乔可
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:复旦大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 活细胞成像技术实时追踪荧光蛋白标记的分枝杆菌的胞内增殖被引量:1
- 2014年
- 目的 利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法 用经GFP标记的野生型海分枝杆菌(Mycobacterium marinum,Mm)分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨噬细胞,使用活细胞显微成像系统连续记录胞内分枝杆菌的增殖动态,同时优化不同细胞接种浓度和感染复数(multiplicity of infection,MOI)对胞内菌增殖动态的追踪效果。结果 使用GFP标记和活细胞成像的方法可以实时追踪胞内分枝杆菌的增殖过程和形态学变化。γ干扰素对Mm在巨噬细胞中的增殖有抑制作用。当接种巨噬细胞浓度为1×105/孔,MOI为1时,可直观清晰地分析实时追踪图像中胞内菌的增殖过程。结论 通过活细胞成像技术分析荧光蛋白标记的分枝杆菌,可实时追踪巨噬细胞内分枝杆菌增殖过程和形态学变化,是一种体外分析胞内分枝杆菌增殖的理想方法,可应用于其他相关病原菌和宿主相互作用及影响因素的研究。
- 乔可王晴岚李紫煜牛辰
- 关键词:巨噬细胞活细胞成像
- 激光扫描共聚焦显微镜检测分枝杆菌与溶酶体融合的实验教学设计被引量:1
- 2015年
- 介绍了使用经绿色荧光蛋白标记的海分枝杆菌侵染巨噬细胞,再利用激光扫描共聚焦显微技术检测分枝杆菌与巨噬细胞溶酶体融合的实验教学设计。该实验对研究分枝杆菌与巨噬细胞的相互作用以及分枝杆菌的致病机制具有重要意义,同时在教学实验中使学生更深入地理解激光扫描共聚焦显微镜检测技术,并培养学生的实践能力和科研创新意识。
- 乔可王晴岚牛辰
- 关键词:激光扫描共聚焦显微镜分枝杆菌
- 高内涵筛选结合活细胞实时成像技术分析谷氨酸诱导的小鼠神经瘤母细胞N2a凋亡
- 2015年
- 目的利用高内涵筛选(high-content screening,HCS)技术结合活细胞实时成像技术研究谷氨酸诱导的小鼠神经瘤母细胞N2a凋亡的形态学变化特征。方法用HCS技术分析摸索不同浓度谷氨酸诱导的N2a细胞早期凋亡百分比的变化,同时结合活细胞实时成像技术追踪谷氨酸诱导的N2a凋亡的形态学变化特征。结果当谷氨酸浓度为750μg/mL时,发生早期凋亡的N2a细胞比例达到峰值(42.07%)。对同一谷氨酸浓度,随着拍摄追踪时间的增加,凋亡细胞数目逐渐增多,胞核荧光强度的变异系数逐渐增大,胞核面积逐渐缩小,胞核逐渐出现碎片化。结论使用HCS结合活细胞实时成像技术能直观清晰地捕捉谷氨酸诱导N2a细胞凋亡的形态学变化特征,是一种体外追踪单一细胞凋亡形态学变化的可靠方法。该方法也可应用于药物对细胞凋亡的促进或抑制作用的形态学变化特征的研究。
- 乔可崔士超胡捷先陈献华
- 关键词:谷氨酸