高品
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:海南大学海洋学院海南省热带水生生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金:海洋公益性行业科研专项国家教育部博士点基金国家海洋公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:天文地球农业科学更多>>
- 磷酸根对海洋克雷伯氏菌合成1,3-丙二醇代谢的影响被引量:2
- 2015年
- 海洋克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae HSL4是一株分离于海洋沉积物环境的用于发酵生产1,3-丙二醇(1,3-propanediol,1,3-PDO)的优良菌株。K.pneumoniae HSL4发酵生产1,3-PDO的培养基包含多种营养因子,其中磷酸根对发酵过程影响较大。利用5L发酵罐进行补料发酵实验,分别考察培养基中低磷(1.6×10–4mol·L–1 PO43–)和高磷(5.0×10–3mol·L–1 PO43–)浓度条件下K.pneumoniae HSL4发酵生产1,3-PDO过程中细胞生长、1,3-PDO及多种副产物生成的规律,分析初始磷酸根浓度差异对K.pneumoniae HSL4不同发酵阶段代谢流分布的影响。结果表明,培养基中高、低初始磷酸根浓度条件下,1,3-PDO的终浓度均在75g·L–1左右。在低磷条件下,底物甘油消耗量较少,具有较高的1,3-PDO转化率;除2,3-丁二醇外,其他副产物在发酵液中的积累均小于高磷条件下副产物的积累。高磷条件促进乙酸、乙醇、乳酸等副产物生成,改变中、后期发酵环境,增加下游分离提取1,3-PDO的压力。根据高、低初始磷酸根浓度条件下菌体生物量、产物、副产物合成的差异,对细菌4个发酵时期(延滞期、对数生长期、平台期和衰亡期)的代谢流分布及其变化进行了分析。研究结果可以为合理配比培养基中磷酸盐浓度、进行发酵生产1,3-PDO过程控制与代谢调控提供理论依据。
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- 关键词:磷酸根发酵1,3-丙二醇代谢流分析
- 斜带石斑鱼PKR基因的克隆表达及亚细胞定位分析被引量:1
- 2016年
- 根据实验室前期获得的斜带石斑鱼PKR基因的全长c DNA,对其原核表达、组织分布及亚细胞定位进行了研究分析。结果表明,斜带石斑鱼PKR基因c DNA全长为2 151 bp,其中ORF区为1 863 bp,编码621个氨基酸,表达蛋白的分子质量大小为70 157.15 Da,PI为5.72。通过NCBI网站上BLAST软件比对发现,斜带石斑鱼PKR与其他物种的PKR高度同源。通过构建原核表达载体PKR-p ET-32a,获得了斜带石斑鱼PKR的融合蛋白,经纯化后制备了斜带石斑鱼PKR鼠抗血清。利用荧光定量PCR对斜带石斑鱼PKR基因组织分布研究表明,该基因在所有检测组织中均有表达,其中肠的表达量最高,头肾次之。以荧光显微镜对其亚细胞定位进行了分析,该基因为全细胞分布,但主要分布于细胞质中。
- 高品魏京广许濛陈秀丽秦启伟周永灿
- 关键词:斜带石斑鱼克隆表达亚细胞定位