姜望舒
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 供职机构:北京师范大学生命科学学院细胞增殖及调控生物学实验室更多>>
- 发文基金:北京市科技计划项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- Autotaxin多克隆抗体的制备被引量:1
- 2008年
- 目的:表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的Autotaxin(58-157位氨基酸)融合蛋白,制备抗Autotaxin的多克隆抗体。方法:构建pET-21 c-Autotaxin(58-157)重组表达质粒,转入BL21大肠杆菌,IPTG诱导蛋白表达,经镍离子金属螯合树脂纯化后,用纯化的蛋白免疫家兔,制备抗Autotax-in的多克隆抗体。ELISA检测抗体效价,Western blot检测抗体特异性,并用于免疫组化实验。结果:在大肠杆菌中高表达Autotaxin(58-157)-His6融合蛋白,经亲和纯化后免疫家兔,获得了特异性的抗Autotaxin抗血清。结论:成功构建pET-21 c-Autotaxin(58-157)表达质粒,原核表达获得高纯度的目的蛋白,制备出高效价的特异性抗Autotaxin多克隆抗体。
- 李颂姜望舒邱洋张俊杰
- 关键词:AUTOTAXIN原核表达多克隆抗体