林帆
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金：山东省“泰山学者”建设工程项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种基于基因组编辑的海水鲆鲽鱼类种质构建方法及应用
- 本发明提供一种基于基因组编辑的海水鲆鲽鱼类新种质构建方法。以半滑舌鳎Dmrt1基因为例，通过构建Dmrt1基因的基因组编辑TALEN质粒，在体外转录为mRNA后转移到半滑舌鳎1‑4细胞期的受精卵动物极，将受精卵培育为成鱼...
- 陈松林崔忠凯郑汉其刘云王娜林帆王文文张宁董忠典李仰真
- 文献传递
- 异源和同源dmrt1基因过表达载体在青鳉体内的整合和表达被引量：1
- 2014年
- 利用半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)dmrt1基因和青鳉(Oryzias latipe)dmrt1基因构建过表达载体,采用显微注射技术将两种载体分别导入青鳉受精卵中,比较异源和同源dmrt1基因对青鳉胚胎孵化率的影响以及两种dmrt1基因在青鳉体内的基因整合率、基因表达率及对芳香化酶基因(cyp19a)表达的影响。结果表明,注射48 h后,两种载体均在胚胎内大量表达,注射青鳉同源性dmrt1载体的受精卵孵化率(69.5%)要显著高于注射异源性dmrt1载体的受精卵(36.5%)。30 dph(days post hatching)两组被注射稚鱼均能检测到基因整合,注射同源dmrt1的整合率(30%)要高于异源dmrt1(10%)。30 dph稚鱼体内检测不到异源性dmrt1载体的表达,但能检测到同源dmrt1载体的mRNA表达,同时芳香化酶基因的表达受到了抑制。本研究为研究舌鳎性别分化相关基因功能提供了基础,并为在模式鱼类中研究海水鱼相关基因功能累积了必要的资料。
- 李亚亚陈松林林帆王娜刘洋黄进强
- 关键词：半滑舌鳎青鳉DMRT1转基因鱼显微注射
- 半滑舌鳎vasa调控区的克隆、表达载体构建及其驱动活性检测被引量：2
- 2015年
- 为研究半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)vasa(Csvasa)基因调控区的功能,在已克隆的Csvasa基因编码序列的基础上,采用基因组步移和PCR扩增的方法克隆得到Csvasa调控区,通过生物信息学方法分析vasa基因5′区,并构建了含Csvasa基因调控区的绿色荧光蛋白(GFP)表达载体(p Csvasa-GFP-T),进一步通过显微注射技术初步验证调控区的驱动活性。结果表明,通过基因组步移和PCR扩增获得Csvasa 5′区5 166 bp和3′区1 655 bp,利用在线生物信息学软件对5′区序列进行分析,发现在转录起始点上游26 bp处存在保守的TATA框,以及潜在的转录因子结合点如SRY、Oct-1、Sox-5、CREB、GATA、AP-1、C/EBP、Sp-1、c-Myc、HNF、NKX2-5、V-Myb等。通过显微注射技术,将所构建的p Csvasa-GFP-T表达载体注射于青鳉(Oryzias latipes)受精卵并进行培养观测,发现Csvasa调控区能够驱动GFP在青鳉胚胎内表达,荧光表达率为81%。将有荧光的胚胎培养为成鱼,检测外源基因的整合率为11.5%。这些结果为进一步研究半滑舌鳎原始生殖细胞(PGCs)的标记、追踪和操作研究以及半滑舌鳎的性别控制等奠定了基础。
- 黄进强陈松林邵长伟刘洋林帆李亚亚王娜
- 关键词：半滑舌鳎显微注射
- 一种基于基因组编辑的海水鲆鲽鱼类种质构建方法及应用
- 本发明提供一种基于基因组编辑的海水鲆鲽鱼类新种质构建方法。以半滑舌鳎Dmrt1基因为例，通过构建Dmrt1基因的基因组编辑TALEN质粒，在体外转录为mRNA后转移到半滑舌鳎1-4细胞期的受精卵动物极，将受精卵培育为成鱼...
- 陈松林崔忠凯郑汉其刘云王娜林帆王文文张宁董忠典李仰真
- 文献传递
