毕薇
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:云南大学更多>>
- 发文基金:云南省应用基础研究基金云南省烟草专卖局(公司)科技项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 长柄链格孢AlCyP1基因的克隆及其在渗透胁迫适应中的作用被引量:2
- 2011年
- 为了阐明烟草赤星病(tobaccobrown-spotdisease)病原真菌长柄链格孢(Alternarialongipes)对二甲酰亚胺类杀菌剂抗性的分子机制,以不同抗性水平的长柄链格孢菌株为实验材料,通过基因钓鱼(GeneFishing)技术进行基因差异表达分析;并利用基因敲除技术对已克隆到的AlCyP1基因进行功能分析.结果表明:一个亲环蛋白基因AlCyP1的表达量在不同抗性水平的长柄链格孢中存在明显差异;应用DNA步移(DNAwalking)方法克隆得到AlCyP1基因的DNA序列,其开放阅读框中存在2个翻译起始密码子,可以编码产生2种不同长度的多肽,长、短多肽产物分别具有222和188个氨基酸,其中短多肽起始于长多肽的第35个密码子;另外,氨基酸序列同源性分析发现,AlCyP1和其他真菌的亲环蛋白具有很高的同源性,达50.0%~61.3%;利用基因敲除技术对AlCyP1基因进行功能分析发现,该基因通过表达水平的改变参与了长柄链格孢对渗透胁迫的适应调节过程.
- 罗义勇祝明亮路则宝毕薇张克勤杨金奎
- 关键词:基因差异表达渗透胁迫
- HOG1基因在烟草赤星病菌渗透压和抗药性调节中的功能研究
- 本论文选择烟草赤星病的病原真菌长柄链格孢(Alternaria longipes)为实验材料,选择在酵母中作为渗透压调节通路中的关键基因HOG1作为研究对象,对它在长柄链格孢中渗透压调节的作用以及对二甲酰亚胺类杀菌剂(D...
- 毕薇
- 关键词:烟草赤星病抗药性基因敲除
- 长柄链格孢四个二甲酰亚胺类杀菌剂胁迫差异表达基因的克隆与序列分析
- 2011年
- 为了阐明烟草赤星病病原真菌长柄链格孢Alternaria longipes对二甲酰亚胺类杀菌剂(DCFs)抗性的分子机理,前期克隆了16个DCFs胁迫差异表达基因的部分cDNA片段。为了利用基因敲除技术进一步分析这些差异表达基因的功能,本研究选取4个差异表达基因,即AlATP7、AlCIT1、AlGLUT和AlHSP88,应用DNA walking技术对它们两侧的未知序列进行克隆。DNA测序和Blast搜索表明,AlATP7基因开放阅读框为712 bp,含4个外显子和3个内含子,编码169个氨基酸;AlCIT1、AlGLUT和AlHSP88基因未克隆到全长序列,5′末端还有200-300 bp才到达翻译起始密码子ATG;在这些DNA序列中,AlCIT1基因长1 214 bp,含1个内含子,编码386个氨基酸;AlGLUT基因长1 308 bp,含1个内含子,编码417个氨基酸;AlHSP88基因长2 087bp,含2个内含子,编码628个氨基酸。与其他丝状真菌的氨基酸序列同源性比对发现,AlATP7和线粒体ATP合酶D亚基、Al-CIT1和柠檬酸合成酶、AlGLUT和主要易化子超家族(MFS)类型葡萄糖转运子、AlHSP88和热休克蛋白HSP88分别具有很高的同源性。同时,还对4个DCFs胁迫差异表达基因的系统发育进行分析。基于这些蛋白功能的文献报道和前期的研究,推测A.longipes存在着一种新的DCFs抗性机制:A.longipes利用MFS类型葡萄糖转运子将DCFs排除到细胞外解毒,线粒体ATP合酶和柠檬酸合成酶参与能量供给,而热休克蛋白AlHSP88可能在该机制中促进一些重要蛋白的正确折叠和修复过程中发挥重要作用。
- 罗义勇刘卫红柳陈坚毕薇张克勤杨金奎
- 关键词:线粒体柠檬酸合成酶