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李准
李准
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
云南农业大学植物保护学院农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室
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相关领域:
农业科学
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合作作者
彭杰军
云南农业大学植物保护学院农业生...
姬盼
云南农业大学植物保护学院农业生...
陈海如
云南农业大学植物保护学院农业生...
李晓鹏
云南农业大学植物保护学院农业生...
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李准
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云南农业大学...
年份
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2013
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香石竹斑驳病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备
被引量:2
2013年
香石竹斑驳病毒(Carnation mottle virus,CarMV)是侵染香石竹的主要病毒。本研究从已鉴定的CarMV毒源植物中提取总RNA,克隆外壳蛋白(cp)基因后构建pET30a-CP重组质粒,并转入BL21(DE3)pLysS进行原核表达。通过对诱导温度、初菌浓度、IPTG的浓度等表达条件进行优化,目的蛋白在37℃,IPTG终浓度为1.0 mmol/L的条件下,诱导表达6 h后获得最高表达量。采用割胶的方法纯化cp蛋白,纯化后的目的蛋白免疫小鼠获得了特异性抗血清。经Western-blot检测,结果表明所制备的抗血清与诱导表达的重组蛋白及接种CarMV的香石竹样品均发生特异性结合。利用所制备抗血清对昆明地区的48个香石竹样品进行抽检,结果表明香石竹样品的带毒率为79.2%。本研究为大规模抗血清生产、检测应用和深入研究该病毒cp基因与寄主的互作奠定基础。
李晓鹏
王连春
彭杰军
姬盼
李准
孔宝华
陈海如
关键词:
香石竹斑驳病毒
外壳蛋白基因
原核表达
抗血清
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