刘彩霞
- 作品数：21 被引量：37H指数：4
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 拟南芥CYCD3;1基因植物表达载体的构建及在烟草中的遗传转化分析被引量：3
- 2016年
- 为了分析植物D型细胞周期蛋白在细胞周期中的作用,采用PCR方法从拟南芥花序中克隆出At CYCD3;1基因的全长c DNA序列。该基因的开放读码框为1131 bp,预测编码376个氨基酸,蛋白质的分子量为42701.6 Da,蛋白质的等电点为4.89。构建植物表达载体p ROKII-At CYCD3;1,并利用农杆菌介导的叶盘法将外源基因导入野生型烟草中。通过PCR及q RT-PCR检测显示,At CYCD3;1成功插入烟草基因组并在转录水平表达。表型观察显示转基因株系与野生型株系相比主要表现为花冠宽度变大,花瓣和萼片长度变长,果实变大,茎干弯曲,叶片卷曲,根尖细胞变小。综上,拟南芥At CYCD3;1基因的过量表达影响了植物的生长发育。
- 代丽娟郑唐春刘彩霞刘轶由香玲曲冠证
- 关键词：周期蛋白烟草
- 烟草化学诱导表达系统的建立被引量：4
- 2016年
- 化学诱导表达系统对植物功能基因的研究及植物基因工程应用有重要意义。XVE是以雌激素为基础的用于诱导转基因植物中目的基因表达的一种系统,能够在可调控方式下诱导基因的表达。目前,以烟草为遗传转化材料进行XVE系统研究的详细报道还未见发表。本文以烟草作为研究对象,利用PCR技术从本实验保存的质粒pROKII-GFP中扩增出GFP基因。构建雌激素诱导型植物表达载体(p ER8-GFP)并利用农杆菌介导的叶盘法将外源基因导入野生型烟草中;经潮霉素抗性筛选出转化植株后,用PCR鉴定出阳性转化植株,将阳性转化植株利用不同浓度和不同时间的雌激素进行处理,并结合定量PCR和Night SHADE植物活体成像系统对转基因植株的表达水平进行检测。结果表明诱导p ER8-GFP载体在烟草中表达的最适雌激素浓度为25μmol·L^(-1),最适时间为48 h;同时在烟草胚轴与根尖细胞中检测到荧光信号,表明XVE化学诱导系统在烟草中也可以高效、严格的依赖雌激素的诱导来控制目的基因表达。本研究将为烟草相关的化学诱导表达研究提供技术支持与解决方案。
- 代丽娟郑唐春刘彩霞刘轶由香玲曲冠证
- 关键词：雌激素诱导基因表达烟草
- 一种小黑杨单倍体细胞系Qu-1的获得及悬浮培养方法
- 本发明属于植物生物技术领域，主要提供一种小黑杨单倍体细胞系Qu‑1的获得及其悬浮培养方法。选取单核靠边期的小黑杨花粉，添加有2mg/L 2,4‑D、1mg/L KT、30g/L蔗糖和7.5g/L琼脂的MS培养基中诱导出愈...
- 曲冠证刘彩霞樊二勤
- 文献传递
- 一种可实现植株再生的银中杨激素自养型细胞系
- 本发明属于植物生物技术领域，主要提供了一种可实现植株再生的银中杨激素自养型细胞系，并建立了悬浮培养体系和不定芽分化生根的植株再生体系。单核靠边期的银中杨花粉在添加有2mg/L 2,4‑D、0.5mg/L KT、30g/L...
