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曾蕾

作品数:1 被引量:0H指数:0
供职机构:浙江大学医学院附属第一医院更多>>
发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达载体
  • 1篇原核表达载体...
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇融合蛋白表达
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞生长
  • 1篇细胞生长因子
  • 1篇激活剂
  • 1篇功能域
  • 1篇肝细胞
  • 1篇肝细胞生长因...

机构

  • 1篇浙江大学医学...
  • 1篇浙江大学医学...

作者

  • 1篇曹江
  • 1篇曾蕾

传媒

  • 1篇细胞与分子免...

年份

  • 1篇2006
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
HAI-1基因不同功能域的原核表达载体构建及融合蛋白表达
2006年
目的:分段克隆1型肝细胞生长因子激活剂抑制因子(HAI-1)基因的功能域并在大肠杆菌中表达,为进一步研究HAI-1的生物学功能打下基础。方法:针对HAI-1的不同功能域设计相应的5对引物,分别扩增KD1、KD1+LDLR、KD2、LDLR+KD2和KD1+LDLR+KD2片段。将PCR产物克隆至pGEM-TEasy载体中并经测序鉴定。将5个cDNA片段亚克隆至具有6个组氨酸标签(His-Tag)的原核表达载体pIVEX2.3-MCS中。以上述表达不同功能域的载体转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导融合蛋白的表达,表达产物以Westernblot进行鉴定,并进一步通过镍亲和层析柱纯化His-Tag标记的KD1+LDLR+KD2融合蛋白。结果:成功地构建了HAI-1各功能域基因片段的原核表达载体。Westernblot分析证实,在大肠杆菌BL21(DE3)中分段表达了5种HAI-1不同功能域的His-Tag融合蛋白,并通过亲和层析法纯化到了相对分子质量为22200的KD1+LDLR+KD2融合蛋白。结论:重组质粒pIVEX2.3-MCS/HAI-1能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化的融合蛋白可用于研究HAI-1不同功能域的生物学作用。
曾蕾曹江
关键词:原核表达融合蛋白
共1页<1>
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