孙鹤
- 作品数:8 被引量:9H指数:2
- 供职机构:大连海洋大学更多>>
- 发文基金:国家海洋公益性行业科研专项大连市科技计划项目辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 鱼类部分白介素研究进展被引量:2
- 2017年
- 白介素是一种由免疫细胞分泌的,能够参与多种细胞间相互作用,增强机体免疫的细胞因子。近年来为了满足市场需求,渔业养殖密度大、品种多,导致病害发生频率逐年升高。为了避免抗生素等药物投放对水环境和食品安全的影响,学者们将目光放在了增强鱼体自身免疫及天然免疫蛋白产品上。本文综述了三种重要白介素在鱼类方面的研究进展,以期为鱼类健康养殖奠定基础。
- 孙鹤臧林王秀利
- 关键词:鱼类白介素1白介素2白介素15
- 真核表达制备重组红鳍东方鲀白介素2蛋白的基因及方法
- 本发明公开一种可高效表达且表达产物具有明显生物学活性的真核表达制备重组红鳍东方鲀白介素2的基因及制备方法,依次按照如下步骤进行:将SEQ ID NO:1所示的基因克隆入原核表达载体pPICZαA上,构建真核表达质粒pPI...
- 王秀利孙鹤李慧孔德荣刘海映仇雪梅
- 文献传递
- 红鳍东方鲀白介素15的原核表达及其活性测定被引量:2
- 2015年
- 为了开发红鳍东方鲀Takifugu rubripes免疫基因及其重组表达,生产重组免疫因子蛋白,通过提取红鳍东方鲀肾脏组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到白介素15(interleukin15,IL15)基因序列,将IL15成熟肽序列与原核表达载体p ET-32a(+)连接,成功构建重组表达载体(重组子)p ET-32a(+)-IL15,并将其重组子转化至Escheria coli BL21(DE3)感受态细胞中获得重组表达IL15的基因工程菌,再经IPTG诱导,p ET-32a(+)-IL15在BL21中得到了融合表达。结果表明:通过对表达产物的纯化和Western Blotting检测,红鳍东方鲀IL15在大肠杆菌中的表达量较高,蛋白浓度为294.6μg/m L;用MTT法对该蛋白进行活性鉴定显示,加入稀释10倍和100倍的重组红鳍东方鲀IL15蛋白时,CTLL-2细胞的增殖率相对较高,分别为71%和73%。研究表明,重组红鳍东方鲀IL15蛋白具有体外促进CTLL-2细胞增值的能力。
- 孙赛红马普李慧孙鹤孔德荣李凤华仇雪梅姜志强刘海映刘圣聪王秀利
- 关键词:红鳍东方鲀白介素-15原核表达活性鉴定
- 刺参C型凝集素(AJL)基因的克隆及原核表达分析被引量:3
- 2015年
- 为了开发海参免疫基因,生产重组免疫因子蛋白,利用cDNA末端快速扩增技术(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)获得了刺参凝集素基因(Apostichopus japonicus Lectin,AJL)的编码区序列(Coding sequence,CDS),CDS的长度为492 bp,编码163个氨基酸,其中成熟肽由143个氨基酸组成。将成熟肽的基因克隆并连接至载体p ET-32a(+)中,成功构建了原核表达的重组体p ET-32a(+)-AJL,进一步将重组体转化至大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,经诱导表达、分离纯化,获得了融合表达蛋白。本研究结果为进一步研究重组刺参C型凝集素在刺参健康养殖上的应用奠定了基础。
- 薛壮李慧孙鹤孔德荣马普周玮仇雪梅刘洋王秀利
- 关键词:刺参凝集素基因克隆原核表达
- 红鳍东方鲀IL-2基因的重组表达及其免疫应答的研究
- 红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)是重要海水养殖优良鱼种之一,由于肉嫩、味鲜、营养好深受国内外消费者的喜爱。近年来,红鳍东方鲀养殖规模及养殖密度逐步扩大,导致鱼类的发病几率随之增大。目前,用抗生素来治疗疾病...
- 孙鹤
- 关键词:红鳍东方鲀海水养殖活性鉴定免疫应答
- 文献传递
- 红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)干扰素调节因子2基因的克隆及原核表达
- 2016年
- 干扰素调节因子(Interferon regulatory factor,IRF)是一种多功能的转录因子。采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了红鳍东方鲀干扰素调节因子2(Interferon regulatory factor 2,IRF2)基因的全长c DNA。该基因全长为1 552 bp,其中5'非编码区(5'-UTR)187 bp,3'非编码区(3'-UTR)429 bp,编码区(CDS)为936 bp,共编码311个氨基酸。将IRF2的编码区序列连接到原核表达载体p ET32a(+),成功构建了重组体p ET32a(+)-IRF2。将重组体p ET32a(+)-IRF2转入大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,获得了重组表达IRF2的基因工程菌。经IPTG诱导,p ET32a(+)-IRF2在BL21中得到了融合表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测,结果显示红鳍东方鲀IRF2基因在大肠杆菌中的表达效果较高,目的蛋白准确。
- 孙赛红马普孙鹤孔德荣李慧仇雪梅姜志强刘海映刘洋刘圣聪孟雪松王秀利
- 关键词:红鳍东方鲀原核表达
- 制备重组红鳍东方鲀IFN‑γ蛋白的基因及方法
- 本发明公开一种制备重组红鳍东方鲀IFN‑γ蛋白的基因及方法,所述基因的DNA序列如SEQ ID NO:1所示。方法依次按照如下步骤进行:将DNA序列如SEQ ID NO:1所示的基因克隆入真核表达质粒pPICZαA上,得...
- 王秀利孔德荣李慧孙鹤刘海映仇雪梅
- 文献传递
- 制备重组红鳍东方鲀白介素2蛋白的基因及方法
- 本发明公开一种可高效表达且表达产物具有明显生物学活性的制备重组红鳍东方鲀白介素2的基因及制备方法,方法依次按照如下步骤进行:将SEQ ID NO:1所示的基因克隆入原核表达载体pET‑32a上,构建原核表达质粒;将原核表...
- 王秀利孙鹤李慧孔德荣刘海映仇雪梅
- 文献传递