- 曲冠证刘彩霞李开隆
- 文献传递
- 拟南芥AtPI基因植物表达载体的构建及其在烟草中的遗传转化被引量：5
- 2016年
- 花是被子植物主要的繁殖器官,在繁育后代的过程中,发挥着极其重要的作用,PISTILLATA（PI）基因作为控制花器官发育的B类功能基因中的一员,在花器官发育中起到重要的作用。为探究PI基因在花瓣和雄蕊发育中的功能,本文以拟南芥（Arabidopsis thaliana）中的PI基因作为研究对象,利用PCR技术从拟南芥花序c DNA扩增出At PI基因,构建植物表达载体（p ROKⅡ-At PI）并进行烟草（Nicotiana tobacum）转化。转基因植株的PCR检测结果表明,At PI基因已经整合到了烟草基因组中。在T2代植株中,通过实时定量荧光PCR检测显示,At PI在m RNA水平也均有表达。过量表达PI的转基因烟草在花器官中存在明显表型,与野生型相比主要表现为转基因植株花冠变小,雄蕊缩短,果实畸形且子房基部比野生型长5～10 mm,上述结果表明At PI基因是特异性参与雄蕊和花瓣的发育并起着至关重要的作用。
- 刘彩霞郑唐春代丽娟刘轶曲冠证
- 关键词：拟南芥烟草雄蕊子房
- 小黑杨PsnHB22基因在烟草中的遗传转化研究被引量：1
- 2020年
- HD-Zip转录因子在光信号转导、非生物胁迫、叶片发育等方面发挥重要的作用,HB22转录因子是HD-ZipⅠ亚家族的成员之一。为研究PsnHB22基因的功能,从小黑杨(Populus simonii×P.nigra)cDNA中克隆PsnHB22基因并构建植物表达载体进行烟草(Nicotiana tabacum)的遗传转化,以获得该基因过量表达的转基因株系。对转基因株系进行PCR、qRT-PCR分子检测后观察表型,结果显示在营养生长时期,转基因烟草叶片窄小并且株高显著低于野生型对照。测定转基因烟草及野生型叶片的叶绿素含量,发现转基因烟草叶绿素含量显著高于野生型。由此推测PsnHB22基因在植株高生长、光合作用及叶片的形态建成等过程中起着重要的作用。
- 李潺张翔郑兰常成龙刘彩霞郑密由香玲
- 关键词：小黑杨烟草叶绿素含量
- 一种快速鉴定小黑杨纯合二倍体的方法
- 本发明公开一种快速鉴定小黑杨纯合二倍体的方法。本发明基于小黑杨全基因组重测序的信息，筛选出可以鉴定小黑杨特定SNP位点的特异性引物，通过SNP分子标记技术和PCR技术相结合的方法，进行鉴定由小黑杨获得的纯合二倍体，其具有...
- 刘彩霞曲冠证陈肃王遂刘文轩樊二勤刘宇航
- 白桦开花抑制因子BpFLC与BpSVP蛋白互作的结构域筛选与互作验证
- 2015年
- 为深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的相互作用的分子机理。从重组质粒pGBKT7-BpFLC、pGBKT7-BpSVP分别克隆出6个BpFLC截短体（BpFLC1～6）和6个BpSVP截短体（BpSVP1～6），分别编码MI、MIK、K、IKC、KC和C域。在酵母Y2HGold菌中，分别共转诱饵质粒pGBKT7-BpFLC1～6×pGADT7-BpSVP及pGBKT7-BpFLC×pGADT7-BpSVP1～6。酵母转化子Y2HGold[pGBKT7-BpFLC2～5×pGADT7-BpSVP]，可在选择性固体培养基TDO、QTO／A上生长，并在QDO／A／X上长出蓝色菌落，表明BpSVP能与截短体蛋白BpFLC2～5异源结合。此外酵母Y2HGold[pGBKT7-BpFLC×pGADT7-BpSVP2～5]也能同时激活报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1。进一步研究发现：Y2HGold[pGBKT7-BpFLC3×pGADT7-BpSVP3]存在相互作用，表明BpFLC的K域与BpSVP的K域能够异源结合，是介导BpFLC与BpVP蛋白互作的关键结构域。
- 臧丽娜郑唐春代丽娟刘彩霞曲冠证
- 关键词：白桦酵母双杂交
- 84K杨PagC3H3基因表达模式分析被引量：2
- 2019年
- 木质素作为木材的主要组成成分,通常是由3种单体聚合而成,在其生物合成过程中,共有10个酶家族参与负责将苯丙胺酸转化为单体木质素,其中C3H是在对-香豆酰辅酶A(p-coumaroyl CoA)到咖啡酰辅酶A(caffeoyl CoA)的羟基化过程和G/S单体形成中的关键控制酶类,探究PagC3H3基因表达模式,对于进一步了解该基因功能具有重要意义。该研究通过定量PCR对PagC3H3基因的组织特异性表达进行分析;克隆得到了长度为2035bp的PagC3H3的启动子序列,预测含有多个顺式作用元件;同时,将获得的PagC3H3的启动子序列构建植物表达载体pBI121-PagC3H3pro::GUS,进行拟南芥瞬时转化,结果显示PagC3H3基因在84K杨的根、中部茎节和基部茎节中的表达量较高;瞬时转化拟南芥,GUS染色表明:在下胚轴和根中GUS活性较强,由此推测PagC3H3基因在木质素合成过程中发挥作用。
- 樊二勤刘彩霞付鹏跃杨传平曲冠证
- 关键词：84K杨启动子拟南芥
- 一种可实现植株再生的银中杨激素自养型细胞系
- 本发明属于植物生物技术领域，主要提供了一种可实现植株再生的银中杨激素自养型细胞系，并建立了悬浮培养体系和不定芽分化生根的植株再生体系。单核靠边期的银中杨花粉在添加有2mg/L 2,4‑D、0.5mg/L KT、30g/L...
- 曲冠证刘彩霞李开隆
- 文献传递
