胡开顺
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中山大学生命科学学院水生经济动物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广州市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 斜带石斑鱼转化生长因子β1(TGF-β1)基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2011年
- 转化生长因子β1(TGF-β1)是一种高度保守的多效细胞因子。通过分子克隆得到了斜带石斑鱼Epi-nephelus coioidesTGF-β1 cDNA全长序列,全长为2 477 bp,开放阅读框为1 161 bp,编码一种含386个氨基酸的多肽。Realtim e PCR分析表明,TGF-β1基因在健康斜带石斑鱼所取组织中均有表达,肾脏中表达最高,其次是头肾和脾脏。用PolyI:C或ConA刺激斜带石斑鱼头肾淋巴细胞,TGF-β1表达量明显上升,且在刺激4 h后达到最高值。用PolyI:C刺激16、24 h后,TGF-β1几乎不表达,而用ConA刺激实验组,TGF-β1表达量一直高于对照组。结果说明,斜带石斑鱼TGF-β1基因结构和表达特征与其他硬骨鱼类具有高度相似性。
- 平海林吴金英徐胜威胡开顺段志刚
- 关键词：TGF-Β1克隆
- 大海马转化生长因子β1(TGF-β1)基因的克隆鉴定及功能研究被引量：4
- 2011年
- 转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)是一种多效应细胞因子,在免疫系统中,成熟的TGF-β1多肽是一种强有力的细胞分化调节剂和免疫调节剂。本研究通过基因克隆得到了大海马(Hippocampus kuda)TGF-β1 cDNA全长序列(GenBank登录号为HM564035),全长为1 941 bp,开放阅读框为1 161 bp,编码1种含386个氨基酸的多肽。同源性分析表明,大海马TGF-β1与斜带石斑鱼TGF-β1的亲缘关系最近。Real-time PCR结果显示,TGF-β1基因在健康大海马肾中表达量最高,其次是肝、大脑、小脑、皮肤、中脑、卵巢,在鳃和肠道中表达很少,在心脏和肌肉中检测不到表达。大海马TGF-β1重组蛋白在TNT快速偶联的转录/翻译系统中高效表达,用BS3交联后形成了大量的可溶性二聚体蛋白,Western blot检测结果显示该重组蛋白具有良好的免疫学活性。利用得到的大海马rTGF-β1刺激HeLa细胞,结果显示刺激细胞中TGF-β1下游Smad信号通路中的Smad3、Smad4基因表达量上升,Smad7基因表达量下降,表明所得到的大海马TGF-β1重组蛋白具有特定的生物活性,能够诱导人细胞中Smad信号通路的活化,延续了TGF-β1蛋白功能的保守性。
- 平海林吴金英徐胜威胡开顺段志刚
- 关键词：TGF-Β1克隆重组蛋白信号通路
