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冯爱华
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福州大学生物科学与工程学院
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相关领域:
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合作作者
陈增
福州大学生物科学与工程学院
林娟
福州大学生物科学与工程学院
李仁宽
福州大学生物科学与工程学院
杨捷
福州大学生物科学与工程学院
叶秀云
福州大学生物科学与工程学院
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2012
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扁豆几丁质酶基因的克隆及表达
2012年
以扁豆总RNA为模板,通过RT-PCR技术扩增到长度为885 bp的扁豆几丁质酶基因cDNA,其编码294个氨基酸,目的蛋白的分子量为28.429 kDa.以该基因构建pET-21a-chi表达载体并在E.coli BL21(DE3)中表达.30℃下,用0.1 mmol.L-1IPTG,诱导5 h,表达产物的酶活力为36.25 U.mL-1.通过常压Sephadex G-50凝胶过滤色谱,DEAE-650C常压与高效离子交换色谱对表达产物进行纯化.目标蛋白达到电泳纯(SDS电泳一条带),几丁质酶的比活力108.42 U.mg-1.表达的蛋白质产物主要以可溶性形式存在.
陈增
叶秀云
李仁宽
冯爱华
林娟
杨捷
关键词:
扁豆
几丁质酶基因
克隆
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