陈琳琳
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
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- 决奈达隆对新生大鼠心室肌细胞HCN通道mRNA和蛋白表达的影响
- 2017年
- 目的通过检测新生大鼠心室肌细胞在给予药物决奈达隆前后超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN通道)mRNA和蛋白水平的变化,探讨决奈达隆对HCN通道表达的影响。方法分离新生SD大鼠心室肌,Ⅱ型胶原酶消化,通过差速贴壁分离法收集获得单一的心室肌细胞。并根据浓度(0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、20.0μmol/L的决奈达隆对细胞进行处理48h)和时间(浓度为10μmol/L的决奈达隆对细胞进行1、6、12、24、48h的处理)梯度分组。采用实时荧光定量PCR法和Western blot检测HCN2、HCN4通道mRNA水平和蛋白水平。结果浓度梯度组和时间梯度组的HCN2 mRNA和HCN4 mRNA表达水平均低于对照组(P<0.05);与对照组比较,10μmol/L决奈达隆处理后12h组的蛋白水平明显下调(P<0.01)。结论决奈达隆可抑制HCN2、HCN4通道mRNA和蛋白的表达,且作用呈浓度依赖性,在给药后12h达到最大作用。
- 陈琳琳范新荣李涛李光李妙龄欧贤红兰欢黄梦颖曾晓荣
- 关键词：决奈达隆超极化激活环核苷酸门控阳离子通道蛋白质类
- 一种改良的原代大鼠乳鼠心肌细胞分离及培养方法被引量：6
- 2016年
- 目的:本研究旨在探讨一种经改良后既稳定又高效的分离大鼠乳鼠心肌细胞的原代分离和培养方法,拟建立此种方法,为进一步研究单个心肌细胞上的各种电生理机制等诸多实验提供有利的前提保障。方法:取出生1-3天内SD大鼠心脏,联合应用胰蛋白酶和Ⅱ胶原酶两步消化,离心收集到心肌细胞,差速培养,加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷纯化后得到原代心肌细胞,经高糖DMEM培养,即可得到立体感较强的大鼠乳鼠心肌细胞。结果:联合应用胰蛋白酶和Ⅱ胶原酶两步消化,经过高糖DMEM培养后得到的心肌细胞存活率高、纯度高、折光性好、立体感较强,有节律性搏动。结论:成功建立了一种既简便高效又稳定的分离大鼠乳鼠心肌细胞的方法,为今后研究乳鼠心肌细胞的功能及其基本电生理特性提供良好的单个细胞,可广泛应用于各种心血管疾病的研究中。
- 程俊曾晓荣谭晓秋李鹏云文静陈琳琳杨艳
- 关键词：乳鼠心肌细胞
- 假禾谷镰孢菌细胞自噬相关基因的鉴定与表达分析被引量：2
- 2018年
- 细胞自噬是真核生物中一类包含多种进化保守的Atgs蛋白参与的蛋白质降解途径,该途径也参与多种植物病原真菌的产孢、孢子萌发和致病性过程。本研究利用模式物种已知的Atgs,通过生物信息学分析在假禾谷镰孢菌中鉴定到29个Atgs,分属29种不同蛋白类型。细胞自噬核心调控机制相关蛋白Atg1、Atg6、Atg8和Atg9的氨基酸序列系统进化分析结果显示,Atgs在丝状真菌间非常保守,符合物种进化的特点。通过假禾谷镰孢菌跟亲和与非亲和寄主转录组数据分析发现,与菌丝阶段相比26个Fp Atgs在侵染阶段的表达发生改变,其中Fp Atg1、2、3、4、5、7、8、9、13、22、23、28和Fp Vps34在侵染初期和中后期均诱导表达;Fp Atg6、14、17、20、24、29和Fp Vps15在侵染初期和中后期表达量均降低;Fp Atg10、11除在非亲和互作中后期表达量略有上调,其余阶段均显著下调表达;Fp Atg15、16在亲和互作初期诱导表达,其余阶段均下调表达;Fp Atg26、27在亲和互作初期下调表达,中后期诱导表达,而在非亲和互作初期表达量升高,到中后期下调表达。推测细胞自噬参与调控假禾谷镰孢菌的侵染过程。
- 陈琳琳陈琳琳马宇明王利民王利民施艳
- 关键词：细胞自噬基因鉴定
- 右美托咪定对乳大鼠心肌细胞线粒体活性氧和细胞凋亡的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX)对线粒体介导的乳大鼠心肌细胞氧化应激通路的作用。方法:取新生乳大鼠(3~4天)的心肌进行原代培养,培养24h后分为对照组(C组)、H_2O_2组(终浓度500μM,H组)、右美托咪定组(5μM DEX,D组)、联合用药组(500μM H_2O_2+5μM DEX,DH组)。各组细胞分别给予相应药物刺激6h,采用流式细胞仪测定活性氧自由基(Reactive oxygen species,ROS)水平及心肌细胞凋亡变化;并通过ELISA法测定各组乳大鼠心肌细胞线粒体介导的凋亡因子Caspase-3,Caspase-9表达的变化。结果:与H_2O_2组相比,DEX明显抑制H_2O_2介导的乳大鼠心肌细胞的ROS水平增加(P<0.05);下调线粒体介导的下游凋亡因子Caspase-3,Caspase-9的表达(P<0.05),从而减少H_2O_2诱导的凋亡(P<0.05)。结论:右美托咪定通过抑制心肌细胞活性氧水平以及下调线粒体介导的Caspase-3和Caspase-9的表达发挥抑制凋亡作用,对心肌细胞有一定的保护作用。
- 曹露周丹李涛陈琳琳谭晓秋刘力刘雪茹
- 关键词：心肌细胞活性氧氧化应激细胞凋亡
- 异丙酚对新生大鼠心肌细胞线粒体活性氧和细胞凋亡的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨异丙酚对线粒体介导的乳大鼠心肌细胞氧化应激通路的作用。方法:取新生大鼠乳鼠(3~4 d)心肌细胞作为研究对象,实验分为对照组(C组)、H_2O_2组(终浓度500μM,H组)、异丙酚组(50μM异丙酚,P组)、同时使用H_2O_2和异丙酚组(500μM H_2O_2+50μM异丙酚,PH组)。采用流式细胞分析仪测定异丙酚对大鼠乳鼠心肌细胞ROS水平的影响,使用ELISA法测定各组心肌细胞线粒体途径介导的凋亡因子Caspase 3和Caspase 9活性变化。结果 :异丙酚对H_2O_2介导的大鼠乳鼠心肌细胞ROS水平增加具有明显的抑制作用(P<0.05)。异丙酚可明显下调线粒体途径介导的凋亡因子Caspase 9和Caspase 3的活性(P<0.01)。结论:异丙酚通过抑制心肌细胞ROS水平以及下调线粒体介导的凋亡因子Caspase 9和Caspase 3的活性发挥对心肌细胞的保护作用。
- 刘雪茹曹露范学慧李涛陈琳琳余奕言
- 关键词：异丙酚心肌细胞活性氧氧化应激细胞凋亡
