刘振卫
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：广州呼吸疾病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省教育厅资助项目黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 人7型腺病毒的分离与鉴定被引量：6
- 2014年
- 目的对哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本进行检测、分离鉴定和分型。方法应用直接免疫荧光法对标本进行初步筛检,将筛检得到的腺病毒阳性标本接种到A549细胞进行病毒培养,并用空斑法进行纯化。采用PCR技术扩增腺病毒五邻体、六邻体基因,将扩增的PCR产物进行基因测序,并将测序结果 BLAST比对,初步判断其型别。结果从采集的标本中分离到1株人腺病毒毒株。BLAST比对五邻体、六邻体测序结果,表明该毒株与人7型腺病毒五邻体、六邻体的同源性为100%,初步判定该毒株为人7型腺病毒。结论从哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本中分离到1株人7型腺病毒。
- 杨金峰商蕾董妥齐桂云王迎晨高虹刘振卫于惠崧郭微媛曲章义
- 关键词：直接免疫荧光腺病毒病毒培养
- 人腺病毒55型六邻体蛋白同源建模及B细胞抗原表位预测被引量：1
- 2015年
- 目的预测人腺病毒55型六邻体蛋白B细胞抗原表位。方法使用DNAStar软件Protean模块,PSIPRED在线服务器和SWISS-MODEL在线服务器联合预测人腺病毒55型六邻体蛋白B细胞抗原表位。结果构建了人腺病毒55型六邻体蛋白三级结构模型和预测得到5个候选的人腺病毒55型六邻体抗原表位。结论成功预测人腺病毒55型六邻体蛋白B细胞抗原表位,为进一步研制疫苗和检测试剂奠定了基础。
- 刘振卫曲章义商蕾高虹王迎晨董妥杨金峰于惠崧
- 关键词：B细胞抗原表位同源建模
- 稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白细胞的构建
- 2017年
- 获得稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞株。采用RT-PCR方法扩增乙型流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建pcDNA3.1(+)-HA重组质粒。将已鉴定正确的pcDNA3.1(+)-HA质粒与辅助质粒PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro通过脂质体介导法共转染HEK293细胞,经嘌呤霉素筛选后得到重组细胞株HEK293-HA,通过流式细胞术法(FCM)来检测细胞中HA的表达情况。所得到的重组细胞经扩大培养后再连续培养15代,采用间接免疫荧光法(IFA)和蛋白免疫印迹法(WB)来检测HA蛋白表达的稳定性。结果表明重组质粒pcDNA3.1(+)-HA经双酶切及测序鉴定正确;共获得3株高表达阳性细胞株。细胞扩大培养后连续传代培养15代后进行Western blot和IFA检测结果表明,重组细胞的HA蛋白得到稳定的表达。已成功获得了能稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞,可为乙型流感病毒HA蛋白的进一步研究提供良好的基础。
- 黄文波刘振卫周荣李潇曾军李小锋苏晓波
- 关键词：乙型流感病毒细胞株
