月张成坤张建军安健
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫免疫保护
