杨南飞
- 作品数:17 被引量:1H指数:1
- 供职机构:南京大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 一种稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP-SP2/0细胞株及其构建方法
- 本发明构建了一种稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP‑SP2/0细胞株,该细胞株的构建过程:利用Lipofectamine 2000完成病毒包装,293T细胞完成病毒的扩增,用扩增的病毒转染SP2/0,嘌呤霉素筛选经病毒感染的...
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- 间充质干细胞联合TPO及其类似物在治疗慢性髓性白血病中的应用
- 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种脐带来源间充质干细胞联合TPO及其类似物在制备治疗慢性髓性白血病中的应用。本发明提供的间充质干细胞为人来源的脐带间充质干细胞(UC‑MSCs),在联合TPO类似物Eltrombop...
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- 一种提高间充质干细胞促进急性髓系白血病分化能力的诱导方法
- 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种提高间充质干细胞促进急性髓系白血病细胞分化能力的诱导方法的应用。本发明提供的间充质干细胞为人来源的脐带间充质干细胞(UC‑MSCs),在经过细胞因子骨形成蛋白6(BMP6)预处理活...
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- 一种增强抗肿瘤免疫功能的双效组合纳米体系
- 本发明提供了一种双效组合纳米体系及其在增强抗肿瘤免疫功能中的应用。该双效组合纳米体系不同于只具备载氧能力的全氟化碳类纳米颗粒,其在递送氧气的同时还可以释放包裹的PCB别构激活剂/别构激活剂前体。通过干预肿瘤相关巨噬细胞中...
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- 间充质干细胞联合TPO及其类似物在治疗慢性髓性白血病中的应用
- 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种脐带来源间充质干细胞联合TPO及其类似物在制备治疗慢性髓性白血病中的应用。本发明提供的间充质干细胞为人来源的脐带间充质干细胞(UC‑MSCs),在联合TPO类似物Eltrombop...
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- 一种提高间充质干细胞促进急性髓系白血病细胞分化能力的诱导方法
- 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种提高间充质干细胞促进急性髓系白血病细胞分化能力的诱导方法的应用。本发明提供的间充质干细胞为人来源的脐带间充质干细胞(UC‑MSCs),在经过细胞因子骨形成蛋白6(BMP6)预处理活...
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- PPARγ第166位苏氨酸磷酸化修饰单克隆抗体的制备方法及应用
- 本发明属于抗体制备的生物检测技术领域,涉及PPARγ第166位苏氨酸磷酸化修饰单克隆抗体及其制备方法和应用。所述的制备方法为使用磷酸化标记的抗原肽段偶连与KLH蛋白,形成免疫用抗原,通过免疫小鼠、生产杂交瘤细胞以及抗体亲...
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- Pparg基因定点突变小鼠模型的构建与应用
- 本发明属于基因工程技术领域,涉及两种Pparg基因定点突变小鼠模型的构建和应用。本发明运用CRISPR/Cas9基因编辑技术,对Pparg基因的编码第166位苏氨酸的位置进行人工突变,并以此成功制作了两种定点突变小鼠品系...
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- Nrf2过表达与敲减Hep1-6稳转细胞株的建立被引量:1
- 2016年
- 核因子NF-E2相关因子2(Nrf2)是治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)的一个重要靶点分子。为了从体外研究小分子通过靶向Nrf2改善NAFLD的分子机制,首先PCR克隆鼠源Nrf2基因至p Lenti6/V5-D-TOPO空载体得到重组载体p Lenti6/V5-Nrf2,通过测序、酶切鉴定正确后,扩繁质粒,制备慢病毒并将其感染Hep1-6肝癌细胞,用稻瘟醇胚素筛选、鉴定获得稳定表达Nrf2的细胞株。同时,用Nrf2干扰质粒构建慢病毒感染Hep1-6肝癌细胞,通过嘌呤霉素筛选、鉴定Nrf2敲减的细胞株。Q-PCR检测结果显示,过表达稳转株(p Lenti6/V5-Nrf2)中Nrf2基因的表达量为对照组(p Lenti6/V5-Lac Z)的4倍,敲减稳转株中Nrf2基因的表达量大幅度降低。Western blotting显示过表达稳转株的Nrf2表达量明显高于对照组,敲减稳转株的Nrf2表达量明显低于对照稳转株,此结果与Q-PCR结果一致。所克隆的Nrf2基因和敲减基因在Hep1-6小鼠肝癌细胞中得到了正确转录和翻译,稳转细胞株构建成功。
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- 关键词:定量PCR
- 一种核受体蛋白体外液相透析复性的方法
- 本发明属于生物技术领域的蛋白质复性方法,针对核受体蛋白的结构特性,以锌离子辅助的梯度透析复性方法,实现对全长核受体蛋白的完全复性,恢复其生物学活性。本发明根据核受体蛋白复性过程中的不同状态,优化透析复性液的组分梯度,使得...
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