李庆雷
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 溶藻弧菌热休克蛋白70基因的克隆及序列分析被引量:2
- 2010年
- 目的通过测定溶藻弧菌热休克蛋白70(HSP70)基因序列,结合GenBank登录的其他弧菌HSP70核苷酸序列,分析溶藻弧菌HSP70特点以及与其他弧菌HSP70之间的同源性。方法根据GenBank中同类蛋白序列设计特异PCR引物,首次从溶藻弧菌中扩增热休克蛋白70ORF全长基因片段,并对该片段进行克隆、测序和分析。结果扩增的溶藻弧菌HSP70ORF全长基因片段长1914bp,与已登录的其他弧菌的同源性在90.4%~96.2%之间,包含完整的HSP70ORF,编码637个氨基酸。与GenBank中其他弧菌HSP70的氨基酸序列比较,溶藻弧菌HSP70含有Dnak特征基序DLGTT-S-V(8-16残基);整个分子的保守性N端最高,到C端保守性降低。结论溶藻弧菌与哈维弧菌(Vibrioharveyi)热休克蛋白70有较高同源性,该热休克蛋白70属于Dnak类型。
- 万文菊于爱莲刘含亮李庆雷张忠王纪亭杨春贵宋光乐
- 关键词:热休克蛋白70溶藻弧菌基因克隆
- 溶藻弧菌热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定
- 2011年
- 目的构建溶藻弧菌热休克蛋白70(HSP70)真核表达载体pcDNA3.1。方法提取溶藻弧菌基因组DNA,PCR扩增HSP70基因片段,克隆至TA载体,通过PCR、酶切及测序鉴定后,将HSP70基因片段用限制性内切酶切下,克隆至真核表达载体pcDNA3.1,构建pcDNA3.1重组质粒,通过PCR、酶切及序列分析对HSP70基因pcDNA3.1重组质粒进行鉴定。结果扩增出1 914bp的溶藻弧菌HSP70基因片段,并成功构建溶藻弧菌HSP70真核表达载体pcDNA3.1。结论成功构建了溶藻弧菌HSP70真核表达载体pcDNA3.1,为HSP70基因疫苗研制奠定了基础。
- 刘含亮孙敏敏王红卫李庆雷杨春贵高红莉万文菊王纪亭
- 关键词:溶藻弧菌热休克蛋白70真核表达载体基因疫苗